液體型保健食品包括口服液、飲料、保健酒等品種，由于含糖類(lèi)或蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中易氧化變質(zhì)或受微生物污染而敗壞，因此，通常會(huì)添加適量的防腐劑達(dá)到延長(zhǎng)保質(zhì)期的目的。苯甲酸、山梨酸、對(duì)羥基苯甲酸酯類(lèi)等為常用的防腐劑，但在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，部分口服液型保健食品中加入了苯甲醇，可能作為香料添加，也可能為了達(dá)到防腐抑菌的效果。

苯甲醇是藥用輔料，收載于美國(guó)FDA《非活性物質(zhì)指南》中，是藥膏或藥液中常用的抑菌劑，一般用量為1～2%。苯甲醇在體內(nèi)主要由肝臟代謝，易被氧化成苯甲醛和苯甲酸，已有動(dòng)物毒理實(shí)驗(yàn)證明，苯甲酸的口服LD50為1250～1996mg/kg(鼠)，苯甲醇的口服LD50為1580mg/kg(鼠)，二者具有接近的LD50值，說(shuō)明苯甲醇具有與苯甲酸類(lèi)似的毒性。2019年12月1日起施行的《保健食品備案產(chǎn)品可用輔料及其使用規(guī)定(2019年版)》中規(guī)定，苯甲酸及其鈉鹽在液體制劑中的最大使用量為1g/kg，未列出苯甲醇及其使用規(guī)定。在GB2760-2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中，苯甲醇為允許使用的食品合成香料，是否可用作食品防腐劑未作規(guī)定。國(guó)外對(duì)于食品中苯甲醇、苯甲酸、苯甲酸鹽等多類(lèi)芐基化合物的總使用限值有明確要求，1996年FAO/WHO食品添加劑聯(lián)合專(zhuān)家委員會(huì)(JECFA)規(guī)定食品添加劑中苯甲酸(JECFAnumber850)、苯甲酸鹽、苯甲醛(JECFAnumber22)、苯甲酸乙酯(JECFAnumber23)、苯甲醇(JECFAnumber25)和苯甲酸芐酯(JECFAnumber24)最高每日允許攝入量(ADI)為0～5mg/kg體重(以苯甲酸當(dāng)量計(jì))，并在2001年第57次JECFA會(huì)議中保持了這一結(jié)論。

近年來(lái)，對(duì)于苯甲醇的研究多集中在生產(chǎn)工藝和在藥品領(lǐng)域的應(yīng)用上，針對(duì)保健食品中苯甲醇含量測(cè)定的報(bào)道不多，國(guó)家尚未頒布食品中苯甲醇的測(cè)定方法，可見(jiàn)，建立保健食品中苯甲醇的含量測(cè)定方法，對(duì)于加強(qiáng)保健食品中食品添加劑的監(jiān)控，保障食品安全，具有十分重要的意義。本研究以液體型保健食品為研究對(duì)象，建立了氣相色譜、高效液相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用三種苯甲醇的測(cè)定方法，并比較了三種方法的優(yōu)缺點(diǎn)和適用范圍，希望能夠?yàn)榻⒈郊状紲y(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)方法、制定合理的限值范圍提供參考依據(jù)。

一、實(shí)驗(yàn)部分

1、氣相色譜法

（1）溶液的制備

精密稱(chēng)取苯甲醇對(duì)照品50mg置于50mL量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋并定容，得對(duì)照品儲(chǔ)備液。取樣品混勻，精密稱(chēng)取1.0g，置于10mL量瓶中，加無(wú)水乙醇溶解并超聲提取10min，冷卻至室溫后定容，0.22μm濾膜濾過(guò)，得樣品溶液。

（2）色譜條件

色譜柱:J&WDB-WAX(60mx0.25mmx0.25μm)，升溫程序?yàn)槌跏紲囟?50℃，10℃/min升到180℃，保持3min，20℃/min升到230℃，保持5min；載氣為氮?dú)猓懔魉俣?.0mL/min，分流比10:1，檢測(cè)器溫度250℃，進(jìn)樣口溫度240℃，進(jìn)樣量1μL。

2、高效液相色譜法

（1）溶液的制備

精密稱(chēng)取苯甲醇對(duì)照品25mg置于10mL量瓶中，加50%甲醇溶液稀釋并定容，得對(duì)照品儲(chǔ)備液。取樣品混勻，精密稱(chēng)取1.0g置于25mL量瓶中，加適量50%甲醇溶液超聲提取10min，冷卻至室溫后定容，0.22μm濾膜濾過(guò)，得樣品溶液。

（2）色譜條件

色譜柱:AgilentZORBAXEclipseXDB-C18(4.6x250mm，5μm)，流動(dòng)相為甲醇(A)-20mmo/L乙酸銨溶液(B)，梯度洗脫(0～8min，10%A；8.1～20min，30%A；20.1～30min，10%A)，流速為1.0mL/min，進(jìn)樣量為10uL，柱溫為35℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。

3、氣相色譜-質(zhì)譜法

（1）溶液的制備

對(duì)照品儲(chǔ)備液同氣相色譜法項(xiàng)下儲(chǔ)備液。取樣品混勻，精密稱(chēng)取1.0g，置于10mL量瓶中，加無(wú)水乙醇溶解并超聲提取10min后定容，0.22μm濾膜濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液0.1mL置于10mL量瓶中，加無(wú)水乙醇定容，得樣品溶液。

（2）色譜與質(zhì)譜條件

色譜條件:色譜柱為J&WDB--624UI(60mx0.25mmx1.4μm)，升溫程序?yàn)槌跏紲囟?0℃，保持1min，以50℃/min升溫至150℃，保持2min，再以10℃/min升溫至250℃，保持26min；載氣為氦氣，初始流量1mL/min，保持20min，以2mL/min升至2mL/min，保持20min，進(jìn)樣口溫度250℃，分流比10:1，進(jìn)樣量1μL。

質(zhì)譜條件:傳輸線(xiàn)溫度260℃，離子源溫度280℃，離子化方式EI，電子能量70eV，延遲時(shí)間7.3min，檢測(cè)方式為全掃描(m/z30～300)和SIM選擇離子監(jiān)測(cè)模式(定量離子79.0m/z，定性離子107.0m/z和108.0m/z)。

二、結(jié)果與討論

1、系統(tǒng)適用性

苯甲醇在GC、HPLC、GC-MS三個(gè)系統(tǒng)上的色譜圖見(jiàn)圖1～圖3。樣品在目標(biāo)峰位置無(wú)雜質(zhì)干擾。另外，考察了山梨酸、苯甲酸和苯甲醇三種組分的混合溶液在三個(gè)系統(tǒng)中的分離效果，結(jié)果分離度均大于1.5，滿(mǎn)足系統(tǒng)適用性的要求。

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