化合物9 淡黃色無定形粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C9H7NO, ESI-MS m/z 146 +；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 9.92 (1H, s, 3-CHO), 8.27 (1H, s, H-2), 8.09 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-4), 7.51 (1H, d, J = 7.8 Hz, H-7), 7.24 (1H, dd, J = 8.2, 7.6 Hz, H-5), 7.22 (1H, dd, J = 7.8, 7.6 Hz, H-6)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 185.0 (3-CHO), 138.6 (C-2), 137.1 (C-8), 124.1 (C-9), 123.4 (C-4), 122.1 (C-5), 120.8 (C-6), 118.1 (C-3), 112.6(C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻報道的1H-indole-3-carboxaldehyde的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物9為1H-indole-3- carboxaldehyde 。

化合物10 淡黃色無定形粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C15H11NO, ESI-MS m/z 222 +；1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 10.82 (1H, s, NH), 8.27 (1H, s, H-4), 7.87 (1H, d, J = 7.8 Hz, H-5), 7.72 (1H, br s, H-2'), 7.33 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-8), 7.20 (1H, dd, J = 8.0, 7.6 Hz, H-7), 7.03 (1H, dd, J = 7.8, 7.6 Hz, H-6), 6.86 (1H, br s, H-1'), 2.24 (3H, s, 3-CH3)；13C-NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ: 154.8 (C-2), 139.7 (C-1a), 139.4 (C-8a), 123.4 (C-7), 122.9 (C-4), 121.1 (C-5a), 121.1 (C-2'), 118.7 (C-5), 118.1 (C-6), 116.3 (C-3), 116.3 (C-4a), 114.8 (C-1), 110.3 (C-8), 96.0 (C-1'), 16.6 (3-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的furostifoline的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物10為furostifoline。

化合物11 淡黃色無定形粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C14H13NO2，ESI-MS m/z 228 +；1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 8.04 (2H, overlapped, H-4, 5), 7.50 (4H, overlapped, H-1, 2, 7, 8), 7.25 (1H, dd, J = 7.8, 7.6 Hz, H-6), 4.84 (2H, s, 3-CH2OH), 4.12 (3H, s, N-OCH3)；13C-NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ: 163.2 (C-6), 161.5 (C-2), 155.6 (C-8a), 143.7 (C-4), 125.1 (C-5), 123.4 (C-4a), 112.8 (C-8), 112.2 (C-3), 97.8 (C-7), 91.2 (C-2′), 71.6 (C-3′), 29.5 (C-1′), 26.0 (C-4′), 24.3 (C-5′)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的clausenalansine E的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物11為clausenalansine E。

化合物12 淡黃色無定形粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C13H9NO，ESI-MS m/z 196 +；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 10.09 (1H, s, 3-CHO), 8.60 (1H, dd, J = 1.6 Hz H-4), 8.13 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 7.97 (1H, dd, J = 8.4, 1.6 Hz, H-2), 7.51 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-1), 7.49 (1H, dd, J = 8.2, 7.8 Hz, H-7), 7.48 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-8), 7.32 (1H, dd, J = 8.0, 7.8 Hz, H-6)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 192.1 (3-CHO), 143.5 (C-8a), 140.2 (C-1a), 129.3 (C-3), 127.5 (C-7), 127.1 (C-2), 124.2 (C-4a), 123.7 (C-5a), 123.4 (C-4), 120.9 (C-6), 120.9 (C-5), 111.3 (C-8), 111.1 (C-1)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的3-formylcarbazole的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物12為3-formylcarbazole。

化合物13 淡黃色無定形粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C15H13NO3，ESI-MS m/z 256 +；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 8.61 (1H, s, H-4), 7.99 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-5), 7.39 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-8), 7.36 (1H, dd, J = 8.0, 7.6 Hz, H-7), 7.26 (1H, dd, J = 8.2, 7.6 Hz, H-6), 6.79 (1H, s, H-1), 3.95 ( 3H, s, 2-OCH3), 3.80 (3H, s, 3-COOCH3)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 167.4 (3-COOCH3), 159.3 (C-2), 143.6 (C-1a), 140.1 (C-8a), 125.5 (C-7), 125.0 (C-4), 123.5 (C-5a), 120.4 (C-6), 119.9 (C-5), 116.5 (C-4a), 112.3 (C-3), 110.8 (C-8), 56.2 (3-COOCH3), 52.0 (2-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的clausine L的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物13為clausine L。

