2.4基于舒筋活血膠囊成分的可測性辨識潛在的Q-marker

依據(jù)可測性原則，查閱中國藥典明確規(guī)定九味藥材中6個定量成分的測定方法和限度要求，分別為羥基紅花黃色素A（指標含量≥1.0%）、原兒茶酸（指標含量≥0.02%）、刺五加苷B（指標含量≥0.04%）、4-甲氧基水楊醛（指標含量≥0.20%）、絡石苷（指標含量≥0.45%）以及山奈素。α-香附酮、豆甾醇、β-谷甾醇、木酚素、β-胡蘿卜素和除蟲菊素已有文獻報道其含量測定的方法。丁香脂素、高圣草素-7-O-β-D-芹菜糖基(1→2)-β-D-葡萄糖苷、杠柳苷A、去甲絡石苷和玉柏堿無文獻明確報道其含量測定的方法。

2.5基于舒筋活血膠囊的有效性辨析潛在的Q-marker

Q-marker的核心要素是“有效”，因為對中藥有效性的控制是質量控制的根本目的，基于網(wǎng)絡藥理學從“中藥-成分-靶標-通路”網(wǎng)絡圖中發(fā)現(xiàn)與疾病相關的中藥化學成分作為候選的質量標志物，是有效性的藥效研究的關鍵思路。在臨床上已經(jīng)證明舒筋活血膠囊治療骨質疏松癥具有較好的臨床療效，因此，我們選擇以骨質疏松癥為疾病模型。

基于網(wǎng)絡藥理學的研究方法，探究舒筋活血膠囊治療骨質疏松癥發(fā)揮藥效的化學成分及其作用的基因靶點與信號通路。在TCMSP數(shù)據(jù)庫中逐一輸入舒筋活血膠囊各單味藥材名稱，收集各味藥材目前收錄于該數(shù)據(jù)庫的所有化學成分，根據(jù)其ADME（吸收、分布、代謝、排泄）OB≥30%，DL≥0.18，CACO-2≥0.4，BBB≥-0.3對化學成分的類藥性進行評分，選出其中的活性成分。舒筋活血膠囊中總共篩選出16個活性化合物，見表2，其中紅花8個活性化合物、香加皮3個活性化合物、絡石藤3個活性化合物、伸筋草3個活性化合物、雞血藤6個活性化合物、澤蘭2個活性化合物、香附3個活性化合物，槲寄生3個活性化合物，狗脊中并無活性成分。

判斷中藥復方有效性的指標是靶點的有無及作用的強弱，將收集的所有活性化合物輸入到Genecards數(shù)據(jù)庫，收集所有活性成分和疾病“Osteoporosis”靶點，篩選出每個化合物與疾病“Osteoporosis”的相同靶點。故在Uniprot數(shù)據(jù)庫中，輸入整理的相同靶點基因名稱進行檢索，得到基因的ID。將上述獲得的基因的ID輸入到DAVID數(shù)據(jù)庫，進行KEGG通路富集分析，富集分析后將所得的結果設置成FDR＜0.05、P＜0.01作為顯著性強的標準進行篩選，篩選出重要的信號通路并分析。

將上述活性成分、基因靶點、信號通路相互作用的數(shù)據(jù)整理成表格。整理藥材和活性成分、活性成分與靶點、靶點與信號通路之間的相互關系。將上述數(shù)據(jù)聯(lián)系導入Cytoscape軟件中，得到“藥材-化合物成分-基因靶點-信號通路”之間相互作用和關聯(lián)的網(wǎng)絡圖（見圖3）。

收集各化合物和疾病Osteoporosis的基因靶點，其中疾病Osteoporosis的靶點基因4078個，化合物與疾病相同基因靶點有184個。得到的相同的基因靶點ID輸入到DAVID數(shù)據(jù)庫中，舒筋活血膠囊中所有化合物涉及的184個靶點基因分析了83.9%通路，所作用的信號通路信息共135條，以FDR＜0.05、P＜0.01篩選出78條通路，選擇前23條信號通路分析，其具體信息如表格3所示，舒筋活血膠囊里的有效成分通過這些通路來實現(xiàn)治療骨質疏松癥的目的。

如圖3所示，從上至下依次為舒筋活血膠囊的單味藥材、藥材中發(fā)揮作用的活性成分、活性成分所作用的基因靶點、基因靶點所涉及的信號通路。該圖直觀的呈現(xiàn)出舒筋活血膠囊中“藥材-化合物成分-基因靶點-靶點通路”之間的關系。

聲明：本文所用圖片、文字來源《中國中藥雜志》，版權歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權等問題，請與本網(wǎng)聯(lián)系刪除。

相關鏈接：質量，化合物，基因