2.3.2 生物堿類化合物

從水冬瓜根皮甲醇提取物中共推斷出4個(gè)生物堿類化合物，其中化合物11，12，13，14分別為腺苷、Cyclo(phenylalanyl-prolyl)、Methyl N-[5-(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)-1H-benzo[d]imidazol-2-yl]carbamate、Tridemorph，這4個(gè)化合物結(jié)構(gòu)相似，均為生物堿類化合物。

分析此類化合物的裂解規(guī)律時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物11在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為268.10437，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去糖鏈（C5H10O4）形成特征碎片離子m/z 136.06204 [M-C5H10O4]+，符合腺苷的裂解規(guī)律；

化合物12在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為245.12880，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子NH3或脫去一分子CO2分別形成特征碎片離子m/z 227.11772 [M-NH3]+或m/z 203.11798 [M-CO2+H]+；

化合物13在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為336.10820，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CO2或脫去一分子CH3COONH2分別形成特征碎片離子m/z 292.09766 [M-CO2+H]+、m/z 260.09247 [M-CH3COONH2]+；

化合物14在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為298.31061，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CH3(CH2)11CH3后，N環(huán)形成特征碎片離子m/z 115.09944 [M-CH3(CH2)11CH3]。

2.3.3 氨基酸類化合物

從水冬瓜根皮甲醇提取物中共推斷出1個(gè)氨基酸類化合物，化合物15為L(zhǎng)-亮氨酸。分析此類化合物的裂解規(guī)律時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物15在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為132.10223，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CO2形成特征碎片離子m/z 86.09720 [M-CO2+H]+，與文獻(xiàn)報(bào)道L-亮氨酸的特征碎片離子m/z 86.2一致，符合L-亮氨酸的裂解規(guī)律。

2.3.4 苯丙素類化合物

從水冬瓜根皮甲醇提取物中共推斷出2個(gè)苯丙素類化合物，其中化合物16，17分別為BMK methyl glycidate、肉桂醛，這2個(gè)化合物結(jié)構(gòu)相似，均為苯丙素類化合物。分析此類化合物的裂解規(guī)律時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物16在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為193.08610，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子H2O與一分子CO2形成特征碎片離子m/z 131.04926 [M-CO2-H2O+H]+；

化合物17在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為133.06503，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CO或脫去一分子甲醛形成特征碎片離子m/z 105.07033 [M-CO+H]+、m/z 103.05461 [M-HCHO+H]。

2.3.5 酯類化合物

從水冬瓜根皮甲醇提取物中共推斷出2個(gè)酯類化合物，其中化合物18，19分別為Trimethyl trimellitate、Bis(2-ethylhexyl)adipate，這2個(gè)化合物結(jié)構(gòu)相似，均為酯類化合物。分析此類化合物的裂解規(guī)律時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物18在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為253.07085，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子H2O與一分子CO或脫去一分子乙酸或脫去兩分子乙酸分別形成特征碎片離子m/z 207.02899 [M-CO-H2O+H]+、m/z 193.04967 [M-CH3COOH+H]+、m/z 133.02855 [M-2CH3COOH+H]+；

化合物19在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為371.31570，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CH3(CH2)3CH(CH2CH3)CH2OH或脫去兩分子CH3(CH2)3CH(CH2CH3)CH2OH分別形成特征碎片離子m/z 241.18062 [M-CH3(CH2)3CH(CH2CH3)CH2OH+H]+、m/z 111.04444 [M-2CH3(CH2)3CH(CH2CH3)CH2OH+H]。

2.3.6 萜類化合物

從水冬瓜根皮甲醇提取物中共推斷出2個(gè)萜類化合物，其中化合物20，21分別為斷氧化馬錢苷、馬兜鈴?fù)?，這2個(gè)化合物結(jié)構(gòu)相似，均為萜類化合物。分析此類化合物的裂解規(guī)律時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物20在負(fù)離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M-H]-為403.12503，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CH3OH形成特征碎片離子m/z 371.09811 [M-CH3OH-H]-，其準(zhǔn)分子離子峰脫去醚鍵左側(cè)一分子C6H11O5形成特征碎片離子m/z 241.07170 [M-C6H11O5]-，又失去一分子H2O形成特征碎片離子m/z 223.06068 [M-C6H11O5-H2O]-，接著又失去一分子CO2或一分子CH3OH，分別形成特征碎片離子m/z 179.07065 [M-C6H11O5-CO2]-或m/z 191.03514 [M-C6H11O5-CH3OH]-；