化合物14 淡黃色無定型粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C14H11NO3，ESI-MS m/z 242 +；1H-NMR (acetone-d6, 400 MHz) δ: 11.62 (1H, br s, NH), 8.29 (1H, d, J =1.8 Hz, H-4), 8.15 (1H, dd, J = 8.2 Hz, H-5), 7.53 (1H, d, J = 7.8 Hz, H-8), 7.47 (1H, dd, J = 1.8 Hz, H-2), 7.40 (1H, dd, J = 8.2, 7.6 Hz, H-7), 7.18 (1H, dd, J = 8.0, 7.6 Hz, Hz, H-6)；13C-NMR (acetone-d6, 100 MHz) δ: 167.2 (3-COOCH3), 143.1 (C-1), 140.2 (C-8a), 132.9 (C-1a), 126.1 (C-7), 123.4 (C-5a), 123.0 (C-3), 120.7 (C-4a), 120.6 (C-5), 119.4 (C-6), 114.0 (C-4), 111.8 (C-8), 110.3 (C-2), 51.8 (3-COOCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的clausine E的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物14為對clausine E。

化合物15 淡黃色無定型粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C14H11NO2，ESI-MS m/z 226 +；1H-NMR (acetone-d6, 400 MHz) δ: 8.36 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-4), 8.17 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 7.58 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-2), 7.54 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-8), 7.43 (1H, dd, J = 8.2, 7.8 Hz, H-7), 7.22 (1H, dd, J = 8.0, 7.8 Hz, H-6), 3.86 (3H, s, 3-COOCH3)；13C-NMR (acetone-d6, 100 MHz) δ: 167.3 (3-COOCH3), 143.9 (C-1a), 140.2 (C-8a), 133.2 (C-2), 125.9 (C-7), 123.3 (C-4a) 123.1 (C-5a), 120.7 (C-4), 120.5 (C-3), 119.2 (C-5), 113.4 (C-6), 111.7 (C-8), 51.7 (3-COOCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的methyl carbazole-3-carboxyaate的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物15為methyl carbazole-3-carboxyaate。

化合物16 淡黃色無定形粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C14H11NO2，ESI-MS m/z 226 +；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 10.49 (1H, s, 3-CHO), 8.56 (1H, s, H-4), 8.34 (1H, s, NH), 8.00 (1H, d, J = 7.8 Hz, H-5), 7.38 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-8), 7.32 (1H, dd, J = 8.2, 7.6 Hz, H-7), 7.26 (1H, dd, J = 7.8, 7.6 Hz, H-6), 6.87 (1H, s, H-1), 3.99 (3H, s, 2-OCH3)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 189.7 (3-CHO), 161.8 (C-2), 145.1 (C-1a), 140.1 (C-8a), 125.9 (C-7), 123.9 (C-5a), 122.0 (C-4), 121.0 (C-6), 120.3 (C-5), 119.2 (C-3), 117.6 (C-4a), 110.8 (C-8), 92.6 (C-1), 56.0 (2-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的glycosinin的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物16為glycosinin。

化合物17 淡黃色無定型粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C14H13NO，ESI-MS m/z 212 +；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 8.28 (1H, s, NH), 8.18 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 7.66 (1H, br s, H-4), 7.52 (1H, dd, J = 7.8, 7.6 Hz, H-7), 7.47 (1H, d, J = 7.8 Hz, H-8), 7.36 (1H, dd, J = 8.0, 7.6 Hz, H-6), 6.85 (1H, s, H-1), 4.06 (3H, s, 1-OCH3), 2.68 (3H, s, 3-CH3)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 145.5 (C-1), 139.6 (C-8a), 129.6 (C-3), 128.1 (C-1a), 125.6 (C-7), 124.5 (C-4a), 123.7 (C-5a), 120.6 (C-5), 119.3 (C-6), 112.7 (C-4), 111.0 (C-8), 107.8 (C-2), 55.6 (1-OCH3), 22.1 (3-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的murrayafoline A的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物17為murrayafoline A。

