北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
從圖3中可以看出,當(dāng)料液比為1∶10時(shí),會(huì)理石榴皮中黃酮類化合物的提取率非常低,其原因可能是提取液與石榴皮粉接觸不充分,導(dǎo)致比色管壁上粘連著很多石榴皮粉無(wú)法與乙醇溶液接觸,無(wú)法受到“空化”效應(yīng)造成的撞擊作用,石榴皮細(xì)胞中的黃酮類化合物未被溶出。將料液比提高到1∶20后,乙醇溶液與石榴皮粉的接觸相比料液比為1∶10時(shí)充分許多,所以提取率迅速上升。當(dāng)料液比達(dá)到1∶50時(shí),提取率達(dá)到最大值為4.51%,可能是因?yàn)楫?dāng)料液比達(dá)到1∶50時(shí),石榴皮粉中的黃酮類化合物已經(jīng)可以在乙醇溶液中充分地被溶解出來(lái)。因此,可以得出,在此試驗(yàn)條件下,考慮到生產(chǎn)成本,可確定對(duì)黃酮類化合物提取的最佳的料液比為1∶50。
從圖4中可以看出,當(dāng)超聲時(shí)間少于75min時(shí),隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng),會(huì)理石榴皮中黃酮類化合物的提取率也在逐漸增高。當(dāng)超聲時(shí)間達(dá)到75min時(shí),提取率達(dá)到最大值為4.72%,且隨著時(shí)間的增加,提取率無(wú)提升,可能是因?yàn)楫?dāng)時(shí)間達(dá)到75min時(shí)黃酮類化合物已經(jīng)充分溶解在乙醇中,隨著時(shí)間的增加,并沒(méi)有溶解出更多的黃酮。而當(dāng)超聲時(shí)間較短時(shí),會(huì)理石榴皮中的黃酮類化合物的提取率也相應(yīng)較低,其原因可能是時(shí)間過(guò)短,“空化”效應(yīng)產(chǎn)生的對(duì)石榴皮細(xì)胞壁的撞擊作用還未完全將石榴皮細(xì)胞擊碎,石榴皮細(xì)胞中的黃酮類化合物還未充分溶解到乙醇溶液中。因此,在此種試驗(yàn)條件下,考慮到生產(chǎn)周期與成本,可以確定超聲時(shí)間75min為最佳。
從圖5中可以看出,從40℃升高到80℃的過(guò)程中,黃酮類化合物的提取率一直在增加,原因可能是因?yàn)樵谝欢囟确秶鷥?nèi),黃酮類化合物在乙醇中的溶解度隨著溫度的升高而增加,同時(shí),提取溶劑的擴(kuò)散系數(shù)也增大,促使提取速度加快,提取時(shí)間相同,提取溫度較高的樣品能溶解出更多的黃酮類化合物。但是當(dāng)溫度大于80℃之后,提取率逐漸下降,尤其當(dāng)溫度超過(guò)90℃后,提取率急劇下降,其原因一方面可能是因?yàn)樘崛囟瘸^(guò)蘆?。S酮醇類)的耐受溫度而造成蘆丁損失,使提取液中黃酮類化合物的含量降低;另一方面可能是因?yàn)闇囟冗^(guò)高造成乙醇溶液的蒸發(fā)流失,料液比相應(yīng)減小。因此可確定在此試驗(yàn)條件下,對(duì)會(huì)理石榴皮中黃酮類化合物的提取的最佳提取溫度為80℃。
從圖6可以看出,隨超聲功率的提高,石榴皮中黃酮類化合物的提取率在逐漸增加。超聲波的“空穴效應(yīng)”加強(qiáng)了植物細(xì)胞胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散及溶解,從而提高了提取物的含量。當(dāng)超聲功率達(dá)到300w時(shí),提取率達(dá)到最高4.85%。繼續(xù)提高超聲功率,總黃酮類化合物的提取率變化不大,當(dāng)超聲功率達(dá)到450w時(shí),總黃酮的提取率反而呈現(xiàn)下降的趨勢(shì),可能是因?yàn)楦邚?qiáng)度的超聲波效應(yīng),對(duì)黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了破壞。因此,綜合經(jīng)濟(jì)原因考慮,選擇超聲波功率為300w。
為確定超聲波輔助提取石榴皮總黃酮的最佳工藝條件,在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選擇對(duì)提取率影響較大的因素,乙醇濃度、料液比、超聲時(shí)間及超聲溫度進(jìn)行四因素三水平(L9(34))正交試驗(yàn)優(yōu)化,其結(jié)果見(jiàn)表1、表2和表3。
從表3可以看出,即4種考察的因素對(duì)會(huì)理石榴皮中黃酮類的提取率均有顯著影響,且影響的大小順序?yàn)锳>B>C>D,即乙醇濃度>料液比>超聲時(shí)間>超聲溫度。此試驗(yàn)條件下的最優(yōu)提取工藝組合為A2B2C3D1,即乙醇濃度70%、料液比1∶50、超聲時(shí)間90min、超聲溫度70℃,會(huì)理石榴皮總黃酮的提取率可達(dá)到6.82%。
超聲波輔助提取法提取會(huì)理石榴皮中黃酮類化合物的提取過(guò)程中,提取試驗(yàn)中所用的乙醇溶液的濃度大小對(duì)會(huì)理石榴皮中黃酮類化合物的提取率影響最大,四個(gè)因素中影響力度最小的是超聲溫度。因此,綜合生產(chǎn)經(jīng)費(fèi)成本和時(shí)間成本等考慮,本次試驗(yàn)最終得出的最佳工藝條件為:乙醇濃度70%、料液比1∶50、超聲時(shí)間90min、超聲溫度70℃、超聲功率300w,石榴皮總黃酮的提取率可達(dá)到6.82%。乙醇濃度高低對(duì)提取效果的影響較大,在生產(chǎn)中應(yīng)注意控制。
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