2.1.6 穩(wěn)定性試驗

取ZSP粉末2.0 g，精密稱定，

按照“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，室溫放置，分別于0、2、4、6、8、10、12、24 h按照“2.1.1”項下色譜條件進樣，記錄峰面積，沒食子酸、綠原酸、沉香四醇、鞣花酸、丁香酚、β-細辛醚、α-細辛腦、甘草酸銨峰面積的RSD值分別為0.14%、1.08%、0.22%、0.08%、0.72%、0.47%、1.84%、1.71%，表明該供試品溶液在室溫下24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.7 重復(fù)性試驗

取同一批次ZSP粉末（批號1908003）2.0 g，精密稱定，按照“2.1.3”項下方法制備6份供試品溶液，按照“2.1.1”項下色譜條件進樣，計算沒食子酸、綠原酸、沉香四醇、鞣花酸、丁香酚、β-細辛醚、α-細辛腦、甘草酸銨峰面積的RSD值分別為0.06%、1.03%、0.19%、0.12%、0.29%、0.57%、1.86%、1.54%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.1.8 加樣回收率試驗

取同一批次ZSP粉末（批號1908003）共6份，每份1.0 g，精密稱定，置50 mL具塞錐形瓶中，精密量取質(zhì)量濃度為1.66 mg/mL沒食子酸、0.52 mg/mL綠原酸、0.97 mg/mL沉香四醇、0.67 mg/mL鞣花酸、1.74 mg/mL丁香酚、0.29 mg/mL β-細辛醚、0.26 mg/mL α-細辛腦、0.56 mg/mL甘草酸銨的混合對照品溶液1 mL，再按照“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件進樣，記錄峰面積，計算8種成分的加樣回收率以及RSD值，結(jié)果顯示，沒食子酸、綠原酸、沉香四醇、鞣花酸、丁香酚、β-細辛醚、α-細辛腦、甘草酸銨的平均加樣回收率分別為94.49%、100.43%、91.90%、94.66%、99.82%、95.85%、99.66%、97.34%，RSD值分別為0.45%、0.42%、0.26%、0.64%、0.60%、1.37%、0.78%、1.95%，表明該方法具有良好的回收率。

2.2 相對校正因子（fs/i）的確定及耐用性考察

2.2.1 fs/i的測定

取“2.1.2”項下混合對照品溶液進樣分析，記錄各成分的峰面積，以丁香酚為內(nèi)參物，取多個質(zhì)量點計算所得的fs/i，取平均值作為定量用fs/i［fs/i＝fs/fi＝AsCi/ AiCs，其中As為丁香酚對照品的峰面積，Cs為丁香酚對照品的質(zhì)量濃度，Ai為待測成分的峰面積，Ci為待測成分的質(zhì)量濃度］。計算待測組分沒食子酸、綠原酸、沉香四醇、鞣花酸、β-細辛醚、α-細辛腦、甘草酸銨的fs/i，結(jié)果見表2。結(jié)果顯示，沒食子酸、綠原酸、沉香四醇、鞣花酸、β-細辛醚、α-細辛腦、甘草酸銨與內(nèi)參物丁香酚之間的fs/i分別為0.433 4、1.068 3、0.505 6、0.141 6、0.429 0、0.346 2、1.748 8，RSD值分別

為0.77%、0.40%、0.90%、0.82%、0.61%、1.42%、1.69%。

2.2.2 不同色譜儀器和色譜柱對fs/i的影響

本實驗考察了Agilent 1260高效液相色譜儀器（美國）和LC-20A（20A）高效液相色譜儀（日本島津）對fs/i的影響，Agilent Zorbax SB-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）、Inertsil ODS-3柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）、BDS HypersilTM C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）對fs/i的影響，結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，2臺色譜儀器和3根色譜柱測得各待測成分fs/i的RSD均小于2.0%，表明fs/i在不同色譜儀器和色譜柱下具有良好的耐用性。

2.2.3 不同柱溫對fs/i的影響

本實驗考察了不同柱溫（25、30、35、40 ℃）對fs/i的影響，結(jié)果見表4。結(jié)果顯示，在不同柱溫測得各待測成分fs/i的RSD均小于2%，表明fs/i在柱溫有波動時具有良好的耐用性。

相關(guān)鏈接：色譜，丁香酚，綠原酸