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所得結(jié)果如圖4所示。先用石油醚浸泡處理的方式,雖然能去除色素、脂肪對測定結(jié)果的干擾,但是也導(dǎo)致少量甜茶苷損失、測定結(jié)果偏低。未經(jīng)石油醚處理過的樣品直接以30%乙腈為溶劑,以超聲或高速均質(zhì)的方式進行提取,所得的甜茶苷含量結(jié)果相對高。
綜合測定的液相色譜圖,未經(jīng)石油醚浸泡處理的樣品測定液在色譜圖中無干擾峰出現(xiàn),因此樣品不需要進行石油醚提前浸泡處理。
對比超聲提取和高速均質(zhì)提取,超聲的設(shè)備成本較低,提取方式較為溫和,因此選取超聲提取作為樣品前處理提取方式。
根據(jù)3.4和3.5的試驗結(jié)果,甜茶葉中甜茶苷含量測定的前處理提取過程為:以30%乙腈為提取溶劑,以超聲作為提取方式,提取時間為30min。
結(jié)果如表3所示,本測定方法回收率測定結(jié)果為96.2%~102.3%,平均回收率為98.9%。
依據(jù)GB/T27404-2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測》附錄F對回收率的要求,被測組分含量在>100mg/kg時,回收率范圍應(yīng)在95%~105%。本測定方法符合要求,表明該方法回收率良好。
6次重復(fù)測定所得結(jié)果及精密度結(jié)果見表4。
結(jié)果顯示,使用此方法測定甜茶葉中的甜茶苷含量的精密度(RSD)符合GB/T27404-2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測》附錄F對精密度的要求(當(dāng)被測組分含量在1%時,精密度應(yīng)≤2.7%),因此,該方法的精密度良好。
本文建立了一種高效液相色譜法測定廣西甜茶葉中甜茶苷含量的方法。經(jīng)研究確定了甜茶葉測定液的制備流程:甜茶葉經(jīng)30%乙腈溶液超聲提取20min后,用30%乙腈定容至25mL,過濾,進樣分析。色譜條件為:C18柱(250mm×4.6mm×5µm);流動相:0.05%磷酸溶液-乙腈(68+32);流速:1mL/min;檢測波長:210nm;進樣量:5µL;柱溫:40℃;外標(biāo)法定量?;厥章屎途芏仍囼灲Y(jié)果表明,該方法精密度好,回收率好。因此,該方法具有簡單、快捷、準(zhǔn)確的優(yōu)點,可以用于測定甜茶葉中甜茶苷含量。
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