芭蕉根為芭蕉科植物芭蕉Musa basjoo Sied.et Zucc.的干燥根莖，是貴州苗族地區(qū)習(xí)用苗藥，收載于2003年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》，具有清熱解毒、止渴利尿的功效?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，芭蕉根具有抑制α-葡萄糖苷酶、抗炎鎮(zhèn)痛等藥理活性。芭蕉根中含有多糖類(lèi)、皂苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、香豆素類(lèi)、蒽醌類(lèi)、酚類(lèi)、強(qiáng)心苷等化學(xué)成。

其中，五環(huán)三萜類(lèi)成分羽扇豆酮具有降血糖、抗炎以及改善2型糖尿病大鼠胰島素抵抗的作用；甾體類(lèi)成分豆甾醇具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、降低膽固醇等藥理作用。芭蕉根中的活性成分羽扇豆酮和豆甾醇主要是由其根莖部位分離提取而得，但芭蕉根莖被采挖后，植株便不可再生，而其地上部位的莖和葉多被丟棄，不僅污染環(huán)境，還造成了資源浪費(fèi)。因此，探究芭蕉莖和葉能否替代根莖作為羽扇豆酮和豆甾醇的原藥材來(lái)源，既有利于保護(hù)藥材資源，又可以減輕環(huán)境污染?；诖耍狙芯坎捎贸咝б合嗌V（UPLC）法檢測(cè)同植株芭蕉根莖、莖和葉中羽扇豆酮和豆甾醇的含量，并進(jìn)行組間比較分析、主成分分析和聚類(lèi)分析，以期為芭蕉的莖、葉能否替代其根莖作為羽扇豆酮和豆甾醇的原藥材來(lái)源提供依據(jù)。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所使用的的主要儀器有：Waters ACQUITY型UPLC儀、光電二極管矩陣（PDA）檢測(cè)器（美國(guó)Waters公司），AL204-IC型分析天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]，DZF-0型真空干燥箱（上海賀德實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司），HH-6型數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州澳華儀器有限公司），HS-10260T型超聲波清洗儀（天津市恒奧科技發(fā)展有限公司）。

1.2 主要試劑

本研究所使用的主要試劑有：羽扇豆酮對(duì)照品（貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥物分析實(shí)驗(yàn)室自制，純度≥98%），豆甾醇對(duì)照品（成都瑞芬思生物科技有限公司，批號(hào)D-042-161216，純度≥98%），甲醇、乙腈（德國(guó)Merck公司，均為色譜純）；水為屈臣氏蒸餾水，其余試劑均為分析純。

1.3 藥材

本課題組在貴州、福建兩地采挖了9批芭蕉藥材，經(jīng)貴州民族大學(xué)民族醫(yī)藥學(xué)院王祥培教授鑒定均為芭蕉科植物芭蕉M.basjoo Sied.et Zucc.。分別取其根莖、莖和葉，切碎、曬干、打粉、過(guò)四號(hào)篩、密封，得27份樣本（編號(hào)及來(lái)源見(jiàn)表1，表中(1)(2)表示同一來(lái)源不同批次藥材）；將樣本置于陰涼干燥處保存，備用。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱為Zorbax Rrhd Eclipse Plus C18(100 mm×2.1mm,1.8μm），流動(dòng)相為乙腈-甲醇（78.5∶21.5,V/V），檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm，流速為0.15 m L/min，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為1μL。

2.2 溶液的制備

2.2.1 供試品溶液

取芭蕉的根莖、莖和葉粉末各約1.0 g，精密稱(chēng)定，分別置于錐形瓶中，加入50 m L甲醇，超聲（功率260 W，頻率40 k Hz）提取2次，每次30 min；用濾紙濾過(guò)，合并2次濾液，置于蒸發(fā)皿中，水浴加熱揮干后，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至10 m L量瓶中，加入甲醇定容，搖勻，經(jīng)0.22μm微孔濾膜濾過(guò)，備用。

2.2.2 混合對(duì)照品溶液

取羽扇豆酮和豆甾醇對(duì)照品各適量，精密稱(chēng)定，置于10 m L量瓶中，加入甲醇定容，搖勻，配制成質(zhì)量濃度分別為598、461µg/m L的混合對(duì)照品母液；取混合對(duì)照品母液適量，加入甲醇稀釋?zhuān)渲瞥擅? m L含羽扇豆酮119.6µg、豆甾醇92.2µg的混合對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取上述混合對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液（即甲醇）各適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，詳見(jiàn)圖1。由圖1可知，芭蕉根莖、莖、葉中羽扇豆酮和谷甾醇與各自相鄰色譜峰的分離度均大于1.5，理論板數(shù)均大于6 000，且陰性對(duì)照無(wú)干擾。

2.3.2 線性關(guān)系考察

精密吸取“2.2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品母液適量，以甲醇稀釋并制成羽扇豆酮質(zhì)量濃度分別為11.16、22.32、38.72、89.26、178.50、357.10µg/m L和豆甾醇質(zhì)量濃度分別為8.83、13.64、27.28、54.56、109.20、160.40µg/m L的系列混合對(duì)照品溶液，再按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。以峰面積（y）為縱坐標(biāo)、對(duì)照品質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見(jiàn)表2。

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