北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
培養(yǎng)基 | RPMI-1640完全培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS |
傳代方法 | 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。 |
生長(zhǎng)條件 | 37℃;5%CO2+95%空氣; |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
存儲(chǔ)條件 | 液氮 |
類型 | 星狀細(xì)胞 |
安全等級(jí) | 1 |
形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣,短梭形,多角形,單層貼壁生長(zhǎng) |
共享方式 | 公益性共享 |
證書(shū)下載 | 說(shuō)明書(shū)文件 支原體檢測(cè)報(bào)告 |
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