大腸菌群是用來評價食品衛(wèi)生狀況的指標(biāo)。為了確保檢驗結(jié)果可信，試將測量不確定度的評定結(jié)果引入到生活飲用水中總大腸菌群測定能力驗證考核工作中。

不確定度評定是表示被測量值的分散性與測量結(jié)果相關(guān)性的參數(shù)，是判斷測量結(jié)果質(zhì)量的重要依據(jù)，也是反映檢驗過程中各因素對檢驗結(jié)果不確定度的影響程度，任何檢驗（測）結(jié)果都不可避免因誤差而導(dǎo)致測定值的不確定度，國際標(biāo)準(zhǔn)ISOdEC17025中明確規(guī)定檢測報告必須有檢測結(jié)果不確定度數(shù)據(jù)及說明，尤其檢測結(jié)果處于臨界值時，必須出具包含不確定度的檢測報告。通過對檢測數(shù)據(jù)不確定度評估，可以分析出檢測過程中哪些因素是重點關(guān)注的問題，以便提高檢測能力，保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。
本文分析多管發(fā)酵法測定生活飲用水中總大腸菌群過程中引入不確定度的來源，比較各分量不確定度所占的比例，計算生活飲用水中總大腸菌群測定結(jié)果合成不確定度和擴散不確定度，從而定量描述生活飲用水中總大腸菌群測定結(jié)果的不確定度。為類似大腸菌群測定結(jié)果不確定度的評定提供參考。

一、材料與方法

1、試驗材料

生活飲用水：吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提供，螺旋管裝凍干粉，用加冰袋的密封盒取回實驗室。

2、儀器與試劑

SW-CJ無菌操作臺：中國蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；PRESOCLAVE-Ⅱ高壓滅菌器：西班牙SELECTA；DHP-9162恒溫培養(yǎng)箱：太倉市科教器材廠；ABl35-S電子天平（±0.01g）：瑞士梅特勒-托利多公司。

3、試驗方法

從4⁰C冰箱取出裝有凍干粉的螺旋管，于室溫下放置15min復(fù)溫。無菌操作向螺旋管中加入10mL0.85％無菌生理鹽水溶液進行復(fù)溶，蓋好瓶蓋，室溫下靜置2min。使用均質(zhì)器充分混懸螺旋管中的內(nèi)容物，靜置30s以消除產(chǎn)生的泡沫。把菌液吸入無菌瓶中，再向螺旋管中加入10mL0.85％無菌生理鹽水沖洗螺旋管，把洗液液吸入無菌瓶中；重復(fù)上述沖洗螺旋管過程5次?？傁♂屢?0mL0.85％無菌生理鹽水（復(fù)溶10mL0.85％無菌生理鹽水+總稀釋液50mL0.85％無菌生理鹽水），振蕩混勻，做為原倍（100）樣品。

依據(jù)GB/T5750.12-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法微生物指標(biāo)（多管發(fā)酵法）》進行檢驗。

4、不確定度的主要來源

檢驗結(jié)果不確定度的主要來源見圖1。

二、各不確定度分量的評定

1、樣品制備引入的不確定度評定

能力驗證過程中，樣品制備是決定測定結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵因素。本實驗樣品制備過程中主要由10mL刻度吸管分6次將樣品逐步洗出。JJG196-2006規(guī)定，10mL刻度吸管允許誤差為±0.05mL。均屬于B類評定，按矩形分布計算不確定度。因此，10mL刻度吸管引入的不確定度μ_{（10mL刻度吸管）}為：

2、樣品稀釋引入的不確定度評定

樣品稀釋過程不確定度來源主要是10mL刻度吸管和1mL移液器。JJG196-2006規(guī)定，10mL刻度吸管允許誤差為±0．05mL。JJG646—2006移液器檢定規(guī)程規(guī)定1000μL移液器吸取1mL時允許誤差為±1.0％，均屬于B類評定，按矩形分布計算不確定度。因此，10mL刻度吸管和1nlL移液器引入的不確定度μ_{（10mL刻度吸管）}和μ_{（1mL移液器）}分別為：

10mL刻度吸管和1mL移液器引入的相對不確定度μ_{（10mL刻度吸管）}和μ_{（1mL移液器）}分別為：

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