（5）料液比對(duì)樺剝管菌多糖得率的影響

從圖7可以看出，料液比在1:10時(shí)多糖得率最低，可能是因?yàn)橐后w過(guò)少，料液黏稠不利于超聲波空化效應(yīng)的產(chǎn)生，也不利于多糖從樣品中的流出，導(dǎo)致多糖得率很低。多糖在料液比大于1:30時(shí)下降可能是由于液體過(guò)多，稀釋了超聲波對(duì)樺剝管菌粉末的作用，從而導(dǎo)致多糖得率下降。因此選擇料液比1:20、1:30、1:40進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)分析。

3、響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化提取參數(shù)

（1）響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果及方差分析

采用Design-Expert.V8.0.6軟件，對(duì)樺剝管菌多糖得率的響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)條件設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表4。
 

根據(jù)各因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響進(jìn)行二次回歸模型的擬合，擬合后得到下式：

Y=9.37+1.04A-0.33B+0.10C+0.27AB+0.26AC+0.16BC-0.79A^2-1.14B²+0.22C²其中，Y表示樺剝管菌多糖得率，A、B、C分別是水浴溫度、超聲功率、液料比的編碼。

由方差分析表5的分析結(jié)果可見(jiàn)：P_模擬=0.0018＜0.01，表明該二項(xiàng)模型顯著；P_{失擬項(xiàng)}=0.2422＞0.05，表明這一項(xiàng)不顯著，實(shí)驗(yàn)以外的他因?qū)Ρ緦?shí)驗(yàn)的影響小。R²=0.9385，表明有93.85％的可能性可以由這個(gè)擬合模型來(lái)表示。R²_adj=0.8595，表明只有14.05％的可能性不符合這個(gè)擬合模型。C.V.=4.91％，此值越小，表明實(shí)驗(yàn)值越可靠。因此，所選用的二次回歸模型成立，可用于預(yù)測(cè)不同條件下樺剝管菌多糖的得率。由各因素一次項(xiàng)的F值可知：影響樺剝管菌多糖得率的大小順序：水浴溫度＞超聲功率＞液料比。

（2）響應(yīng)面各因素交互作用分析

從圖8可見(jiàn)，圖8a響應(yīng)面坡度最大(A與B交互)，其次是圖8c(A與c交互)，圖8b(B與C交互)，水浴溫度與超聲功率對(duì)樺剝管菌多糖的提取影響較大。

（3）超聲輔提樺剝管菌多糖最佳工藝參數(shù)確定

由Design—Expert.V8.0.6軟件分析，超聲輔提樺剝管菌多糖的最佳提取條件：水浴溫度69.16℃，超聲功率80.24W，液料比為30:1，回歸方程預(yù)測(cè)值為10.228％。根據(jù)實(shí)際情況，在水浴溫度69℃，超聲功率80W，液料比為30:1(其他條件：水浴時(shí)間1h，超聲溫度70℃，超聲時(shí)間20min)的條件下重復(fù)3次，得到樺剝管菌多糖得率為10.13±0.14，實(shí)際測(cè)定值與理論值相接近，說(shuō)明該擬合模型與實(shí)際情況擬合良好。

4、樺剝管菌多糖體外抗氧化活性研究

（1）羥基自由基清除能力

從圖9可以看出，樺剝管菌多糖對(duì)羥基自由基的清除能力隨著多糖濃度的增加而逐漸增加，呈現(xiàn)較好的量效關(guān)系，濃度在0.125～8mg/mL范圍內(nèi)，樺剝管菌多糖清除羥基自由基的能力從8.26％上升到57.39％，清除能力增加了49.13％。其清除能力低于同等濃度的VC對(duì)羥基自由基的清除能力，樺剝管菌多糖在8mg/mL時(shí)對(duì)羥基自由基的清除率與VC在0.5mg/mL時(shí)的清除率相當(dāng)，即樺剝管菌多糖具有較好的清除羥基自由基的能力。

（2）DPPH自由基清除能力

從圖10可以看出，樺剝管菌多糖對(duì)DPPH自由基的清除能力隨著多糖濃度的增加而逐漸升高，呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系，但其清除能力低于同等濃度的VC對(duì)DPPH自由基的清除能力，濃度在0.125～2mg/mL范圍內(nèi)，樺剝管菌多糖清除羥基自由基的能力從6.32％上升到37.37％，清除能力增加了31.05％。樺剝管菌多糖濃度大于1mg/mL時(shí)對(duì)DPPH自由基的清除率可近達(dá)到VC對(duì)DPPH自由基清除率的50％，即樺剝管菌多糖具有較好的清除DPPH自由基的能力。

三、結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助樺剝管菌多糖提取工藝：水浴時(shí)間lh，水浴溫度69.16℃，超聲溫度70℃，超聲時(shí)間20min，超聲功率80.24W，液料比為30:1，提取3次，利用此工藝多糖得率為10.228％。本文得率雖較少，但降低了生產(chǎn)成本，具有較好的應(yīng)用前景。體外抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：樺剝管菌多糖濃度在8mg/mL時(shí)，清除羥基自由基的能力為57.39％；樺剝管菌多糖濃度在2mg/mL時(shí)，清除DPPH自由基的能力為37.37％，具有較好的抗氧化能力。

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