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前期的研究結(jié)果表明,利用乳酸菌和酵母菌發(fā)酵能夠水解小麥致敏蛋白,降低其抗原性。胃腸道致敏是食物致敏的主要方式,食物消化后的肽段是誘發(fā)過敏反應(yīng)的最直接原因。一些研究利用細(xì)胞實驗或抗原抗體的特異性結(jié)合強度評價了發(fā)酵面團消化產(chǎn)物的致敏性,但是目前大多數(shù)研究集中在食物過敏的效應(yīng)階段,即主要探索了致敏原在刺激肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞后引起相關(guān)抗體和細(xì)胞因子分泌的變化,而對食物過敏的致敏階段,即致敏原經(jīng)消化后通過腸道上皮屏障,引發(fā)一系列炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答的研究較少。
近日,中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營養(yǎng)工程學(xué)院從酸面團中分離出一株乳酸片球菌XZ31, 一株釀酒酵母JM4。采用體外酶消化、腸道轉(zhuǎn)運模型和免疫學(xué)分析相結(jié)合的方法,測定以上兩株菌發(fā)酵產(chǎn)物的消化特性、抗體反應(yīng)性和細(xì)胞毒性,建立發(fā)酵-消化-致敏關(guān)聯(lián)評價體系,為低致敏性小麥產(chǎn)品的開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。
(1)發(fā)酵處理可以促進面團蛋白在胃腸道消化過程中更進一步的水解;
(2)在一定作用時間內(nèi),小麥可溶蛋白對腸道上皮屏障沒有損害作用,難溶蛋白作用30 min即可顯著破壞腸道上皮屏障的緊密連接。酵母菌發(fā)酵未能顯著減輕難溶蛋白對上皮細(xì)胞的損害,相比于乳酸片球菌XZ31單獨發(fā)酵,其與酵母菌復(fù)配發(fā)酵能更好地減少跨膜難溶蛋白(包括麩質(zhì)敏感肽)的含量,減輕腸道上皮屏障的損傷;
(3)小麥難溶蛋白造成的腸道上皮屏障的損傷可能與PKC介導(dǎo)的肌動蛋白重組和PI3K介導(dǎo)的ZO-1蛋白基因表達量的減少相關(guān)。
總之,LAB單培養(yǎng)和與酵母共培養(yǎng)在不同方面有助于提高小麥蛋白質(zhì)的消化率。發(fā)酵導(dǎo)致白蛋白/球蛋白抗原性降低,面筋R5反應(yīng)性增加,其中L+S組的變化最為顯著。胃蛋白酶-胰蛋白酶消化對抗原的水解作用比發(fā)酵處理更明顯。LAB預(yù)處理通過防止肌動蛋白聚合和絨毛萎縮來防止面筋誘導(dǎo)的Caco-2細(xì)胞單層通透性的增加,特別是在L+S組中。
此外,PI3K和PKC可能與面筋誘導(dǎo)的腸道屏障破壞有關(guān)。本研究的結(jié)果為LAB發(fā)酵對小麥蛋白致敏性和毒性的影響提供了有價值的見解,有助于促進多菌株發(fā)酵劑在低致敏和無麩質(zhì)小麥產(chǎn)品中的應(yīng)用。LAB在體外降解小麥過敏原中的作用為LAB在治療小麥過敏中的應(yīng)用提供了依據(jù)。LAB的體內(nèi)生物學(xué)功能,如調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、緩解過敏或自身免疫性疾病,值得更深入的研究。
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