4、同沸點、極性相差較大的組分分離

既可用非極性固定液，也可用極性固定液，使用非極性固定液時，極性物質(zhì)先出峰，在極性固定液中，非極性物質(zhì)先出峰。

5、其他選擇方法

有時受到客觀條件的限制，無法得到具有一定極性的單一固定液，在這種情況下，可使用“混合固定液柱”，包括混涂、混裝和串聯(lián)三種方法。

混涂是用兩種性質(zhì)不同的固定液按一定比例混合后，然后涂在擔(dān)體上；混裝是將分別涂有不同性質(zhì)固定液的擔(dān)體，按一定比例混合均勻后，裝入色譜柱；串聯(lián)是將裝有不同液體固定相的色譜柱，串聯(lián)起來使用。

二、擔(dān)體

擔(dān)體是一種具有化學(xué)惰性的多孔固定顆粒，它的作用是承擔(dān)固定液。由于擔(dān)體具有一個大的惰性表面，使固定液在其表面上呈薄膜狀態(tài)，為建立氣一液兩相分配平衡提供了較大的場所。

(一)擔(dān)體的分類和性能

擔(dān)體可分為硅藻土型和非硅藻土型，食品分析中常用的擔(dān)體是硅藻土型。它又可分為紅色擔(dān)體和白色擔(dān)體兩種。

(1)紅色擔(dān)體：紅色擔(dān)體表面孔穴密集，孔徑較小，表面積大，比表面積為4m²/g，平均孔徑為1μm，機械強度較好，能涂漬較多的固定液。但是紅色擔(dān)體的表面還存在著吸附活性中心，催化性也強，在分析極性物質(zhì)時會有拖尾現(xiàn)象，一般紅色擔(dān)體涂漬非極性固定液，分析非極性或弱極性的混合物。

(2)白色擔(dān)體：白色擔(dān)體是疏松顆粒，表面孔徑較粗，為8～9μm，比表面積只有1．0m²/g，機械強度不如紅色擔(dān)體，它的表面活性中心少，催化活性也較小，即有一個較為惰性的表面。一般白色擔(dān)體涂漬極性固定液，分析強極性或氫鍵型化合物。

(二)擔(dān)體的預(yù)處理

硅藻土型擔(dān)體的表面并非是惰性的。表面存在著硅醇基團(Si—OH)和硅醚基團(Si—O—Si)以及少量金屬氧化物，因此表面存在著氫鍵和酸、堿活性作用點，使擔(dān)體有吸附性能，甚至能產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)或催化反應(yīng)。這樣的擔(dān)體若與極性固定液相配合，尤其是在固定液用量較低時，當(dāng)分析極性組分時，極性組分不僅溶解在固定液的液膜中，而且還能被吸附在擔(dān)體的表面上，造成柱效下降，保留值改變。因此擔(dān)體(特別是紅色擔(dān)體)在使用前必須預(yù)處理，以除去擔(dān)體表面吸附活性中心。預(yù)處理的方法有以下幾種：

(1)酸洗法：用6mol/L的鹽酸浸煮擔(dān)體20一30min，然后用水洗至呈中性，烘干備用。酸洗可除去擔(dān)體表面的鐵等金屬氧化物，酸洗擔(dān)體主要用于分析酸類和酯類化合物。

(2)堿洗法：用5％的氫氧化鉀-甲醇溶液浸泡或回流擔(dān)體，用水沖洗至中性，烘干備用。堿洗可除去擔(dān)體表面的氧化鋁等酸性作用點，堿洗擔(dān)體用于分析胺類等堿性化合物。應(yīng)該注意的是非堿性物質(zhì)如酯類，有可能被堿洗擔(dān)體分解。

(3)硅烷化：將擔(dān)體與硅烷化試劑[二甲基二氯硅烷(DMCS)和六甲基二硅胺(HMDS)]反應(yīng)，除去擔(dān)體表面硅醇所引起的活性吸附中心。在硅烷化擔(dān)體上，涂布極性固定液時不易均勻，用量如果超過5％，柱效不好。硅烷化擔(dān)體只能有效地涂布非極性或弱極性的固定液，并只能在270％以下使用。

三、固定相制備

(一)固定液的涂漬

將擔(dān)體過篩后，根據(jù)固定液和擔(dān)體的質(zhì)量比(固定液配比，也稱液擔(dān)比)，準(zhǔn)確稱取一定量的固定液，將它溶解在適當(dāng)?shù)娜軇?乙醚、氯仿、乙醇、丙酮等，可根據(jù)固定液標(biāo)簽確定種類)中，溶劑量應(yīng)浸沒所取的擔(dān)體。待完全溶解后，將上述經(jīng)過篩預(yù)處理的(按需要而定)一定量擔(dān)體一次加入，迅速攪勻(在涂漬過程中，要避免用玻棒攪碎擔(dān)體)。在適當(dāng)溫度下，不時攪動讓溶劑均勻揮發(fā)，使固定液能均勻分布在擔(dān)體表面，然后在通風(fēng)櫥中或紅外燈下除去溶劑，待溶劑完全揮發(fā)后，則涂漬完畢。

(二)色譜柱的裝填

將已洗凈烘干的色譜柱一端用玻璃棉塞牢，包以紗布，與真空泵連接，在色譜柱的另一端，通過小漏斗，倒入已涂漬好的固定相，在裝填的同時邊抽氣邊輕輕敲擊柱管，使固定相裝得均勻而緊密，直至色譜柱裝滿為止。

(三)老化

固定相裝入色譜柱后，不能馬上使用，必須加熱老化，以除去殘余的溶劑以及某些易揮發(fā)性雜質(zhì)，并使固定液能均勻牢固地分布在擔(dān)體表面。

老化的方法是將色譜柱接入色譜儀氣路中，使色譜柱在通載氣情況下，在稍高于操作時的柱溫，但又不超過固定液的最高使用溫度極限的條件下，處理幾小時至十幾小時。老化時不得接通檢測器。

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