近年來，我國城市化和老齡化進(jìn)程加快，同時(shí)伴隨著生活方式的改變，肥胖和超重人口數(shù)量增加，糖尿病的發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì)，沙格列汀作為一種高效的二肽基肽酶-4（DPP-4）競(jìng)爭性抑制劑，于2011年5月5日在中國獲得上市批準(zhǔn)（商品名，安立澤）用于治療2型糖尿病，通過阻止內(nèi)源性胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）的快速降解，延緩腸促胰島素的失活，促進(jìn)葡萄糖介導(dǎo)的胰島素釋放并減少餐后胰高血糖素釋放，以改善餐后β細(xì)胞對(duì)葡萄糖的反應(yīng)。

根據(jù)ICHQ3C（R7）殘留溶劑的指導(dǎo)原則，甲醇、乙腈、二氯甲烷屬于二類溶劑，異丙醇、乙酸乙酯屬于三類溶劑，本實(shí)驗(yàn)采取氣相色譜法對(duì)沙格列汀原料藥中的這5種溶劑的殘留量進(jìn)行測(cè)定，為本品的質(zhì)量研究和生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)支持，為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。

1儀器與試劑

1.1儀器

SHIMADZUGC-2010氣相色譜儀；氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）;DB-624毛細(xì)管色譜柱（30m*0.32mm1.8μm）。

1.2試劑

沙格列?。ê戏屎显此帢I(yè)有限公司，批號(hào)：SG-190801R1、SG-190901R1、SG-190902R1）;N-甲基吡咯烷酮（色譜純）；甲醇（色譜純）；乙腈（色譜純）；異丙醇（色譜純）；二氯甲烷（色譜純）；乙酸乙酯（色譜純）。

2方法與結(jié)果

2.1方法

2.1.1色譜條件

色譜柱：安捷倫DB-624毛細(xì)管色譜柱（30m*0.32mm1.8μm）；檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）；柱溫采取程序升溫，起始柱溫40℃，維持8分鐘，以每分鐘40℃速率升溫至200℃，維持13分鐘；進(jìn)樣口溫度：200℃；檢測(cè)器溫度：250℃；分流比：5︰1；柱流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：1.0μL；氮?dú)饬髁浚?0mL/min；氫氣流量：40mL/min；空氣流量：400mL/min。

2.1.2溶液的配制

空白溶液：以N-甲基吡咯烷酮作為空白溶液。

溶劑定位溶液：取甲醇對(duì)照品、異丙醇對(duì)照品、乙腈對(duì)照品、二氯甲烷對(duì)照品和乙酸乙酯對(duì)照品各10μL，分別置10mL量瓶中，用N-甲基吡咯烷酮溶解并稀釋至刻度，作為各溶劑定位溶液。

供試品溶液：取本品適量，精密稱定，加N-甲基吡咯烷酮溶解并定量稀釋制成每1mL中約含沙格列汀150mg的溶液，作為供試品溶液。

對(duì)照品溶液：取甲醇對(duì)照品、異丙醇對(duì)照品、乙腈對(duì)照品、二氯甲烷對(duì)照品、乙酸乙酯對(duì)照品適量，精密稱定，加N-甲基吡咯烷酮制成每1mL中約含甲醇450μg、異丙醇750μg、乙腈61.5μg、二氯甲烷90μg和乙酸乙酯750μg的溶液，作為對(duì)照品溶液

2.2驗(yàn)證結(jié)果

2.2.1專屬性

按“2.1.2”項(xiàng)下方法配制溶劑定位溶液、供試品溶液、混合對(duì)照溶液和空白溶液。按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖。試驗(yàn)結(jié)果表明，甲醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯間均能實(shí)現(xiàn)良好分離，分離度大于1.5，理論板數(shù)不低于5000，空白溶液不干擾測(cè)定，表明本方法專屬性良好。

