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超臨界C02法優(yōu)化番茄紅素脂質(zhì)體的配方工藝(二)

發(fā)布時間:2021-04-09 13:49 編輯者:周世紅

(2)單因素試驗結(jié)果分析

①膽固醇與卵磷脂質(zhì)量比對包封率的影響分析

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膽固醇:磷脂(W:W)對脂質(zhì)體包封率的影響如圖2所示,增加膽固醇用量,脂質(zhì)體包封率增加,當(dāng)膽固醇:磷脂(W:W)=9:20時,脂質(zhì)體包封率達到峰值。繼續(xù)增加膽固醇的用量,脂質(zhì)體包封率降低。這是由于膽固醇具有兩親性,增加膽固醇用量,可以在一定程度上提高脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。此外,膽固醇與磷脂具有較好的相容性,可以改善磷脂雙分子層膜的流動性和通透性。以免雙分子層過于緊密,難包埋。此外,膽固醇的嵌入增加了雙分子層的表面積,易于番茄紅素的包埋。但膽固醇用量過高時,雙分子層的剛性增大,表面積變小,不易包埋芯材。

②緩沖溶液pH對包封率的影響分析

pH對脂質(zhì)體的包封率如圖3所示,pH為7.0時,脂質(zhì)體包封率達到峰值,繼續(xù)升高pH,脂質(zhì)體包封率下降。這是因為pH影響脂質(zhì)體表面電荷,電荷的改變會影響脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。脂質(zhì)體雙分子層變得疏松,孔徑變大,使所載藥物溶液滲透出來,從而影響芯材的包埋。

③番茄紅素與卵磷脂質(zhì)量比對包封率的影響分析
 

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番茄紅素:磷脂(W:W)對脂質(zhì)體包封率的影響如圖4所示,脂質(zhì)體包封率隨著番茄紅素:磷脂(W:W)的增大,先增大后減小。番茄紅素:磷脂(W:W)為1:50時,包封率達到峰值。繼續(xù)增加番茄紅素用量,包封率下降。當(dāng)番茄紅素含量較低時,脂質(zhì)體有足夠的空間對其進行包埋。由于脂質(zhì)體的載藥空間有限,當(dāng)番茄紅素增加到一定程度時,脂質(zhì)體囊泡空間飽和,藥物無法再繼續(xù)被包埋,所以包封率下降。

(3)響應(yīng)曲面試驗結(jié)果分析

①響應(yīng)曲面試驗設(shè)計及結(jié)果

根據(jù)單因素實驗結(jié)果,以包封率為指標(biāo)值,按照Box-Benhnken試驗設(shè)計原理進行3因素3水平的響應(yīng)面優(yōu)化試驗,試驗設(shè)計及結(jié)果如表2所示。


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②方程建立及方差分析

對試驗數(shù)據(jù)進行擬合,得到包封率(Y)對膽固醇:卵磷脂(W:W)(A),緩沖溶液pH(B)番茄紅素:卵磷脂(W:W)(C)的二次多元回歸方程為

Y=81.02+13.73A+6.04B+02.93C-10.83AB-5.83AC-6.53BC-11.17A2-9.02B2-18.17C2

模型方差分析如表3所示,P<0.0001<0.01,說明模型極顯著,失擬項不顯著,說明模型擬合程度高。模型各系數(shù)顯著性檢驗如下:A<0.0001<0.05,B=0.0009<0.05,C<0.0393<0.05,說明膽固醇與磷脂質(zhì)量比、緩沖溶液pH、番茄紅素與卵磷脂質(zhì)量比對包封率影響均顯著。

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③交互作用分析

響應(yīng)曲面交互作用如圖5至圖7所示。

LY:PC(W:W)和緩沖溶液pH,CH:PC(W:W)和LY:PC(W:W),CH:PC(W:W)和緩沖溶液pH對包封率的3D圖均呈拋物線狀,等高線圖呈橢圓狀。即LY:PC(W:W)和緩沖溶液pH,CH:PC(W:W)和LY:PC(W:W),CH:PC(W:W)和緩沖溶液pH的交互作用對包封率都有顯著影響。LY:PC(W:W)和緩沖溶液pH交互作用的3D圖較陡,且等高線密集。說明LY:PC(W:W)和緩沖溶液pH交互作用對包封率的影響更顯著,即LY:PC(W:W)和pH對包封率影響更明顯。


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(4)驗證試驗結(jié)果分析

模型預(yù)測的最優(yōu)的實驗條件為膽固醇與卵磷脂質(zhì)量比為9:20,pH為6.99,番茄紅素與卵磷脂質(zhì)量比為1:50。為了實際試驗條件更易于控制,選擇膽固醇與卵磷脂質(zhì)量比為9:20,pH為7,番茄紅素與卵磷脂質(zhì)量比為0.02:1。進行三次平行試驗,得平均包封率為83.43%±1.15%。采用SPSSl7.0進行單樣本t檢驗,t=-2.720,P(雙側(cè))=0.113>0.05,說明與預(yù)測值85.24%相比無顯著性差異。表明模型擬合程度高,驗證了模型的可靠性。

與目前工業(yè)上使用較多的薄膜超聲法、高壓均質(zhì)法、乙醇注入法等方法相比,超臨界CO2法制備番茄紅素脂質(zhì)體減少了有機溶劑的加入,操作條件溫和,且操作簡單易行。因此制得脂質(zhì)體含有較少的對人體有害的物質(zhì),制備出的脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定。整個過程無污染物排放,更符合現(xiàn)代化工業(yè)生產(chǎn)的要求。番茄紅素脂質(zhì)體能在很大程度上改善番茄紅素溶解度低,穩(wěn)定性差的弊端。對超臨界法制備番茄紅素脂質(zhì)體的配方組成進行優(yōu)化,能提高番茄紅素脂質(zhì)體包封率及穩(wěn)定性,為制備更符合工業(yè)化生產(chǎn)及人體健康,有助于人體消化吸收的脂質(zhì)體供了新的解決方法。

此外還為番茄紅素應(yīng)用開發(fā)提供了理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。助于人體消化吸收的脂質(zhì)體供了新的解決方法。此外還為番茄紅素應(yīng)用開發(fā)提供了理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。

三、結(jié)論

試驗以番茄紅素脂質(zhì)體包封率為指標(biāo),采用超臨界CO2法進行番茄紅素脂質(zhì)體的制備。根據(jù)單因素試驗及響應(yīng)曲面設(shè)計的結(jié)果,對超臨界法制備番茄紅素脂質(zhì)體的配方組成進行優(yōu)化。結(jié)果表明,番茄紅素脂質(zhì)體的最佳配方組成參數(shù)為:膽固醇與磷脂質(zhì)量比為9:20,磷酸鹽緩沖pH為7.0,番茄紅素與磷脂質(zhì)量比為1:50,此條件下得到番茄紅素脂質(zhì)體的包封率為:83.4%±1.15%。

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