化合物21在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為219.17458，在二級(jí)質(zhì)譜中，MS/MS特征碎片離子m/z 203.14403、m/z 91.05507與文獻(xiàn)報(bào)道的m/z 203、m/z 91相符，化合物22為馬兜鈴?fù)?/p>

2.3.7 芳香含氧衍生物類化合物

從水冬瓜根皮甲醇提取物中共推斷出2個(gè)芳香含氧衍生物類化合物，其中化合物22，23分別為3,5-di-tert-Butyl-4-hydroxybenzaldehyde、Diisobutylphthalate，這2個(gè)化合物結(jié)構(gòu)相似，均為芳香含氧衍生物類化合物。分析此類化合物的裂解規(guī)律時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物22在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為235.16948，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子H2O或脫去一分子H2O與一分子CO或脫去兩分子CO分別形成特征碎片離子m/z 217.12384 [M-H2O+H]+、m/z 189.03033 [M-H2O-CO+H]+、m/z 179.10675 [M-2CO+H]+；

化合物23在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為279.15936，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CH(CH3)2CH2OH或脫去一分子CH(CH3)2CH2OH與一分子CO分別形成特征碎片離子m/z 205.08472 [M-CH(CH3)2CH2OH+H]+、m/z 149.02345 [M-CH(CH3)2CH2OH-CO+H]。

2.3.8 酰胺類化合物

從水冬瓜根皮甲醇提取物中共推斷出4個(gè)酰胺類化合物，其中化合物24，25，26，27分別為Palmitoyl ethanolamide、Hexadecanamide、Stearamide、Oleoyl ethylamide，這4個(gè)化合物結(jié)構(gòu)相似，均為酰胺類化合物。

分析此類化合物的裂解規(guī)律時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物24在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為300.28992，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子H2O或脫去一分子H2O與一分子CO2分別形成特征碎片離子m/z 282.27850 [M-H2O+H]+、m/z 238.06746 [M-H2O-CO2+H]+；

化合物25在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為256.26370，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CO或脫去一分子H2O與一分子CO或脫去一分子CH3(CH2)5CH3或脫去一分子CH3(CH2)9CH3或脫去一分子CH3(CH2)11CH3分別形成特征碎片離子m/z 228.13831 [M-CO+H]+、m/z 210.03716 [M-H2O-CO+H]+、m/z155.05942 [M-CH3(CH2)5CH3]+、m/z 100.07642 [M-CH3(CH2)9CH3+H]+、m/z71.08627 [M-CH3(CH2)11CH3]+；

化合物26在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為284.29514，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CH3(CH2)12CH3或脫去一分子CH3(CH2)13CH3或脫去一分子CH3(CH2)14CH3分別形成特征碎片離子m/z 85.10201 [M-CH3(CH2)12CH3]+、m/z 72.04524 [M- CH3(CH2)13CH3+H]+、m/z 57.07080 [M-CH3(CH2)14CH3]+；

化合物27在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為310.31052，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CH3(CH2)7CH=CHCH2CH3或脫去一分子CH3(CH2)7CH=CH(CH2)2CH3或脫去一分子CH3(CH2)7CH=CH(CH2)5CH3或脫去一分子CH3(CH2)7CH=CH(CH2)6CH3分別形成特征碎片離子m/z 142.12238 [M-CH3(CH2)7CH=CHCH2CH3+H]+、m/z 128.10721 [M-CH3(CH2)7CH=CH(CH2)2CH3+H]+、m/z 85.05311 [M-CH3(CH2)7CH=CH(CH2)5CH3+H]+、m/z 72.08159 [M-CH3(CH2)7CH=CH(CH2)6CH3+H]。

2.3.9 其他類化合物

從水冬瓜根皮甲醇提取物中共推斷出9個(gè)其他類化合物，其中化合物28，29，30，31，32，33，34，35，36分別為Dodecyl sulfate、4-Dodecylbenzenesulfonic acid、Myristyl sulfate、Triphenyl phosphate、Tris(2-butoxyethyl) phosphate、Glycerophospho-N-palmitoyl ethanolamine、Citroflex 4、Citroflex 4、1,2-Cyclohexane dicarboxylic acid diisononyl ester。

分析此類化合物的裂解規(guī)律時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物28在負(fù)離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M-H]-為265.14810，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰烴與氧斷開，脫去一分子H3C(CH2)10CH3形成特征碎片離子m/z 96.95894 [M-H3C(CH2)10CH3]-；

化合物29在負(fù)離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M-H]-為325.18460，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰烴脫去一分子H3C(CH2)8CH3形成特征碎片離子m/z 183.01149 [M-H3C(CH2)8CH3-H]-；