2.2.2線性

精密稱取甲醇對(duì)照品451.3mg、異丙醇對(duì)照品749.0mg、乙腈對(duì)照品61.9mg、二氯甲烷對(duì)照品117.3mg和乙酸乙酯對(duì)照品751.2mg，置同一100mL量瓶中，用N-甲基吡咯烷酮稀釋至刻度，搖勻，得對(duì)照品母液，量取對(duì)照品母液按表1用N-甲基吡咯烷酮逐步稀釋成一系列濃度。精密量取1.0μl，注入氣相色譜儀，進(jìn)行檢測(cè)。線性結(jié)果見表2。

結(jié)果表明，甲醇，異丙醇，乙腈，二氯甲烷，乙酸乙酯在一定范圍內(nèi)，峰面積與濃度均成良好的線性關(guān)系。

2.2.3檢測(cè)限和定量限

分別稱取甲醇，異丙醇，乙腈，二氯甲烷，乙酸乙酯適量，精密稱定，加入N-甲基吡咯烷酮逐級(jí)稀釋成一系列濃度的溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖。取信噪比約為3作為檢測(cè)限溶液，取信噪比約為10作為定量限溶液，試驗(yàn)結(jié)果見表3。

2.2.4進(jìn)樣精密度

精密稱取各溶劑適量，配成各定量限濃度的混合溶液，精密量取1.0μL，注入氣相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。

試驗(yàn)結(jié)果表明，各溶劑在定量限濃度下重復(fù)進(jìn)樣檢測(cè)，峰面積RSD<10.0%，保留時(shí)間RSD≥1.0%，表明本方法進(jìn)樣精密度良好。

2.2.5準(zhǔn)確度

取“2.2.2”項(xiàng)下的對(duì)照品母液，量取對(duì)照品母液1.0mL，置1mL量瓶中，加N-甲基吡咯烷酮稀釋至刻度，搖勻，得對(duì)照品溶液。

精密稱取沙格列汀原料約1.5g,9份，分別置于10mL量瓶中，分別精密量取對(duì)照品母液0.5mL、1.0mL和1.5mL各3份，加N-甲基吡咯烷酮溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為50%、100%、150%限度濃度回收率供試液。按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算回收率。試驗(yàn)結(jié)果見表4。

結(jié)果表明，甲醇、異丙醇、乙腈、乙酸乙酯和二氯甲烷的回收率均在85%～110%,RSD均≤10%，本方法準(zhǔn)確度良好。

2.2.6樣品測(cè)定

照“2.1.2”項(xiàng)下方法配制對(duì)照品溶液和供試品溶液，取1.0μL注入氣相色譜儀，以峰面積按外標(biāo)法計(jì)算樣品中溶劑含量。結(jié)果見表5。

結(jié)果表明，3批樣品中殘留溶劑的含量均符合《中國藥典》2020年版四部規(guī)定。

3討論

對(duì)于殘留溶劑檢測(cè)通常用氣相色譜進(jìn)行檢測(cè)，其檢測(cè)方法的開發(fā)相對(duì)簡單，適用范圍廣。進(jìn)樣方式一般為頂空進(jìn)樣或直接進(jìn)樣，直接進(jìn)樣有很大的溶劑峰，氣相色譜一般會(huì)選用低沸點(diǎn)的溶劑，這樣就會(huì)對(duì)低沸點(diǎn)的殘留溶劑檢測(cè)造成很大的干擾，因此直接進(jìn)樣一般用于高沸點(diǎn)的溶劑檢測(cè)，頂空進(jìn)樣用于低沸點(diǎn)的溶劑檢測(cè)。色譜柱選擇毛細(xì)管色譜柱，因其分離效率高，色譜柱固定液的選擇根據(jù)“相似相溶”的原理，以待分析的溶劑極性選擇合適的色譜柱。

本實(shí)驗(yàn)采用直接進(jìn)樣法測(cè)定沙格列汀原料藥中5種殘留溶劑的含量，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，甲醇、異丙醇、乙腈、二氯乙烷、乙酸乙酯分離度良好，理論板數(shù)大于5000，空白溶液不干擾測(cè)定，系統(tǒng)適應(yīng)性良好。各溶劑線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，回收率均在85%～110%。本方法簡便，快速，準(zhǔn)確，適用于沙格列汀原料藥中殘留溶劑的測(cè)定。

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