3.3 響應面分析

應用Design-Expert.V8.0.6軟件對試驗結果進行分析，得到白芷揮發(fā)油得率與各因素之間交互作用的三維效應曲面圖，如圖5～圖10。由圖可知，白芷揮發(fā)油得率隨著液料比、浸泡時間、提取時間和粉碎粒度的增加，呈現(xiàn)先增加后減小的變化趨勢，各因素間的交互作用明顯，與方差分析的結果一致。

3.4 優(yōu)化提取參數(shù)與試驗驗證

通過建立的數(shù)學模型分析，可預測得到白芷揮發(fā)油的最佳提取工藝條件為液料比為19.67∶1mL/g、浸泡時間為2.28h、提取時間為5.36h、粉碎粒度為66.14目，在此條件下的揮發(fā)油得率為2.274%?？紤]到操作的可行性和白芷揮發(fā)油提取的實際條件，對預測工藝條件進行修正。確定最終的白芷揮發(fā)油最優(yōu)提取工藝條件為：液料比為20∶1mL/g、浸泡時間為2.3h、提取時間為5.4h、粉碎粒度為65目，此時的白芷揮發(fā)油得率為2.273%，與預測值接近，說明建立的模型真實可靠，可以比較準確地描述白芷揮發(fā)油提取工藝中液料比A（mL/g）、浸泡時間B（h）、提取時間C（h）、粉碎粒度C（目）4個因素與揮發(fā)油得率Y之間的關系。

3.5 體外抗氧化活性測定結果

3.5.1 DPPH自由基清除作用

如圖11所示，當白芷揮發(fā)油濃度從0.2mg/mL增加到1.2mg/mL，對DPPH自由基的清除率從16.81%增加到82.12%，其IC50為0.722mg/mL，隨著揮發(fā)油濃度的增加，其對DPPH自由基的清除率也隨之增加，表明白芷揮發(fā)油對DPPH自由基有一定的清除作用，其抗氧化作用弱于VC。

3.5.2 羥自由基清除作用

如圖12所示，當白芷揮發(fā)油濃度從0.2mg/mL增加到1.2mg/mL，對羥自由基的清除率從12.41%增加到68.12%，其IC50為0.882mg/mL，表明白芷揮發(fā)油對羥自由基有一定的清除作用，其抗氧化作用弱于VC。

4 結論

基于白芷揮發(fā)油的藥用價值，以白芷為原料，通過單因素試驗和Box-Behnken響應面法優(yōu)化水蒸氣蒸餾法提取白芷揮發(fā)油的提取工藝，最佳提取條件為：液料比為20∶1mL/g、浸泡時間為2.3h、提取時間為5.4h、粉碎粒度為65目，此時的白芷揮發(fā)油得率為2.273%，說明采用Box-Behnken響應面法優(yōu)化白芷揮發(fā)油的提取方法可行、可靠。并對在此條件下提取得到的白芷揮發(fā)油測定了對DPPH自由基和羥基自由的清除效果，考察其抗氧化活性。結果表明：白芷揮發(fā)油具有較強的抗氧化性，且隨著揮發(fā)油濃度的增大，其抗氧化活性增強，并呈線性關系。本研究通過優(yōu)化白芷揮發(fā)油的提取工藝，為白芷揮發(fā)油產品的進一步開發(fā)提供了一定的理論基礎，白芷揮發(fā)油的抗氧化活性研究，對于開發(fā)天然來源的美白化妝品、食品抗氧化劑和保鮮劑有一定的現(xiàn)實意義和參考價值。

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