化合物30在負(fù)離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M-H]-為293.17953，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰烴脫去一分子H3C(CH2)12CH3形成特征碎片離子m/z 96.95892 [M-H3C(CH2)12CH3-H]-；

化合物31在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為327.07849，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰烴脫去一分子C6H5OH形成特征碎片離子m/z 233.03616 [M-C6H5OH+H]+；

化合物32在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為399.25095，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰烴脫去三分子CH3(CH2)2CH3或脫去一分子CH3(CH2)2OCH2CH3或脫去兩分子CH3(CH2)2OCH2CH3分別形成特征碎片離子m/z 225.08896 [M-3CH3(CH2)2CH3+H]+、m/z 299.16177 [M-CH3(CH2)2OCH2CH3+H]+、m/z 199.07320 [M-2CH3(CH2)2OCH2CH3+H]+；

化合物33在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為454.29321，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰烴脫去一分子H2O形成特征碎片離子m/z 436.28110 [M-H2O+H]+；

化合物34在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為403.23337，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子O(CH2)3CH3與丟失一分子(CH2)3CH3縮合成含二酮的五元環(huán)醚，形成特征碎片離子m/z 273.09760 [M-O(CH2)3CH3-(CH2)3CH3+H]+，其準(zhǔn)分子離子峰脫去兩分子丁基及氧O(CH2)3CH3形成特征碎片離子m/z 259.15393 [M-2O(CH2)3CH3+H]+，其準(zhǔn)分子離子峰脫去三分子O(CH2)3CH3并補(bǔ)H形成特征碎片離子m/z 185.08092 [M-3O(CH2)3CH3+H]+；

化合物35在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為361.22223，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去兩分子丁基及O(CH2)3CH3形成特征碎片離子m/z 213.07573 [M-2C4H10O+H]+，其準(zhǔn)分子離子峰脫去三分子丁基及O(CH2)3CH3形成特征碎片離子m/z 139.00267 [M-3C4H10O+H]+；

化合物36在正離子模式下，一級(jí)質(zhì)譜中準(zhǔn)分子離子峰為m/z [M+H]+為425.36270，在二級(jí)質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰脫去一分子CH3CH(CH3)(CH2)6OH形成特征碎片離子m/z 281.21057 [M-CH3CH(CH3)(CH2)6OH+H]。

3 結(jié)論與討論

預(yù)實(shí)驗(yàn)過程中，比較正、負(fù)離子模式下總離子圖時(shí)，發(fā)現(xiàn)水冬瓜根皮中化學(xué)成分在正、負(fù)離子模式下均有較好的響應(yīng)值，可能與Toricellia Angulata Oliv.var.intermedia (Harms) Hu所含化學(xué)成分類型豐富相關(guān)，化學(xué)成分種類推斷出結(jié)果表明其含有機(jī)酸類、生物堿類、氨基酸類、苯丙素類、酯類化、萜類、芳香含氧衍生物、酰胺及其他類化合物，研究結(jié)果證實(shí)了預(yù)實(shí)驗(yàn)水冬瓜根皮中化學(xué)成分在正、負(fù)離子模式下均有較好的響應(yīng)值的原因。

課題組建立了水冬瓜根皮甲醇提取物的HPLC-HESI-HRMS快速分析方法，結(jié)合Compound Discoverer 3.0數(shù)據(jù)庫(kù)及相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，初步推斷出出水冬瓜根皮甲醇提取物中36個(gè)化學(xué)成分，包括10個(gè)有機(jī)酸類化合物，4個(gè)生物堿類化合物，1個(gè)氨基酸類化合物，2個(gè)苯丙素類化合物，2個(gè)酯類化合物，2個(gè)萜類化合物，2個(gè)芳香含氧衍生物類化合物，4個(gè)酰胺類化合物，9個(gè)其他類化合物。

本試驗(yàn)采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)黔產(chǎn)水冬瓜根皮中化學(xué)成分進(jìn)行快速鑒別研究時(shí)，發(fā)現(xiàn)黔產(chǎn)水冬瓜根皮與文獻(xiàn)[7-10]湖北恩施自治州、云南麗江等大接骨丹藥材中成分呈現(xiàn)顯著性地域差異特征。Toricellia Angulata Oliv.var.intermedia (Harms) Hu化學(xué)成分的差異可能與植物生長(zhǎng)的地理位置、土壤、溫度、水分、海拔高度等密切相關(guān)，導(dǎo)致Toricellia Angulata Oliv.var.intermedia (Harms) Hu植物體二次代謝產(chǎn)物差異性較大，相關(guān)研究有待進(jìn)一步深入。

相關(guān)鏈接：腺苷，氨基酸，甲醇