2.4 方法學(xué)驗(yàn)證

2.4.1 線(xiàn)性方程、線(xiàn)性范圍與檢出限

按1.2儀器工作條件測(cè)定1.3.2配制的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，以各元素的每秒計(jì)數(shù)（CPS）與內(nèi)標(biāo)元素CPS的比值（y）為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度（x，μg/L）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)，線(xiàn)性回歸計(jì)算得7種元素的線(xiàn)性方程。7種元素的線(xiàn)性方程，線(xiàn)性范圍和相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表1。各元素相關(guān)系數(shù)為0.9997～1.0000，說(shuō)明線(xiàn)性關(guān)系良好。

11次測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)空白溶液得到各元素的CPS，計(jì)算11次CPS的標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD），以3SD對(duì)應(yīng)樣品中待測(cè)元素含量為方法的檢出限（LOD），計(jì)算得V、Co、Ni、As、Cd、Pb、Hg方法檢出限分別為0.0010、0.0015、0.0060、0.0054、0.0040、0.0024、0.0052mg/kg。

定量限濃度要滿(mǎn)足準(zhǔn)確度的要求，意味著必須對(duì)定量限濃度進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)驗(yàn)證。定量限濃度設(shè)置為線(xiàn)性最低點(diǎn)，7種元素的定量限均為0.1mg/kg，經(jīng)加標(biāo)回收試驗(yàn)驗(yàn)證，能滿(mǎn)足準(zhǔn)確度的要求。

2.4.2 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

采用加標(biāo)溶液的回收率來(lái)評(píng)價(jià)方法的準(zhǔn)確度。精密稱(chēng)取12份阿莫西林樣品，分為3組，分別作為低、中、高濃度的加標(biāo)樣品，平行樣品數(shù)分別為3、6、3份，加入適量多元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，使其最終溶液中各元素質(zhì)量濃度均分別為0.5、5、50μg/L；另取12份樣品，加入適量Hg標(biāo)準(zhǔn)溶液，使其最終溶液中元素質(zhì)量濃度分別為0.5、2、5μg/L；按實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

由表2可知，在3個(gè)濃度加標(biāo)水平下，7種元素的平均回收率為86.1%～130.9%，均在70%～150%之間，滿(mǎn)足準(zhǔn)確度要求。

2.4.3 重復(fù)性試驗(yàn)

重復(fù)性試驗(yàn)由加標(biāo)回收試驗(yàn)中間濃度的6次平行測(cè)定結(jié)果來(lái)評(píng)估，以各元素實(shí)際測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知，V、Co、Ni、As、Cd、Pb、Hg測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.0%、1.6%、2.0%、2.6%、2.5%、1.5%、4.5%，均小于20%，滿(mǎn)足方法重復(fù)性要求。

2.4.4 中間精密度試驗(yàn)

中間精密度由準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)中所使用的中間濃度加標(biāo)溶液來(lái)評(píng)估，由2名分析人員在不同的時(shí)間各自獨(dú)立測(cè)試6份加標(biāo)樣品，以12份樣品中各元素實(shí)際測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。V、Co、Ni、As、Cd、Pb、Hg測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.2%、1.3%、3.2%、4.6%、5.7%、4.9%、6.3%，均小于25%，滿(mǎn)足中間精密度要求。

2.5 實(shí)際樣品測(cè)定

按上述建立的方法，測(cè)定了3批阿莫西林樣品中的7種元素雜質(zhì)，結(jié)果表明，各批次阿莫西林樣品中7種元素雜質(zhì)的含量均低于定量限，說(shuō)明其安全風(fēng)險(xiǎn)較小。

3 結(jié)論

（1）建立了ICP–MS方法測(cè)定阿莫西林原料藥中V、Co、Ni、As、Cd、Hg和Pb7種雜質(zhì)元素含量的方法。方法學(xué)驗(yàn)證表明該方法準(zhǔn)確度與精密度良好。

（2）采用2%硝酸溶解樣品的樣品前處理方法，與微波消解等消解方法相比，操作簡(jiǎn)便、省時(shí)、快速，能夠節(jié)省試劑使用量、同時(shí)也減少樣品消解過(guò)程帶來(lái)的本底、試劑污染。

（3）該方法可為阿莫西林原料藥中7種雜質(zhì)元素的質(zhì)量控制、原料藥中元素雜質(zhì)分析方法的建立與評(píng)價(jià)提供參考。

（4）樣品處理方法的優(yōu)化過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，溶液中的有機(jī)成分會(huì)增加As元素在等離子體中的電離，導(dǎo)致回收率變大，在原料藥元素雜質(zhì)分析方法開(kāi)發(fā)過(guò)程中應(yīng)該優(yōu)化出合適的取樣量。

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