1.2.4 活性成分檢測(cè)

活性成分含量均以干基計(jì)。

（1）總黃酮

參照周文菊等報(bào)道方法，對(duì)上述樣品液測(cè)定總黃酮含量，繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品含量（X，μg）與吸光度（Y）的曲線：Y=0.0008X+0.0147，R²=0.9984。分別吸取1.0mL樣品液加入10mL容量瓶中，在波長(zhǎng)510nm處測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各樣品總黃酮含量，此時(shí)樣品中總黃酮含量以蘆丁的當(dāng)量表示，每個(gè)樣品平行3次。

（2）總酚

參照Giri等報(bào)道方法，對(duì)上述樣品液測(cè)定總酚含量，繪制沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品含量（X，μg）與吸光度（Y）的曲線：Y=0.0056X+0.0291，R²=0.9991。分別準(zhǔn)確吸取1.0mL樣品液加入25mL容量瓶中，在波長(zhǎng)750nm處測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各樣品總酚的含量，此時(shí)樣品中總酚含量以沒食子酸的當(dāng)量表示，每個(gè)樣品平行3次。

（3）檳榔堿

參考朱曉瑜等報(bào)道和《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版方法制備標(biāo)準(zhǔn)品和樣品，分別進(jìn)行高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)，平行進(jìn)樣3次。檢測(cè)條件：色譜柱：ZORBAXEclipsePlusC₁₈（150mm×2.1mm，1.8μm）；流動(dòng)相：乙腈-磷酸溶液（2→1000，濃氨試液調(diào)節(jié)pH=3.8）（55∶45）；檢測(cè)波長(zhǎng)215nm；流速1mL/min，柱溫40℃，進(jìn)樣量為10μL。繪制檳榔堿標(biāo)準(zhǔn)品含量（X，mg/mL）與峰面積（Y）的曲線：Y=6.6821×10⁴X–3.144×10⁴，R²=0.9993。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各樣品中檳榔堿的含量。

（4）揮發(fā)性成分

參照Yuan等報(bào)道方法進(jìn)行樣品制備，加入100μL內(nèi)標(biāo)溶液（α-蒎烯900μg/mL）。

檢測(cè)條件：固相微萃?。悍謩e稱取各樣品1.0g放入進(jìn)樣瓶，將進(jìn)樣瓶放置在90℃溫度控制攪拌器中以250r/min轉(zhuǎn)速動(dòng)態(tài)平衡10min；再在上述條件下將萃取頭插入進(jìn)樣瓶動(dòng)態(tài)萃取20min；然后GC-MS進(jìn)樣，解吸溫度250℃，解吸時(shí)間5min，平行進(jìn)樣3次。

GC-MS條件：色譜柱：HP-5ms毛細(xì)管色譜柱（30m×0.25mm，0.25μm）；升溫程序：70℃保持2min，以10℃/min升至130℃，保持2min，再以15℃/min升至280℃，保持2min；進(jìn)樣口溫度280℃；載氣（He）流速1mL/min；壓力57.4kPa；不分流進(jìn)樣。電子轟擊（EI）離子源；離子源溫度230℃；接口溫度280℃；溶劑延遲3min；數(shù)據(jù)采集方式Scan；質(zhì)量掃描范圍m/z35～550；檢測(cè)器增益電壓1.34kV。采用內(nèi)標(biāo)法計(jì)算主要揮發(fā)性物質(zhì)的相對(duì)含量。

1.2.5 抗氧化能力

（1）DPPH法。參照張丹等報(bào)道的方法，制備樣品和DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)，每份樣品平行3次。按照公式計(jì)算清除率：

清除率=[1–(A_樣品–A_對(duì)照)/A_空白]×100%

式中：A_樣品為樣品對(duì)DPPH作用后的吸光值，A對(duì)照為樣品本身不加DPPH的吸光值，A空白為DPPH本身在測(cè)定波長(zhǎng)的吸光值，陽性對(duì)照為BHT。

（3）FRAP法：配置0.3mol/LpH3.6的醋酸緩沖液200mL，10mmol/LTPTZ溶液25mL，20mmol/LFeCl₃溶液50mL，上述溶液以10∶1∶1比例混合成工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。稱取27.8mgFeSO₄，溶解并定容到1mL，此時(shí)濃度即為100mmol/L。取適量100mmol/LFeSO₄溶液稀釋至0.15、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5mmol/L。各樣品100μL加入工作液2.4mL，37℃水浴10min后，593nm處測(cè)定吸光度。繪制FeSO₄濃度（X，mmol/L）與吸光度（Y）的曲線：Y=0.4334X+0.1188，R²=0.9916，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各樣品的FRAP值，陽性對(duì)照BHT。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用分析軟件IBMSPSSStatistics21進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA）和鄧肯多重比較法（Duncan’smultiplerangetest）進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果以相對(duì)含量（平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 干燥方式對(duì)檳榔外觀形態(tài)的影響

2.1.1 失水率

不同干燥方式對(duì)檳榔皮層的水分遷徙變化影響見圖1。由圖可知，檳榔皮層在干燥初期水分減少較快，后期水分減少較慢，直至趨于穩(wěn)定。這是由于檳榔皮層是多孔性物料，其間有許多毛細(xì)管，所以在干燥初期的失水率較高，除去的是毛細(xì)管內(nèi)的非結(jié)合水分；而在干燥后期，除去的是壁內(nèi)的結(jié)合水分，這部分水分散失較慢，所以干燥速率低。通過比較得知，微波干燥水分散失較快，最快到達(dá)干燥終點(diǎn)，其次是烘干和曬干這類溫度提升的干燥方式，風(fēng)干和凍干由于溫度較低，水分脫除耗時(shí)較長(zhǎng)。

2.1.2 色澤變化

隨著水分遷徙，干燥方式對(duì)檳榔外皮色澤的影響如圖2所示。L*值代表亮度，干燥與鮮檳榔相比均有不同程度的增加，表示亮度越來越高；其中微波干燥出現(xiàn)了先升高后下降的趨勢(shì)，對(duì)比圖1可知，亮度在失水率約50%時(shí)開始下降。

a^*值代表紅綠色度,在負(fù)值時(shí)表示綠色程度，在正值時(shí)表示紅色程度。隨著干燥程度增加，檳榔表面的綠色度下降，向紅色度（正向）提升；冷凍干燥的綠色度下降最小，凍干的干燥方式能較好地保護(hù)檳榔表面的綠色；微波干燥的綠色度下降明顯，且紅色度逐漸增加，根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，微波干燥過程劇烈致局部溫度急劇升高，檳榔表面褐變反應(yīng)劇烈，呈紅色物質(zhì)增多。

b^*值代表黃藍(lán)色度，在正值時(shí)表示黃色程度，干燥過程除風(fēng)干外較鮮檳榔均有不同程度的降低，表示黃色程度提高。

2.1.3 厚度變化

檳榔皮層厚度隨著失水率的增加而逐漸變薄，如圖3。冷凍干燥下降幅度最小，厚度保持較好；微波在干燥過程中出現(xiàn)厚度小幅度增加再下降的現(xiàn)象，可能由于在微波干燥過程中，存在加熱不均勻現(xiàn)象，導(dǎo)致物料局部過熱影響水分遷徙。從圖3可見，溫度越高的干燥方式，厚度下降的程度越大。

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相關(guān)鏈接：磷酸，乙腈，蘆丁，沒食子酸