3、萃取時間的考察

在含油脂試樣(火鍋底料)和不含油脂試樣(肉昧鮮)中添加0.2mg/kg的ADP標(biāo)準(zhǔn)溶液，含油脂試樣以正己烷為萃取溶劑，不含油脂試樣以甲醇為萃取溶劑，研究超聲萃取5min、10min、15min、20min.30min后的回收率，結(jié)果見圖3。

從圖3可以看出，隨著超聲萃取時間的增加，回收率結(jié)果呈遞增趨勢，但超聲萃取時間超過15min后回收率沒有明顯的變化，考慮時間成本、檢測效率因素，本方法選擇超聲萃取時間為15min。

3、色譜柱的選擇

考察了ADP在HP-5ms、DB-35ms和TG-WaxMS等3種不同極性的色譜柱上的保留情況。結(jié)果表明：ADP在HP-5ms和DB-35ms色譜柱上保留較弱且峰形拖尾，而在TG-WAXMS色譜柱上保留較好，且峰形高斯對稱。說明該物質(zhì)適合以聚乙二醇為固定相的極性色譜柱或同類型柱進(jìn)行分析。

4、進(jìn)樣口溫度的選擇

實驗發(fā)現(xiàn)，進(jìn)樣口溫度的設(shè)定對3-乙?；?2，5-二甲基噻吩的峰形和檢測靈敏度有顯著影響。進(jìn)樣口溫度過低，待測物不能夠有效的汽化，容易導(dǎo)致待測物被吸附在進(jìn)樣口；而進(jìn)樣口溫度過高，容易導(dǎo)致3-乙酰基-2，5-二甲基噻吩發(fā)生高溫分解。升高進(jìn)樣口溫度有助于提高靈敏度，在合理的范圍內(nèi)(T為200℃～300℃)選擇的汽化溫度越高，高沸點物質(zhì)的揮發(fā)程度越大，會進(jìn)入色譜柱造成污染，而且進(jìn)樣口溫度過高對色譜柱有一定損害，因此在能滿足汽化需要的前提下，盡量選擇較低溫度，使高沸點物質(zhì)盡可能的保留在進(jìn)樣口玻璃襯管中，本實驗最終選擇240℃為最佳進(jìn)樣口溫度。

5、方法學(xué)考察

（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線

本研究采用外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線，對方法的線性范圍進(jìn)行測定。采用正己烷配制濃度為0.005μg/mL、0.01μg/mL、0.02μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL的3-乙酰基-2，5-二甲基噻吩標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照方法的分析條件，進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜分析。以3-乙?；?2，5-二甲基噻吩的濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖4)。結(jié)果表明，在0.005ug/mL～1μg/mL范圍內(nèi)3-乙?；?2，5-二甲基噻吩線性關(guān)系良好，符合定量要求。其標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程為y=9.39x10⁷x-2.44x10⁵，相關(guān)系數(shù)R2為0.9999。

（2）方法檢出限與定量限

在肉味鮮(固態(tài)調(diào)味料)、火鍋底料的空白樣品中分別添加0.01mg/kg的ADP標(biāo)準(zhǔn)溶液，采用氣相色譜-質(zhì)譜測定，以3倍信噪比計算方法檢出限、以10倍信噪比計算其定量限，得出不同基質(zhì)中的檢出限(LOD)均為0.01mg/kg，定量限(LOQ)均為0.03mg/kg。歐洲食品安全管理局關(guān)于ADP在動物飼料中的限量為0.05mg/kg，該方法滿足實際檢測需求。肉昧鮮空白樣品、加標(biāo)樣品(加標(biāo)量0.01mgkg)及標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.05μg/mL)的典型色譜圖見圖5。

（3）精密度與準(zhǔn)確性

在最佳樣品提取條件和色譜條件下，對肉味鮮(固態(tài)調(diào)味料)、火鍋底料陰性樣品作空白進(jìn)行加標(biāo)回收試驗。稱取空白樣品，分別添加3個水平的ADP標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照所建立的方法的分析條件進(jìn)行測定。每份樣品進(jìn)行6次平行測定，考察方法的回收率和精密度。結(jié)果表明，不同基質(zhì)陰性樣品中ADP的加標(biāo)回收率在86.6%～104.6%之間，滿足國家標(biāo)準(zhǔn)要求。相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在0.9%～1.9%之間，實驗數(shù)據(jù)表明本方法重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高。

6、實際樣品的測定

準(zhǔn)確稱取試樣5.0g（精確至0.01g)于15mL離心管中，準(zhǔn)確加入10mL甲醇，渦旋2min，超聲提取15min，4000r/min離心2min，收集上清液。-20℃冰箱冷凍2h，濾紙過濾后供氣相色譜-質(zhì)譜分析。TG-WaxMS毛細(xì)管柱(30m×0.25mm×250um)，柱溫度程序：50℃保持1min，20℃/min升溫至200℃保持3min，25℃/min升溫至240℃保持7min；進(jìn)樣口溫度：240℃﹔進(jìn)樣模式：不分流；載氣：氦氣，流速：1mL/min。按以上方法對五種食品基質(zhì)（香精、調(diào)味料、火鍋底料、膨化食品、肉制品）總計98批次開展了ADP的檢測，結(jié)果均未檢出ADP，從一定程度上說明該物質(zhì)并未普遍使用于食品中。

三、結(jié)論

針對含油脂食品、不含油脂食品分別建立了有效的前處理方法，利用氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)，建立了一種簡便高效、高選擇性、高靈敏性的檢測食品中3-乙?；?/span>-2，5-二甲基噻吩的方法。

歐洲食品安全管理局關(guān)于動物飼料中3-乙酰基-2，5-二甲基噻吩的限量要求為0.05mg/kg，本方法檢出限為0.01mg/kg，定量限0.03mg/kg，靈敏度高，且該方法操作簡單快速、精密度高、準(zhǔn)確性好，能更準(zhǔn)確、高效地監(jiān)測食品中ADP的使用情況，為食品中ADP的風(fēng)險監(jiān)測和風(fēng)險評估提供了技術(shù)支持，避免食品安全事件的發(fā)生。

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