2.5 分子對(duì)接驗(yàn)證

將2.3得到的關(guān)鍵活性成分與對(duì)應(yīng)的重要靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證（表1）。所有活性成分與靶點(diǎn)的結(jié)合能均小于 0 kcal/mol。結(jié)果表明，這些關(guān)鍵活性成分與對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)具有很強(qiáng)的親和力，進(jìn)一步驗(yàn)證了上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

3 討論

在中醫(yī)理論中，抑郁癥、乳腺增生和功能性消化不良的發(fā)生、發(fā)展都與“肝郁”有著密切的聯(lián)系 。肝主疏泄，若肝氣郁結(jié)，情志不暢，則會(huì)導(dǎo)致抑郁癥的發(fā)生；若情志不暢，氣滯血停，則會(huì)導(dǎo)致乳腺增生的發(fā)生；脾主運(yùn)化，肝失條達(dá)，可進(jìn)一步導(dǎo)致脾氣虛弱不能運(yùn)化水谷，故出現(xiàn)食欲減退，引發(fā)功能性消化不良。因此，根據(jù)中醫(yī)理論，這3種疾病的共同發(fā)病機(jī)制為肝郁脾虛 。逍遙散是經(jīng)典復(fù)方，具有疏肝健脾之功效，歷史悠久，臨床應(yīng)用廣泛且療效確切，尤其是治療肝膽、脾胃及精神系統(tǒng)疾病。抓住“肝郁脾弱”這一共同的病理機(jī)制，可充分發(fā)揮中醫(yī)辨證施治、“異病同治”的優(yōu)勢(shì)，使其治療效果更佳。

本研究應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、分子對(duì)接技術(shù)及多元統(tǒng)計(jì)分析方法等探析了抑郁癥、乳腺增生和功能性消化不良的發(fā)病機(jī)制以及逍遙散“異病同治”的作用機(jī)制，共鑒定出逍遙散121種活性成分。并將其與現(xiàn)有治療抑郁癥、乳腺增生和功能性消化不良的藥物進(jìn)行PCA分析，判斷出其與現(xiàn)有藥物有類(lèi)似的特點(diǎn)，為逍遙散“異病同治”的臨床應(yīng)用提供了化學(xué)物質(zhì)依據(jù)。然后，通過(guò)構(gòu)建“單味藥-活性成分-共同靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖以及PPI網(wǎng)絡(luò)分析，發(fā)現(xiàn)逍遙散“異病同治”的主要是通過(guò)IL4、PCNA、ACHE、BAX和BCL2等靶點(diǎn)，主要涉及炎癥反應(yīng)、細(xì)胞免疫、脂質(zhì)代謝、細(xì)胞增殖、細(xì)胞因子等相關(guān)機(jī)制。同時(shí)，GO富集分析結(jié)果也提示這些信號(hào)通路或途徑是逍遙散“異病同治”潛在作用機(jī)制。其中，AGEs的增多可破壞神經(jīng)細(xì)胞，致使神經(jīng)細(xì)胞變性、壞死，降低神經(jīng)傳導(dǎo)速度，若其與RAGE結(jié)合易引發(fā)機(jī)體氧化應(yīng)激異常，促進(jìn)活性氧生成。

有研究表明，抑制AGEs與RAGE結(jié)合，可有效減輕神經(jīng)受損情況，增加神經(jīng)傳導(dǎo)速度，改善神經(jīng)功能。HIF-1是感知低氧的關(guān)鍵蛋白，在生物發(fā)育、代謝、貧血、損傷修復(fù)等生理和病理過(guò)程中有著重要的生物學(xué)意義。在HIF-1信號(hào)通路中，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是主要的介導(dǎo)者，有利于維持血管壁的完整性和正常的神經(jīng)發(fā)生。汪崇澤和盛國(guó)紅發(fā)現(xiàn)，促炎癥細(xì)胞因子可以介導(dǎo)炎癥反應(yīng)對(duì)應(yīng)激源的敏感性增加，導(dǎo)致抑郁發(fā)作敏感性增強(qiáng)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子可與多種細(xì)胞受體結(jié)合，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和血管的新生，促進(jìn)炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)。綜上，逍遙散主要是通過(guò)AGE-RAGE信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路和VEGF信號(hào)通路減少炎癥的發(fā)生，發(fā)揮“異病同治”抑郁癥、乳腺增生和功能性消化不良的作用。

其次，PPI網(wǎng)絡(luò)的核心靶標(biāo)表明，逍遙散治療抑郁癥、乳腺增生以及功能性消化不良主要與IL-6、IL-4、TNF、IL-1β以及IL-10等靶點(diǎn)密切相關(guān)。TNF-α是血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷或?qū)е卵芄δ芪蓙y的重要炎癥因子。TNF-α可使血管損傷和血栓形成，并能夠激活誘導(dǎo)NF-κB入核，激活NF-κB信號(hào)通路，促進(jìn)TNF-α、IL-6、IL-8等炎癥因子的釋放，從而引起和加重機(jī)體炎癥反應(yīng)。本研究表明，逍遙散主要是通過(guò)減少炎癥反應(yīng)發(fā)揮其“異病同治”作用。

同時(shí)，逍遙散中的山柰酚、槲皮素以及蘆薈大黃素等成分在其“異病同治”中發(fā)揮重要作用。山柰酚具有抑制AGE形成和消除自由基功能的作用，還可抑制NO降解來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)氧化損傷的內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用。已有研究表明，黃酮類(lèi)化合物在治療炎癥、抑郁癥和功能性消化不良等方面具有顯著療效 。

本研究應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)、分子對(duì)接技術(shù)及多元統(tǒng)計(jì)分析方法，揭示了抑郁癥、乳腺增生和功能性消化不良共同的發(fā)病機(jī)制為肝郁脾虛；并進(jìn)一步闡釋了逍遙散“異病同治”抑郁癥、乳腺增生和功能性消化不良的主要化學(xué)成分、關(guān)鍵靶點(diǎn)、關(guān)鍵通路。研究結(jié)果為中藥復(fù)方“異病同治”科學(xué)內(nèi)涵的闡釋提供了研究方法，為逍遙散臨床應(yīng)用和研發(fā)提供了理論依據(jù)。

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