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轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶催化的糖基化修飾對黑豆蛋白抗氧化活性的影響(二)

發(fā)布時(shí)間:2021-02-26 19:42 編輯者:周世紅

二、結(jié)果與討論

1、不同制備的黑豆分離蛋白清除DPPH自由基能力

分別用PBS緩沖液配置濃度為:1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL的黑豆分離蛋白溶液、自交聯(lián)黑豆蛋白溶液、濕熱法糖基化黑豆蛋白溶液、酶法糖基化黑豆蛋溶液以及對照物Trolox溶液;以DPPH的清除率為評價(jià)指標(biāo),對五種樣品溶液清除DPPH自由基能力進(jìn)行比較,結(jié)果見表1。


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由圖l可見:濃度為lmg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxDPPH自由基清除率均高于自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白,自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白隨濃度的增高DPPH自由基清除率無顯著性變化,濃度為lmg/mL~4mg/mL,酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxDPPH自由基清除率隨濃度的增高而增大,濃度為5mg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxDPPH自由基清除率無顯著性差異,由表l可知,當(dāng)濃度為6mg/mL時(shí),酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxABTS+清除率達(dá)到最大,Trolox為90.67%,酶法糖基化黑豆蛋白為81.76%,濕熱法糖基化黑豆蛋白為75.37%;當(dāng)濃度為5mg/mL時(shí)自交聯(lián)黑豆蛋白ABTS+清除率達(dá)到最大為9.35%,當(dāng)濃度為4mg/mL時(shí)黑豆蛋白ABTS+清除率達(dá)到最大為7.73%;五種樣品清除DPP腎自由基能力大小為Trolox>酶法糖基化黑豆蛋白>濕熱法糖基化黑豆蛋白>自交聯(lián)黑豆蛋白>黑豆分離蛋白。

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2、不同制備的黑豆分離蛋白清除ABTS+自由基能力

分別用PBS緩沖液配置濃度為:lmg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL的黑豆分離蛋白溶液、自交聯(lián)黑豆蛋白溶液、濕熱法糖基化黑豆蛋白溶液、酶法糖基化黑豆蛋溶液以及對照物Trolox溶液;以ABTS+的清除率為評價(jià)指標(biāo),對五種樣品溶液清除ABTS+自由基能力進(jìn)行比較,結(jié)果見表2。

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由圖2可見:濃度為lmg/mLL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxABTS+自由基清除率均高于自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白,自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白隨濃度的增高ABTS+自由基清除率無顯著性變化,濃度為1mg/mL~4mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白ABTS+自由基清除率隨濃度的增高而增大,濃度為5mg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白ABTS+自由基清除率無顯著性差異,濃度為lmg/mL~6mg/mL濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxABTS+自由基清除率隨濃度的增高而增大;從表2可知,當(dāng)濃度為6mg/mL時(shí),酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白、Trolox、自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白ABTS+清除率均達(dá)到最大,Trolox為76.08%,酶法糖基化黑豆蛋白為60.24%,濕熱法糖基化黑豆蛋白為49.28%,自交聯(lián)黑豆蛋白為4.33%,黑豆蛋白為4.79%;五種樣品清除DPPH+自由基能力大小為Trolox>酶法糖基化黑豆蛋白>濕熱法糖基化黑豆蛋白>自交聯(lián)黑豆蛋白>黑豆分離蛋白。

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3、總還原能力

分別用PBS緩沖液配置濃度為:lmg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL的黑豆分離蛋白溶液、自交聯(lián)黑豆蛋白溶液、濕熱法糖基化黑豆蛋白溶液、酶法糖基化黑豆蛋溶液以及對照物Trmox溶液;以吸光度為評價(jià)指標(biāo),對五種樣品溶總還原能力進(jìn)行比較,結(jié)果見表3。


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由圖3可見:濃度為lmg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及Trolox總還原能力均高于自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白;自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白隨濃度的增高總還原能力無顯著性變化,濃度為lmg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及Trolox總還原能力隨濃度的增高而增大,從表3可知,當(dāng)濃度為6mg/mL時(shí),酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白、Trolox以及自交聯(lián)黑豆蛋白吸光值達(dá)到最大,總還原能力達(dá)到最強(qiáng),Trolox為0.6169,酶法糖基化黑豆蛋白為0.4914,濕熱法糖基化黑豆蛋為0.2569,自交聯(lián)黑豆蛋白為0.0573。當(dāng)濃度為2mg/mL時(shí),黑豆分離蛋白吸光值達(dá)到最大,總還原能力達(dá)到最強(qiáng)為0.0581,五種樣品總還原能力大小為Trolox>酶法糖基化黑豆蛋白>濕熱法糖基化黑豆蛋白>黑豆分離蛋白>自交聯(lián)黑豆蛋白。

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