目的采用HPLC法測定不同產(chǎn)地和不同生長年份北蒼術(shù)[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]中蒼術(shù)素的含量。方法收集不同來源的北蒼術(shù)樣品，以甲醇為溶劑，采用超聲提取法提取，采用HPLC法測定蒼術(shù)素的含量，選用DiamonsilC18(250mm×4.6mm，5μL)色譜柱，流動相為甲醇-水（79∶21），檢測波長為340nm，流速1mL/min，柱溫25℃，進樣量20μL。結(jié)果蒼術(shù)素的線性范圍為0.1875～0.6000mg/mL，方法精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性良好；加樣回收率為95.4%。不同產(chǎn)地北蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量為0.3232%～0.5959%，阿榮旗產(chǎn)北蒼術(shù)飲片中蒼術(shù)素含量最高。3年生、4年生、5年生蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量分別為：（0.3500±0.0048）%、（0.4550±0.0030）%、（0.3350±0.0118）%。結(jié)論本方法簡便、快速、準確，適用于北蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量測定。

2015年版《中國藥典》規(guī)定，蒼術(shù)的來源有2種，分別是茅蒼術(shù)（Atractylodeslancea(Thunb.)DC）和北蒼術(shù)（Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.)。茅蒼術(shù)主要產(chǎn)于江蘇、湖北、河南等省；北蒼術(shù)主要產(chǎn)自內(nèi)蒙古自治區(qū)、山西、黑龍江、吉林等省。研究表明蒼術(shù)的主要化學(xué)成分為聚乙烯炔和倍半萜類化合物，具有抗癌、抑菌、抗病毒等藥理作用，臨床上常用于病毒性疾病的治療。北蒼術(shù)的原植物分布區(qū)域廣泛，各地生境不盡相同，影響蒼術(shù)中藥材的質(zhì)量。本研究建立了HPLC法，測定不同來源北蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量，現(xiàn)報道如下。

1儀器與試藥

1.1儀器

Waters2695型液相色譜儀（沃特世科技有限公司），MDF-492型超低溫冰箱（日本三洋公司），DFT200C型高速多功能粉碎機（永康市敏業(yè)工貿(mào)有限公司），CPX3800H-C型超聲波清洗機（日本BRAN-SONIC公司），DHG-9240A型恒溫鼓風(fēng)干燥箱（常州市國旺儀器制造有限公司），PALL水純化系統(tǒng)（美國PallCorporation公司），ML203T/02型十萬級電子天平（瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司），MDF-492型超低溫冰箱（日本三洋公司）。

1.2試劑

甲醇（色譜純，德國默克公司，批號：603-001-00-x)，95%乙醇（天津福晨化學(xué)試劑廠，批號：20171110），石油醚（沸程60～90℃，天津福晨化學(xué)試劑廠，批號：20171201），蒼術(shù)素標準品（中國食品藥品檢定研究院，批號：111924-201806）。

1.3藥材

市售飲片的產(chǎn)地分別源于內(nèi)蒙古自治區(qū)阿榮旗、赤峰、莫力達瓦達斡爾族自治旗（簡稱“莫旗”）、扎蘭屯；3年生、4年生、5年生栽培北蒼術(shù)根莖均采自于蒙古自治區(qū)莫力達瓦旗多熱博熱其勒村（簡稱“多熱”），依次標記為1～7號。經(jīng)齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院王曉麗副教授鑒定為北蒼術(shù)[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]的根莖。

2方法與結(jié)果

2.1溶液制備方法

2.1.1對照品溶液

稱取蒼術(shù)素標準品適量，甲醇溶解，超聲10min，制得20μg/mL的溶液，經(jīng)0.45μm的微孔濾膜濾過，備用。

2.1.2供試品溶液

取“1.3”項下不同來源的北蒼術(shù)飲片，粉碎后過三號篩，分別稱取0.2g，置于具塞錐形瓶中，加入甲醇50mL，用封口膜密封后，稱定重量，超聲提取（功率250W，頻率40KHz)1h，冷卻至室溫后，稱定重量，用甲醇補足缺失的重量，用0.45μm過濾膜過濾，取續(xù)濾液，備用。

2.2色譜條件

DiamonsilC18色譜柱（4.6mm×250mm，5μL），流動相甲醇-水（79∶21）等度洗脫，流速1.0mL/min，檢測波長340nm，進樣量20μL。

2.3方法學(xué)考察

2.3.1線性關(guān)系考察

精密稱取對照品60mg，甲醇定容至10mL，混勻，移取1mL至10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，標記為1號。從1號中吸取5mL溶液，用甲醇定容至刻度，標記為2號。以此類推，得3、4、5、6號溶液。按“2.1”項色譜條件下進行測定。以峰面積為縱坐標（Y），對照品濃度為橫坐標（X）進行線性回歸，得回歸方程為Y=2715.1X-9.6694(r=0.9998），對照品濃度在0.01875～0.6000mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3.2精密度試驗

吸取“2.1.2”項下供試品溶液20μL，按“2.2”項色譜條件，連續(xù)進樣6次，測定峰面積，經(jīng)計算RSD為0.49%，表明儀器精密度良好。

2.3.3重復(fù)性試驗

吸取“2.1.1”項下對照溶液20μL，按“2.2”項下色譜條件，連續(xù)進樣6次，測定蒼術(shù)素峰面積，經(jīng)計算RSD為1.79%，表明方法重復(fù)性良好。

2.3.4穩(wěn)定性試驗

吸取“2.1.1”項下供試品溶液20μL，按“2.2”項下色譜條件，分別在0、2、4、6、8、10h時進樣，測定蒼術(shù)素峰面積RSD為1.74%，表明供試品溶液在10h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.3.5加樣回收率試驗

稱取4號粉末0.1000g，共6份，分別加入“2.1.1”項下對照溶液5mL，置于50mL錐形瓶中，用甲醇定容至刻度，超聲提取1h后過0.45μm微孔濾膜，取續(xù)濾液，按“2.2”項下色譜條件測定，計算回收率為95.4%，見表1。

2.4樣品含量測定

分別稱取1～7號蒼術(shù)樣品0.2g，每份藥材制備3份平行樣，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，按“22..22”項色譜條件測定，結(jié)果不同產(chǎn)地的蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量為0.3200%～0.5599%，阿榮旗飲片中蒼術(shù)素含量最高。3年生、4年生、5年生蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量分別為：（0.3500±0.0048）%、（0.4550±0.0030）%、（0.3350±0.0118）%，見表2。
3討論

含量測定結(jié)果顯示，4年生人工栽培北蒼術(shù)的蒼術(shù)素比3年生和5年生的含量高，以指標成分的含量為依據(jù)，本實驗結(jié)果表明北蒼術(shù)的最佳栽培時間為4年，與市售飲片相比，內(nèi)蒙古莫旗的人工仿野生種植蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量符合標準。蒼術(shù)中揮發(fā)性成分是主要活性成分，為特殊的次生代謝產(chǎn)物，其含量受遺傳、個體發(fā)育和環(huán)境變化的影響。內(nèi)蒙古自治區(qū)為溫帶大陸性氣候，阿榮旗、莫旗、扎蘭屯及多熱地處內(nèi)蒙古東部，位于大興安嶺東麓中段，氣候呈現(xiàn)出春溫、夏升、秋降、冬寒的特點，劇烈的溫差有利于區(qū)域內(nèi)北蒼術(shù)體內(nèi)物質(zhì)積累。本方法簡便、快速、準確，適用于北蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量測定。

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