化合物18 淡黃色無定形粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C16H15NO4，ESI-MS m/z 286 +；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 8.48 (1H, s, H-4), 8.30 (1H, s, NH), 7.84 (1H, d, J = 8.6 Hz, H-5), 6.89 (1H, s, H-1), 6.86 (1H, dd, J = 8.6, 2.2 Hz, H-6), 6.82 (1H, d, J = 2.2 Hz, H-8), 3.97 (3H, s, 2-OCH3), 3.94 (3H, s, 7-OCH3), 3.91 (3H, s, 3-COOCH3)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 167.3 (3-COOCH3), 158.9 (C-7), 158.6 (C-2), 143.6 (C-1a), 141.4 (C-8a), 124.0 (C-4), 120.6 (C-5), 117.3 (C-5a), 116.8 (C-4a), 112.4 (C-3), 108.8 (C-6), 95.4 (C-8), 93.9 (C-1), 56.4 (2-OCH3), 55.7 (3-COOCH3), 52.0 (7-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的clausine H的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物18為clausine H。

化合物19 淡黃色無定形粉末，改良碘化鉍鉀顯色反應陽性；C18H17NO3，ESI-MS m/z 296 +；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7.85 (1H, s, H-4), 7.74 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-5), 6.88 1H, d, J = 2.0 Hz, H-8), 6.78 (1H, dd, J = 8.4, 2.0 Hz, H-6), 5.28 (1H, t, J = 6.8 Hz, H-2′), 3.57 (2H, d, J = 6.8 Hz, H-1′), 1.86 (3H, s, H-4′), 1.73 (3H, s, H-5′)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 195.5 (3-CHO), 157.3 (C-2), 156.0 (C-7), 145.4 (C-10), 141.9 (C-9), 134.0(C-3′), 123.9 (C-4), 121.4 (C-2′), 120.6 (C-5), 117.8 (C-11), 116.9 (C-12), 115.3 (C-3), 109.9 (C-6), 109.2 (C-l), 97.8 (C-8), 25.8 (C-5′), 23.0 (C-1′), 18.2 (C-4′)。以上數(shù)據(jù)與文獻中報道的2, 7-dihydroxy-3-formyl-1-(3'-methyl-2'- butenyl)carbazole的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物19為2, 7-dihydroxy-3-formyl-1- (3'-methyl-2'-butenyl)carbazole。

4 抗類風濕性關(guān)節(jié)炎活性評價

以MH7A滑膜成纖維細胞株為抗類風濕性關(guān)節(jié)炎活性評價細胞株，以甲氨蝶呤為陽性對照藥物，采用MTS法通過評價分離得到的19個已知化合物的體外抑制MH7A滑膜成纖維細胞增殖的活性對分離得到的化合物1～19的抗類風濕性關(guān)節(jié)炎活性進行了評價，詳細的實驗操作方法和操作流程見作者已經(jīng)發(fā)表的研究論文。

抗類風濕性關(guān)節(jié)炎活性評價結(jié)果表明化合物10～19對MH7A滑膜成纖維細胞表現(xiàn)出了較為顯著的生長抑制活性，它們對滑膜細胞增殖的抑制活性的IC50為(27.63±0.18)～(235.67±2.16) μmol·L-1，但化合物1～9未表現(xiàn)出明顯的抑制滑膜細胞生長的活性(IC50＞300.00 μmol·L-1)。值得注意的是，化合物10～13、16和18表現(xiàn)出了優(yōu)于陽性對照藥物甲氨蝶呤對滑膜細胞的生長抑制活性，提示它們具有顯著的體外抗類風濕性關(guān)節(jié)炎活性，見表1。

5 結(jié)果與討論

本研究綜合運用多種現(xiàn)代色譜分離方法和波譜鑒定技術(shù)對蕓香科黃皮屬植物假黃皮枝葉的90%乙醇提取物中的化學成分進行了系統(tǒng)研究，從中分離鑒定了19個化合物，其中化合物1～11為首次從假黃皮中分離得到，化合物1、2、10為首次從黃皮屬植物中分離得到。通過對分離得到的化合物1～19的體外抑制MH7A滑膜成纖維細胞增殖活性評價發(fā)現(xiàn)了10個具有較為顯著的抗類風濕性關(guān)節(jié)炎活性的化合物。本研究豐富了假黃皮作為抗類風濕性關(guān)節(jié)炎民間藥用植物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，同時可為假黃皮植物資源的合理開發(fā)與利用提供重要的科學依據(jù)。

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