葉黃素是許多生物體內(nèi)合成的有色類異戊二烯代謝物，與玉米黃質(zhì)一起形成黃斑色素，具有藍(lán)光過濾和抗氧化的特性。從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飲食中去除葉黃素會(huì)導(dǎo)致視網(wǎng)膜的早期退化跡象，而患有后天性黃斑色素喪失（黃斑毛細(xì)血管擴(kuò)張癥）的患者表現(xiàn)出嚴(yán)重的視力障礙，表明黃斑色素的重要性。葉黃素還與年齡相關(guān)性黃斑變性（AMD）和白內(nèi)障的風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。葉黃素有助于淬滅復(fù)雜生理反應(yīng)產(chǎn)生的自由基，從而保護(hù)眼睛免受氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、線粒體功能障礙和炎癥的影響。葉黃素可能有助于降低某些類型癌癥的風(fēng)險(xiǎn)，特別是乳腺癌和肺癌以及多囊卵巢綜合癥。研究表明葉黃素對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞的增殖有抑制作用，并能誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡，葉黃素通過阻斷脂肪細(xì)胞分化的早期調(diào)節(jié)因子從而抑制脂肪生成，還可通過提高NO水平、降低MDA含量和CaN活性等抗氧化、阻止鈣離子通道的作用，從而抑制膠原的合成，抑制大鼠MF，對(duì)心肌起到一定的保護(hù)作用。研究表明葉黃素還可能對(duì)大腦的發(fā)育和功能有貢獻(xiàn)。

多環(huán)芳烴（polycyclicaromatichydrocarbons，PAHs）及其取代基存在于所有水源中。含有PAHs的高水平混合污染物的暴露會(huì)導(dǎo)致眼部刺激、惡心、嘔吐和腹瀉等癥狀。許多PAHs及其環(huán)氧化合物對(duì)微生物以及包括人類在內(nèi)的高級(jí)生命形式具有劇毒、誘變或致癌作用。PAHs可在栽培過程中從空氣和土壤中轉(zhuǎn)移到植株，萬壽菊在種植、采收、運(yùn)輸、加工等過程中易受到PAHs的污染進(jìn)而在葉黃素產(chǎn)品中檢測到。由于多環(huán)芳烴存在多種形式，歐盟委員會(huì)（EC）制定了苯并（α）芘（benzopyrene，BaP）、苯并［b］熒蒽（Benzo［b］fluorathene，B［b］F）、苯并［a］蒽（Benz［a］anthracene，BaA）、屈（chrysene，CHR）作為四種關(guān)鍵的多環(huán)芳烴標(biāo)記物（以下簡稱PAH4）的安全水平要求（No.18812006）：油脂中BaP要求小于2μg/kg，四種多環(huán)芳烴總量要求小于10μg/kg。其中BaP具有強(qiáng)烈的致癌性，B［b］F具有細(xì)胞毒性，BaA可引起細(xì)胞損傷和肝臟疾病，當(dāng)兩種或幾種同時(shí)暴露于人體時(shí)毒性更強(qiáng)。

鄰苯二甲酸二丁酯（di-butylphthalate，DBP）和鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（di-2-ethylhexylphthalate，DEHP）是塑料生產(chǎn)過程中使用的主要鄰苯二甲酸酯，它們已成為導(dǎo)致嚴(yán)重環(huán)境問題的污染物。DBP和DEHP可擾亂整個(gè)胎盤的內(nèi)分泌和免疫功能，導(dǎo)致胎膜早破，胎盤早剝，先兆子癇和早產(chǎn)等。研究表明DBP和DEHP在成熟小麥組織中的積累和代謝及其對(duì)籽粒解毒和抗氧化系統(tǒng)有影響，可從土壤進(jìn)入籽粒而誘導(dǎo)活性氧的產(chǎn)生，并上調(diào)抗氧化酶（細(xì)胞色素P4503A4和過氧化物酶）的表達(dá)和活性。李曉貝等對(duì)四種蔬菜中DBP和DEHP及其代謝物的吸收累積進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，土壤中的DBP、DEHP能被蔬菜產(chǎn)品吸收富集，并且在體內(nèi)代謝出毒性比母體更高的單酯產(chǎn)物。衛(wèi)生部辦公廳2011年發(fā)布的衛(wèi)辦監(jiān)督函（2011）551號(hào)中規(guī)定：食品、食品添加劑中的鄰苯二甲酸二（a-乙基已脂）（DEHP）、鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）和鄰苯二甲酸二正丁酯（DBP）最大殘留量分別為1.5mg/kg、9.0mg/kg和0.3mg/kg。歐盟對(duì)以上塑化劑要求與中國相同。DINP因限值較高且鮮見超標(biāo)報(bào)道，本研究不做檢測。

本研究通過對(duì)葉黃素生產(chǎn)加工過程跟蹤取樣，從原料萬壽菊鮮花至葉黃素浸膏至成品葉黃素晶體和低含量葉黃素完全對(duì)應(yīng)，通過樣品數(shù)據(jù)結(jié)果分析PAH4和塑化劑DBP、DEHP在葉黃素生產(chǎn)加工過程中的遷移量及遷移規(guī)律，以期為葉黃素提取過程中典型多環(huán)芳烴和塑化劑的管控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本研究所用萬壽菊鮮花及葉黃素相關(guān)產(chǎn)品均由晨光生物科技集團(tuán)股份有限公司提供。

乙腈、正己烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷，色譜純，美國ThermoFisher公司；丙酮，色譜純級(jí)：上海星可高純?nèi)軇┯邢薰?；超純水，自制；GPC流動(dòng)相：環(huán)己烷：乙酸乙酯=1∶1（體積比）；BaP標(biāo)準(zhǔn)品：德國Dr.Ehrenstorfer公司；DBP、DEHP標(biāo)準(zhǔn)品：天津一方科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

LC-20AT高效液相色譜儀（HPLC）配RF-20Axs熒光檢測器、AUY220型分析天平：日本島津；Agilent7890B-7000D氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）：安捷倫科技有限公司；QSC-12T氮吹儀：上海泉島科貿(mào)有限公司；PreplincGPC凝膠凈化色譜：美國J2Scientific公司；Master-SUVF超純水機(jī)：上海和泰儀器有限公司；H-2050R高速冷凍離心機(jī)：湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司；R201L旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海申生科技有限公司；XW-80A渦旋混合器：濟(jì)南精密科學(xué)儀器儀表有限公司；TH-600型超聲波清洗器：濟(jì)寧天華超聲電子儀器有限公司；固相萃?。⊿PE）裝置，固相萃取柱：PSA/Silica復(fù)合填料玻璃柱（1000mg，6mL）：AgelaTechnologies。

1.3 檢測方法

PAH4檢測方法按吉桂珍等《5種天然植物提取物中4種多環(huán)芳烴的HPLC-FLR測定方法》進(jìn)行檢測。DBP、DEHP按國標(biāo)GB5009.271-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鄰苯二甲酸酯的測定》進(jìn)行檢測。

1.4 遷移率計(jì)算

分別計(jì)算出萬壽菊至鮮花顆粒、鮮花顆粒至渣子及葉黃素浸膏、葉黃素浸膏至葉黃素晶體及低含量葉黃素的重量得率，再由重量得率及各階段產(chǎn)品典型多環(huán)芳烴和塑化劑的單位含量得到遷移總量，并計(jì)算出遷移率。

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