茶多酚是茶葉中黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等多酚類化合物的總稱。純品為無色無毒無定形粉末，常溫下呈淺綠色或者淺黃色。科學(xué)研究表明：茶多酚具有抗氧化、抗衰老、清除自由基、抗菌、抗癌、降低血脂等多種生理功能和藥理功效，在食品、醫(yī)藥、保健、化工等諸多領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景，因此從茶葉中提取及純化茶多酚日益受到廣大學(xué)者的關(guān)注。

目前純化茶多酚的方法主要有溶劑萃取法、離子沉淀法、超臨界流體萃取法、樹脂法等。其中有機溶劑萃取法工藝簡單，但產(chǎn)品精制過程會使用大量的有機溶劑，環(huán)境污染大，不符合綠色化學(xué)發(fā)展理念；超臨界流體萃取法提取效率低、設(shè)備要求高、生產(chǎn)成本高，很難大規(guī)模投入工業(yè)化生產(chǎn)；離子沉淀法是利用金屬離子與茶多酚反應(yīng)生成沉淀而脫離溶液體系從而得到純化，該法所制得產(chǎn)品由于受到重金屬離子的污染，制得產(chǎn)品很難被食品、醫(yī)藥、保健等領(lǐng)域所接受。樹脂分離法是一種新興的純化茶多酚的方法，該法是利用樹脂對茶多酚的選擇吸附及解吸而實現(xiàn)產(chǎn)品分離的過程，具有效率高、綠色環(huán)保的工藝特點，而且樹脂再生能力強，可反復(fù)利用，節(jié)約原料。高彥華等研究了H1020樹脂對茶多酚的純化，發(fā)現(xiàn)該樹脂對茶多酚的吸附率達(dá)到80.33％，洗脫率達(dá)到83.5％。經(jīng)過干燥得到茶多酚產(chǎn)品的純度為98％以上。連志慶探究了NKA-Ⅱ、LX-68M和LX-17三種樹脂對茶多酚的吸附及解吸性能，成功地制備了茶多酚含量91.35％，EGCG含量48.23％的茶多酚產(chǎn)品；由于樹脂種類繁多，對茶多酚選擇性吸附的樹脂的篩選工作將具有重要意義。本研究以粗老綠茶為原料，對XDA-5大孔樹脂分離茶葉中茶多酚工藝進(jìn)行了探究，通過探究上樣量，吸附流速，上樣溫度，解吸劑用量及洗脫流速對茶葉中茶多酚分離效果的影響，從而優(yōu)化茶多酚純化工藝，為茶葉及其它天然產(chǎn)物中茶多酚的純化工藝線路的選擇提供理論依據(jù)。

一、材料與方法

1、主要儀器以及試劑

（1）儀器

KQ-500DE數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲波儀器有限公司)、101型電熱鼓風(fēng)干燥箱(北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司)、LX-07A萬能高速粉碎機(紅光工貿(mào)有限公司)、EL204-IC電子分析天平(杭州匯爾儀器設(shè)備有限公司)、800型離心機(上海手術(shù)器械廠)、T6新世紀(jì)可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司)、SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水真空泵(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司)、RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)、FD-1-50冷凍干燥機(北京博醫(yī)康實驗儀器有限公司)。

（2）試劑

乙醇(A.R)；無水碳酸鈉(A.R)；氫氧化鈉(A.R)、沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品(HPLC≥98％，生產(chǎn)批號：Y19M8C36143，上海源葉生物科技有限公司)；茶多酚標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥99％，生產(chǎn)批號：Y1J6B1，上海源葉生物科技有限公司)；福林酚(B.R，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；實驗用水均為二次蒸餾水，所用試劑未加特殊說明均為分析純。實驗用XDA-5六種大孔樹脂均購于安徽皖樹化工銷售有限公司，茶葉材料于2017年秋季采摘于河南光山?jīng)鐾まr(nóng)家茶園，晾干后粉碎備用。

2、茶多酚的提取

在分析天平上稱取茶葉末25g(精確到0.001g)置于燒杯中，加入250mL40℃預(yù)熱的蒸餾水，攪拌、搖勻。將燒杯放入數(shù)控超聲清洗器中按照設(shè)定工藝條件提取(溫度：40℃，時間：50min，功率：250W)。提取后抽濾，濾液轉(zhuǎn)移到500mL容量瓶中。茶葉殘渣用40℃，100mL蒸餾水超聲提取5min，過濾，合并濾液，待容量瓶內(nèi)溶液冷卻后，加蒸餾水至刻度，震蕩，搖勻，得茶多酚提取液。

3、沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)液的配制

在電子分析天平上稱取0.0145g沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品于燒杯中，溶解，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，加入蒸餾水稀釋至刻度。震蕩搖勻后得沒食子酸儲備液，此時沒食子酸儲備液的濃度為290μg·mL^-1。分別移取沒食子酸儲備液0mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL于25mL容量瓶中，搖勻，加蒸餾水稀釋至刻度，得到沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，其濃度依次為0μg·mL^-1、11.60μg·mL^-1、23.20μg·mL^-1、34.80μg·mL^-1、46.40μg·mL^-1、58.00μg·mL^-1。

4、茶多酚含量的測定

茶多酚含量的測定參照國標(biāo)法GB／T8313—2018茶葉中茶多酚的檢測，具體實驗內(nèi)容如下：移液管分別移取水、沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液、茶多酚待測液1.00mL于試管中，在每個試管中分別加入5.00mLl0％福林酚試劑，震蕩，靜置5min，加入4.00mL7.5％碳酸鈉溶液，搖勻。室溫下反應(yīng)1h左右，在紫外-可見分光光度計下測定其吸光度。

5、靜態(tài)吸附-解吸實驗

稱取已處理過的XDA-5大孔樹脂3g(精到0.0001g，濕重)，倒入50mL燒杯中，加入10mL按在分析天平上稱取茶葉末25g(精確到0.001g)置于燒杯中，加入250mL40℃預(yù)熱的蒸餾水，攪拌、搖勻。將燒杯放入數(shù)控超聲清洗器中按照設(shè)定工藝條件提取(溫度：40℃，時間：50min，功率：250W)。提取后抽濾，濾液轉(zhuǎn)移到500mL容量瓶中。茶葉殘渣用40℃，100mL蒸餾水超聲提取5min，過濾，合并濾液，待容量瓶內(nèi)溶液冷卻后，加蒸餾水至刻度，震蕩，搖勻，得茶多酚提取液的茶樣提取液，保鮮膜密封，室溫下靜置24h，次日抽濾，濾液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，加蒸餾水定容，得吸附后待測液；將抽濾后的樹脂置于100mL燒杯中，加入70％乙醇50mL解吸，磁力攪拌器攪拌2h，抽濾，取lmL解吸液轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，加蒸餾水定容，得解吸后待測液。

6、動態(tài)吸附-解吸實驗

稱取濕重為5g(精確到0.0001g)的XDA-5樹脂，以10mL茶多酚提取液上柱，以1mL／min的流速過柱，收集流出液，定容至100mL容量瓶中，得吸附后待測液；將吸附茶多酚的樹脂柱加30mL70％的乙醇進(jìn)行解吸，以1mL／min的流速過柱，收集解吸液，定容至250mL容量瓶中，得解吸后待測液。

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