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抑制煙草青枯病的3株放線菌篩選及鑒定(二)

發(fā)布時(shí)間:2021-06-16 17:45 編輯者:特邀作者周世紅

2.2拮抗菌抑菌譜測(cè)定

3株拮抗放線菌菌株抑制其他病原菌的結(jié)果如表1所示,3株放線菌的固體菌塊和發(fā)酵液對(duì)煙草猝倒病原菌均無(wú)抑制效果,菌株SC-105-B-10的發(fā)酵液和菌株L2-003-A-5的固體菌塊對(duì)煙草黑脛病原菌具有較弱的抑制效果;3株菌的固體菌塊和發(fā)酵液對(duì)赤星病原菌均有抑制效果,對(duì)辣椒、番茄和馬鈴薯等茄科類植物青枯病原菌均有抑制作用,即3株放線菌對(duì)茄科類植物青枯病原菌具有廣譜的拮抗作用。

2.3菌株SC-105-B-10的鑒定

2.3.1菌株的SC-105-B-10形態(tài)特征

菌株SC-105-B-10在掃描電鏡下的形態(tài)如圖2所示,菌株的氣生菌絲明顯呈短直鏈狀,孢子鏈的長(zhǎng)度不一;孢子呈短圓柱形,四周有內(nèi)陷現(xiàn)象。氣生菌絲生長(zhǎng)能力強(qiáng),基內(nèi)菌絲錯(cuò)綜生長(zhǎng),孢子鏈密集。將菌株SC-105-B-10在供試的8種培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)和觀察,發(fā)現(xiàn)在馬鈴薯浸汁瓊脂和營(yíng)養(yǎng)瓊脂中長(zhǎng)勢(shì)很弱,但在高氏一號(hào)瓊脂上長(zhǎng)勢(shì)較好(圖3);在其他8種培養(yǎng)基上氣生菌絲多呈灰白或淡黃色,基內(nèi)菌絲呈灰綠色,無(wú)可溶性色素(表2)。

2.3.2菌株SC-105-B-10的生理生化特征

通過(guò)對(duì)各拮抗菌株生理生化特征的檢測(cè),獲得如表3所示的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菌株SC-105-B-10的pH生長(zhǎng)范圍是6~9,pH7~8時(shí)長(zhǎng)勢(shì)最好,在低于pH6和高于pH9的條件下不能生長(zhǎng)。菌株SC-105-B-10耐受10%NaCl;可生長(zhǎng)的溫度范圍為25~45℃,最適溫度為30℃。淀粉水解試驗(yàn)、凝固牛奶、纖維素、油脂、產(chǎn)H2S、過(guò)氧化氫酶和甲基紅反應(yīng)陽(yáng)性,液化明膠、硝酸鹽還原和苯丙氨酸脫氫酶反應(yīng)呈陰性。

2.3.3菌株SC-105-B-10的16SrRNA基因部分序列分析

測(cè)序結(jié)果表明菌株SC-105-B-10的16SrRNA基因部分序列長(zhǎng)度為1492bp,在GenBank核酸登錄號(hào)為KT633863。根據(jù)系統(tǒng)發(fā)育分析,菌株SC105-B-10屬于鏈霉菌屬(Streptomyces),與Streptomy-cesgriseussubsp.griseusKCTC9080T、Streptomycescy-aneofuscatusNRRLB-2570T、Streptomycescinereorec-tusNBRC15395T、StreptomycesfulvorobeusNBRC15897T、StreptomycesmicroflavusNBRC13062T和StreptomycesfulvissimusDSM40593T聚為一簇,與這些菌的16SrRNA基因序列相似性均為99.7%。通過(guò)鄰接法構(gòu)建的基于菌株SC-105-B-10及相關(guān)菌株16SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹如圖4所示。

綜合分析多種鏈霉菌的特性(Rongetal,2010;黃苛等,2010;邵陽(yáng),2011;李濤等,2007),菌株SC-105-B-10的形態(tài)特征和生理生化特征與細(xì)黃鏈霉菌(S.microflavus)更接近(王慧玲等,2009;Da‐vid,2011;Lanootetal,2005),因此判斷SC-105-B10是細(xì)黃鏈霉菌的一個(gè)菌株。

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