（三）前處理方法的對(duì)比驗(yàn)證

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，正己烷脫脂法[20]是將待凈化濾液以正己烷脫脂，定容過(guò)膜后上機(jī)檢測(cè)，相較于固相萃取法，在保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的前提下，可有效節(jié)約樣品前處理時(shí)間和試驗(yàn)成本。為驗(yàn)證正己烷脫脂法和固相萃取法的差異，選取陰性牛奶樣品，在加標(biāo)濃度5μg/kg下，分別按照文獻(xiàn)中的正己烷脫脂法和本試驗(yàn)中的固相萃取法對(duì)樣品進(jìn)行前處理后上機(jī)檢測(cè)，結(jié)果如圖2所示。

由圖2中2種前處理方法加標(biāo)檢測(cè)結(jié)果質(zhì)譜圖對(duì)比可知，在相同加標(biāo)濃度下，正己烷脫脂法檢測(cè)結(jié)果存在明顯的雜峰干擾，且目標(biāo)峰強(qiáng)度相對(duì)較低；而固相萃取法檢測(cè)結(jié)果目標(biāo)峰峰型尖銳對(duì)稱，響應(yīng)強(qiáng)度高，雜峰干擾小，更有利于定量分析。另外，在前處理過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，正己烷脫脂法在脫脂后，濾液呈白色渾濁狀態(tài)，過(guò)濾膜時(shí)阻力較大，說(shuō)明存在大顆粒雜質(zhì)，上機(jī)液呈白色半透明狀，存在阻塞管路、污染離子源的可能；而固相萃取法定容后的濾液和過(guò)濾膜后的上機(jī)液均澄清透明，更有利于對(duì)儀器的保護(hù)。雖然正己烷脫脂法可在一定程度上節(jié)約時(shí)間和試驗(yàn)成本，但從峰型、響應(yīng)強(qiáng)度和儀器安全風(fēng)險(xiǎn)角度考慮，選擇固相萃取法更為可靠。

（四）標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和精密度試驗(yàn)

在痕量分析中，樣品前處理過(guò)程常常伴隨著目標(biāo)物的損失，影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，同位素內(nèi)標(biāo)法可有效降低這一影響，但同位素內(nèi)標(biāo)往往價(jià)格昂貴，大幅提高了試驗(yàn)成本。因此，采用兩種方式進(jìn)行定量。方式1采用外標(biāo)法，參考農(nóng)業(yè)部1031號(hào)公告-2-2008標(biāo)準(zhǔn)[19]要求，準(zhǔn)確移取地塞米松標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，以20%乙腈水溶液稀釋，配制成濃度為1、2、5、10、50 ng/m L的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液；方式2采用標(biāo)準(zhǔn)加入法，按照本試驗(yàn)所述標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制步驟操作。將兩組標(biāo)準(zhǔn)工作液上機(jī)檢測(cè)，以目標(biāo)化合物峰面積（Y）與濃度（X）進(jìn)行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見(jiàn)表2。

由表2可知，兩種標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方式的線性關(guān)系良好，但各濃度點(diǎn)峰面積差別較大，方式1是方式2對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)濃度點(diǎn)峰面積的3～5倍，表明受樣品前處理過(guò)程的影響，目標(biāo)物損失較為明顯。為進(jìn)一步驗(yàn)證兩種標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方式的適用性，在線性范圍內(nèi)選擇0.5、2.5、5.0μg/kg水平加標(biāo)濃度（每個(gè)濃度點(diǎn)平行測(cè)定6次），按照本試驗(yàn)所選擇的固相萃取法進(jìn)行前處理后上機(jī)檢測(cè)，分別代入上述兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行線性擬合，考查回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表3。

由表3可知，3水平加標(biāo)檢測(cè)結(jié)果代入方式1所繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線中，平均回收率<20%,RSD>10%，無(wú)法滿足實(shí)驗(yàn)要求；代入方式2所繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線中，平均回收率在65.7%～85.7%,RSD<10%，滿足農(nóng)業(yè)部1031號(hào)公告-2-2008標(biāo)準(zhǔn)[19]中關(guān)于地塞米松在牛奶樣品中的回收率（50%～120%）及精密度（<20%）要求。因此，選擇標(biāo)準(zhǔn)加入法定量結(jié)果更為準(zhǔn)確。

（五）方法定量限和檢出限

準(zhǔn)確移取稀釋后的地塞米松標(biāo)準(zhǔn)貯備液逐級(jí)遞減添加到空白樣品中，按照上文選擇的固相萃取法和條件進(jìn)行處理和分析，以10倍信噪比作為定量限，如圖3所示，加標(biāo)濃度為0.25μg/kg可作為地塞米松在牛奶中的定量限，依據(jù)定量限為3倍檢出限原則，得到方法檢出限約為0.08μg/kg，滿足農(nóng)業(yè)部1031號(hào)公告-2-2008標(biāo)準(zhǔn)[19]中關(guān)于地塞米松在牛奶樣品中的靈敏度（定量限0.2μg/L）要求。

（六）樣品檢測(cè)

抽取當(dāng)?shù)刂行W(xué)的牛奶樣品14份，采用本方法對(duì)其地塞米松殘留進(jìn)行測(cè)定，與農(nóng)業(yè)部1031號(hào)公告-2-2008標(biāo)準(zhǔn)中的檢測(cè)方式和定量方法相比，可有效節(jié)約試驗(yàn)成本，提高分析準(zhǔn)確度。結(jié)果均未檢出地塞米松殘留，滿足食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于牛奶中地塞米松最大殘留限量的要求。

三、結(jié)論

本研究通過(guò)簡(jiǎn)化農(nóng)業(yè)部1031號(hào)公告-2-2008標(biāo)準(zhǔn)中的流動(dòng)相組合，縮短分析時(shí)間，優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)，對(duì)比兩種樣品前處理方法，改進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方式，建立了檢測(cè)牛奶中地塞米松殘留的固相萃取-高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析方法。該方法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、可靠，能夠滿足實(shí)驗(yàn)室對(duì)批量牛奶樣品中地塞米松殘留的檢測(cè)要求。

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