（2）PEG的質(zhì)量分數(shù)對選擇性系數(shù)k的影響

在50mL離心管中加入5.4g硫酸銨（硫酸銨的質(zhì)量分數(shù)為18%），4.2g色素粗提液，分別加入9.0g、10.5g、12.0g、13.5g、15.0gPEG原液，調(diào)節(jié)體系pH為5，雙水相萃取后的選擇性系數(shù)和花青素與糖類雜質(zhì)的分配系數(shù)結(jié)果如圖2所示。
 

由圖2可知，隨著PEG質(zhì)量分數(shù)的增加，花青素與糖類雜質(zhì)的分配系數(shù)都呈下降的趨勢，花青素的降低幅度更大一些，選擇性系數(shù)k存在先下降后上升再下降的趨勢，在PEG質(zhì)量分數(shù)為16%達到最高。

（3）pH對選擇性系數(shù)k的影響

在50mL離心管中加入5.4g硫酸銨，12.0gPEG6000原液（PEG質(zhì)量分數(shù)為16%），4.2g色素粗提液，分別調(diào)節(jié)體系pH為1、2、3、4、5，雙水相萃取結(jié)果如圖3所示。
 

如圖3可知，隨著pH的增大，選擇性系數(shù)先升高后降低，在pH為3時達到最高，原因可能是因為紫甘藍色素屬于矢車菊類色素，在pH為3時色素大多呈分子狀態(tài)存在，更易被萃取到上相中，因此使得測得的K花最大。

（4）料液加入量對選擇性系數(shù)k的影響

在50mL離心管中加入5.4g硫酸銨，12.0gPEG6000原液（PEG質(zhì)量分數(shù)為16%），調(diào)節(jié)體系pH為3，分別加入1.8g、2.4g、3.0g、3.6g、4.2g色素粗提液，雙水相萃取結(jié)果如圖4所示。

如圖4可知，隨著料液加入量的增多，選擇性系數(shù)呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢，在料液加入量為12%時，選擇性系數(shù)達到最高。當(dāng)料液加入量超過12%時，下相當(dāng)中花青素的含量開始上升，導(dǎo)致K_花開始下降，選擇性系數(shù)k開始呈現(xiàn)下降趨勢。

2、正交實驗結(jié)果及分析

從上表可以看出，硫酸銨的添加量依然是越多，選擇性系數(shù)越高，但實驗過程不宜再增加了，原因是一方面過高的硫酸銨濃度容易在下相析出結(jié)晶，另一方面增加了生產(chǎn)成本和在上相色素中的殘留量，因此確定為20%。四個因素的影響次序為：粗提液的用量＞pH＞硫酸銨的用量＞PEG的用量，綜合單一因素實驗，最佳實驗條件：粗提液的質(zhì)量分數(shù)為12%，硫酸銨質(zhì)量分數(shù)為20%，pH為3.5，PEG的質(zhì)質(zhì)量分數(shù)為15%，花青素的選擇性系數(shù)為750.26。

三、結(jié)論

采用PEG／硫酸銨雙水相體系萃取純化紫甘藍中花青素。正交實驗最佳的萃取條件為：粗提液的質(zhì)量分數(shù)為12%，硫酸銨質(zhì)量分數(shù)為20%，pH為3.5，PEG的質(zhì)量分數(shù)為15%，花青素的選擇性系數(shù)為750.26。雖然使用PEG6000／硫酸銨雙水相體系對紫甘藍色素有很好的選擇性，能夠?qū)崿F(xiàn)紫甘藍色素與其糖類物質(zhì)的分離，并且花青素的分配系數(shù)K_花對選擇性系數(shù)的影響程度遠大于多糖的分配系數(shù)K_糖，但后續(xù)如何實現(xiàn)聚合物和花青素的分離仍是企業(yè)生產(chǎn)所面臨的難題。

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