2 結(jié)果與分析

2.1 磷酸甜菜堿對(duì)賴氨酸三級(jí)種子活力的影響

通過(guò)在賴氨酸三級(jí)種子配方中添加不同質(zhì)量濃度的磷酸甜菜堿，培養(yǎng)周期均為12 h， 培養(yǎng)過(guò)程中每2 h檢測(cè)1次OD值，記錄得到表1實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，根據(jù)表1數(shù)據(jù)繪制圖1曲線。成熟周期指種子OD值達(dá)到成熟OD值時(shí)的種子培養(yǎng)周期，可通過(guò)繪制種子OD生長(zhǎng)曲線看出，曲線斜率最大(即菌體分裂速率最快)的周期確定為成熟OD值。

通過(guò)SAS軟件對(duì)表1中2～5批次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)作隨機(jī)區(qū)組方差分析，結(jié)果如下：

1) 本例模型(OD_ij=U+X_i+Y_j，X為添加量，Y為培養(yǎng)周期)的F=329.7，p=0.000 1<0.05，說(shuō)明模型有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2) 磷酸甜菜堿添加量的F=10.62，p=0.000 1<0.05，說(shuō)明各區(qū)組均數(shù)之間有顯著差異，即不同磷酸甜菜堿添加量對(duì)三級(jí)種子OD值影響顯著。

3) 不同培養(yǎng)周期的F=584.97，p=0.000 1<0.05，說(shuō)明各處理組均數(shù)之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即三級(jí)種子隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)OD不斷增高。

從表1中可以看出：磷酸甜菜堿添加量0.3 g/L和0.5 g/L時(shí)對(duì)三級(jí)種子OD值影響最顯著，當(dāng)磷酸甜菜堿添加量提高至0.7 g/L和0.9 g/L時(shí)對(duì)三級(jí)種子OD值影響顯著性降低。

綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)分析得出結(jié)論：三級(jí)種子配方中添加量0.5 g/L磷酸甜菜堿可替代0.5 g/L的氯化膽堿，而且磷酸甜菜堿能顯著提高種子活力，縮短成熟周期1.5 h。

通過(guò)配對(duì)T檢驗(yàn)考查添加量0.3 g/L磷酸甜菜堿與添加量0.5 g/L氯化膽堿對(duì)三級(jí)種子OD值是否有顯著差異，分析結(jié)果如表2所示，其中p=0.692>0.05表示2組數(shù)據(jù)無(wú)顯著差異，即可用磷酸甜菜堿替代原配方中的氯化膽堿。

2.2 磷酸甜菜堿對(duì)賴氨酸發(fā)酵的影響

發(fā)酵罐配方中添加磷酸甜菜堿，質(zhì)量濃度分別為0，0.3，0.5，0.7，0.9 g/L，每個(gè)質(zhì)量濃度實(shí)驗(yàn)3批次，每2 h檢測(cè)1次OD值，并繪制各質(zhì)量濃度條件下發(fā)酵罐OD曲線如圖2所示，同時(shí)得出發(fā)酵罐配方中添加不同質(zhì)量濃度磷酸甜菜堿對(duì)發(fā)酵指標(biāo)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。通過(guò)SPSS軟件分析表3實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，得出結(jié)果見(jiàn)表4。通過(guò)在賴氨酸發(fā)酵底料中添加一定量的磷酸甜菜堿，發(fā)酵OD峰值、放罐產(chǎn)酸和轉(zhuǎn)化率(p=0<0.01)均顯著提高，其中OD峰值、放罐酸與磷酸甜菜堿添加量成正相關(guān)，而且當(dāng)添加量由0.5 g/L提高到0.9 g/L時(shí)，發(fā)酵罐穩(wěn)定期顯著延長(zhǎng)(圖2)。隨著發(fā)酵OD值增高，發(fā)酵轉(zhuǎn)化率表現(xiàn)略微下降趨勢(shì)。總體看賴氨酸發(fā)酵底料中添加磷酸甜菜堿的質(zhì)量濃度為0.5 g/L時(shí)轉(zhuǎn)化率最高71.18%，發(fā)酵液中L-賴氨酸質(zhì)量濃度263 g/L。

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