瀉白散出自宋代錢乙的《小兒藥證直決》，收錄于2018年中國中醫(yī)藥管理局下發(fā)的《古代經(jīng)典名方目錄（第一批）》。瀉白散由桑白皮（炒黃）、地骨皮、炙甘草和粳米組成，為煮散劑，具有清泄肺熱，止咳平喘之功效。其中，桑白皮為生長數(shù)十年的桑樹除去外表粗皮的干燥根皮，其內(nèi)在質(zhì)量受生長年限影響較大。目前地骨皮主要為野生資源，其內(nèi)在質(zhì)量受生長環(huán)境影響較大。甘草多為栽培品，生長時(shí)間多為2～3年，其內(nèi)在質(zhì)量相對(duì)穩(wěn)定。粳米的主要成分為淀粉和蛋白質(zhì)，有無粳米對(duì)瀉白散的特征圖譜無影響。鑒于市售桑白皮、地骨皮藥材質(zhì)量受生長年限等因素影響較大，內(nèi)在質(zhì)量參差不齊，開展經(jīng)典名方瀉白散指紋圖譜研究，以評(píng)估瀉白散組方中來自全國不同地區(qū)市售炒桑白皮、地骨皮、炙甘草的內(nèi)在質(zhì)量具有重要意義。

黃夢(mèng)婷等分析了桑白皮炮制前后指紋圖譜和色度值的差異性；曹斯瓊等標(biāo)定了桑白皮14個(gè)共有峰；董丹華等對(duì)不同產(chǎn)地的15批次地骨皮藥材進(jìn)行研究，確定了4個(gè)特征峰；陳倩倩等對(duì)47批次地骨皮飲片進(jìn)行質(zhì)量分析，發(fā)現(xiàn)不同廠家的地骨皮質(zhì)量差異較大；趙曉玲等測(cè)定并比較不同來源地骨皮藥材（包括野生、栽培和市售）中地骨皮甲素、乙素和阿魏酸的含量，發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地地骨皮各成分差異較大。自2018年《古代經(jīng)典名方目錄（第一批）》發(fā)布以來，對(duì)目錄中經(jīng)典名方的研究逐漸增多，但對(duì)瀉白散高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜的研究相對(duì)較少，王彥帥等在瀉白散的共有峰中指認(rèn)了桑皮苷A、甘草苷、甘草酸銨3種物質(zhì)；王彥等在瀉白散物質(zhì)基準(zhǔn)的指紋圖譜中，歸屬了10個(gè)特征峰，其中2個(gè)來自炒桑白皮、4個(gè)來自焙地骨皮、4個(gè)來自炙甘草。為了摸清市售炒桑白皮、地骨皮、炙甘草內(nèi)在質(zhì)量，保證瀉白散臨床用藥質(zhì)量及療效，筆者建立HPLC指紋圖譜方法并指認(rèn)3種單味藥的成分，對(duì)全國不同地區(qū)市售炒桑白皮、地骨皮、炙甘草進(jìn)行內(nèi)在質(zhì)量評(píng)價(jià)，以期為瀉白散經(jīng)典名方的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定及臨床用藥提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

高效液相色譜儀：2690/5型，配備2996DAD檢測(cè)器、全自動(dòng)進(jìn)樣器、高效液相色譜工作站，美國Waters公司。電子分析天平：XS205DU型，感量為0.0001g，瑞士梅特勒-托利多公司。桑白皮、地骨皮、炙甘草樣品：從全國各地收集桑白皮、地骨皮、炙甘草各13批樣品，經(jīng)山東省中醫(yī)藥研究院中藥資源研究室鑒定均為《中國藥典》正品。桑白皮按照2015年版《浙江省中藥炮制規(guī)范》照清炒法炮制成炒桑白皮。13個(gè)瀉白散組方及樣品信息見表1。

桑辛素、甘草酸、異甘草素、桑皮苷A、地骨皮乙素、芹糖甘草苷、甘草素、異甘草苷、甘草苷、綠原酸對(duì)照品：含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）均大于96%，批號(hào)分別為P09J7F8767、P31J9F66966、Z02M3L1、P12M9L61177、P22F10F81304、R03A9F67328、Z20J8X40265、R07D8F50056、Z10J8X39611、Y24J7K16726，上海源葉生物科技有限公司。甘草酸銨、東莨菪內(nèi)酯、大黃素對(duì)照品：含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）均大于96%，批號(hào)分別為110731-201720、110768-200504、110756-201913，中國食品藥品檢定研究院。乙腈、甲醇：均為色譜純，美國BCL公司。磷酸：分析純，天津市科密歐試劑公司。中藥指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件：2004A版，國家藥典委員會(huì)。實(shí)驗(yàn)用水：純凈水，屈臣氏集團(tuán)（香港）有限公司。

1.2 色譜條件

色譜柱：ThermoSyncronisC18柱（250nm×4.6mm，5μm，美國賽默飛世爾科技有限公司），填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；檢測(cè)器：二級(jí)管陣列檢測(cè)器；柱溫：30℃；流量：1mL/min；檢測(cè)波長：254nm，進(jìn)樣體積：5μL；分析時(shí)間：120min；流動(dòng)相：乙腈-0.1%甲酸水溶液，梯度洗脫程序見表2。

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相關(guān)鏈接：地骨皮，綠原酸，東莨菪內(nèi)酯，大黃素