2.5 肝臟組織切片

肝臟是參與D-半乳糖代謝的主要器官，過量D半乳糖可增加活性氧（ROS）的產(chǎn)生，可能導致器官損傷。從圖4a可以看出NC組小鼠的肝臟細胞結構具有正常的中心靜脈和肝細胞，核大而圓；圖4b顯示DG組肝組織有大量脂肪泡蓄積，肝小葉結構不明顯，說明肝臟出現(xiàn)異常。PC組和太子參醇提物干預各組肝組織情況較DG組好，胞質(zhì)豐富，脂肪蓄積減少，肝小葉結構清晰，肝血竇以中央靜脈為中心呈均勻的散狀分布，肝組織形態(tài)得到不同程度的恢復，其中HPEs組肝組織情況與NC組接近，說明高劑量太子參醇提物對氧化應激造成的肝臟組織損傷修復效果好。

2.6 UPGMA 聚類分析

通過比較不同樣品間Unifrac距離的遠近來判斷其微生物構成的相似性并聚類，從圖5所示的聚類分析結果可以發(fā)現(xiàn)，除個別樣品有重疊外，MPEs組和HPEs組明顯成一簇，相似程度高，而DG組與NC組存在分離，說明NC組、DG組與MPEs和HPEs組微生物構成差異較大。

2.7 屬水平群落組成熱

從圖6的上方進化樹可以看到，NC、PC和LPEs組聚成一類，MPEs和HPEs組聚成一類，DG組單獨聚成一類，表明DG組與各組小鼠腸道菌群結構在屬水平上相似程度較低，說明注射D-半乳糖致?lián)p對小鼠腸道微生物屬水平組成影響較大。在DG組中，甲基桿菌屬（Methylobacterium）、阿爾法變形桿菌（UnclassifiedAlphaproteobacteria）、普雷沃氏菌屬（Paraprevotella）、理研菌屬（Rikenella）等為代表的潛在致病菌屬含量增加。與DG組相比，HPEs組腸道微生物表現(xiàn)為上調(diào)的菌屬有擬桿菌屬（Parabacteroides）、梭菌屬（Anaerotruncus）、另枝菌屬（Alistipes）、糞芽孢菌屬（Coprobacillus）、S24-7等菌屬的豐度，其中Parabacteroides屬SCFAs產(chǎn)生菌，可以產(chǎn)生戊酸，Anaerotruncus能編碼表達合成丁酸鹽所需要的酶，Alistipes可能具有預防和治療如結腸直腸癌等腸道疾病的潛力，相對于其他腸道微生物具有更強的金屬抗性，而S24-7屬于丁酸鹽產(chǎn)生菌。MPEs組上調(diào)Bifidobacterium、Bacteroides和Prabacteroides，其中Bacteroides為腸道優(yōu)勢厭氧菌，能幫助宿主分解多糖，與攝入黨參能提高Bacteroides的研究結果類似。LPEs組盲腸微生物表現(xiàn)為上調(diào)Odoribacter、梭菌屬（Clostridium）和普氏菌屬（Prevotella）。Clostridium可以合成強抗氧化劑3-吲哚丙酸(色氨酸脫氨的產(chǎn)物)，消除D-半乳糖產(chǎn)生的自由基從而保護大腦免受氧化傷害；而Prevotella可提高SCFAs的合成速率，增強對組蛋白去乙?；负虶蛋白偶聯(lián)受體的抑制作用并減少腦損傷。作為主要益生菌，雙歧桿菌（Bifidobacterium）和乳桿菌（Lactobacillus）能改善健康人的總抗氧化狀態(tài)并降低氧化應激指標。有報道人參中的多糖能夠改善某些人參皂苷的腸道生物轉化，同時改善腸道菌群的紊亂情況，特別是促進Lactobacillus和Bacteroides生長。本文也有類似試驗結果，特別是與NC組相比，小鼠注射D-半乳糖后腸道Bifidobacterium和Lactobacillus相對豐度明顯降低，喂食Vc以及高劑量太子參醇提物顯著增加了Bifidobacterium和Lactobacillus的豐度。益生菌的代謝活動可通過清除氧化劑化合物或阻止其在腸道中的生成發(fā)揮抗氧化作用。

2.8 小腸組織切片

腸粘膜的完整性受損易使腸內(nèi)微生物易位進入淋巴系統(tǒng)，更多有害的致病菌會粘附在腸道上皮，與Bifidobacterium和Lactobacillus等有益菌競爭。過量的ROS會減少腸道粘液層厚度，粘液松散會大大降低粘液屏障的保護作用。

Bifidobacterium和Lactobacillus均已被證明具有降低動物腸道內(nèi)毒素水平和改善粘膜屏障功能。從圖7小腸切片圖可見，NC組小腸組織學形態(tài)呈正常狀態(tài)，絨毛排列致密，腸絨毛結構完整；DG組絨毛排列較稀疏，絨毛頂部有萎縮現(xiàn)象，說明腸絨毛結構出現(xiàn)異常；PC組較DG組的粘膜損傷情況有所恢復，但絨毛呈短錐狀，分支仍較少。隨著太子參醇提物劑量的增加，粘膜損傷逐漸修復，圖7f所示HPEs組小鼠小腸絨毛損傷情況明顯恢復，致密程度恢復接近正常水平。

3 結論

本研究表明，太子參醇提物在一定程度上能增強D-半乳糖模型鼠的抗氧化能力。通過臟器指數(shù)、抗氧化酶活、肝臟組織形態(tài)、小腸微生物等指標進行評價，結果表明太子參醇提物能改善D-半乳糖模型鼠生長遲緩的情況，顯著提高小鼠肝臟、腎臟和腦部的CAT、SOD和GSH-PX酶活，降低MDA含量，保護肝臟組織免受氧化損傷，小鼠體內(nèi)總抗氧化能力提高。同時，該太子參醇提物能有效提高小腸內(nèi)容物中Bifidobacterium、Lactobacillus、Bacteroides和Blautia相對豐度，降低Unclassified-Alphaproteobacteria、Rikenella屬等相對豐度，盲腸絨毛致密程度恢復接近正常水平，腸道總體患病風險降低，使得機體總體抗氧化水平得到提高。

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