利用蝙蝠蛾擬青霉進(jìn)行人工深層發(fā)酵培養(yǎng)所得的菌絲體產(chǎn)物是野生蟲(chóng)草的常用替代品。本文介紹了蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的研究概況，總結(jié)了其液體深層發(fā)酵的研究進(jìn)展、化學(xué)成分與藥理作用，闡述了研究前景，以期為蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的開(kāi)發(fā)利用提供參考。

冬蟲(chóng)夏草(Cordycepssinensis)是一種寄生于蝙蝠蛾幼蟲(chóng)的蟲(chóng)生真菌及其寄主蝙蝙蝠蛾幼蟲(chóng)尸體構(gòu)成的蟲(chóng)菌復(fù)合體，具有益腎補(bǔ)肺、祛痰止咳等功效，為珍貴的中藥材，藥用歷史悠久。冬蟲(chóng)夏草對(duì)咯血、癆嗽、虛喘精、腰膝酸軟、自汗盜汗等病癥均有療效。蝙蝠蛾擬青霉為叢梗孢科瓶梗青霉屬真菌，是從新鮮冬蟲(chóng)夏草的子座中分離獲得，并經(jīng)鑒定命名的一種蟲(chóng)草菌?，F(xiàn)代藥理學(xué)證明，發(fā)酵蟲(chóng)草菌絲體與冬蟲(chóng)夏草有效成分類(lèi)似，具有相似的藥理作用。因?yàn)榘l(fā)酵方法成本相對(duì)較低且條件易于控制，目前利用液體深層發(fā)酵方法進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)菌絲體，已成為解決當(dāng)前蟲(chóng)草資源匱乏的重要途徑之一。

1蝙蝠蛾擬青霉菌絲體研究概況

蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomyceshepiali)是從新鮮冬蟲(chóng)夏草中分離所得的隸屬叢梗孢科(Moniliaceae)瓶梗青霉屬(PaecilomycesBain)蟲(chóng)生真菌。1982年，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所的研究人員從青?；〔杉男迈r冬蟲(chóng)夏草中分離得到了Cs-4菌株，經(jīng)鑒定可知，該Cs-4菌株是蝙蝠蛾擬青霉。此外，1982年，中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所有關(guān)學(xué)者從云南迪慶采集的冬蟲(chóng)夏草樣品中分離獲得的菌株，經(jīng)培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)研究，可將其鑒定為蝙蝠蛾擬青霉。蝙蝠蛾擬青霉菌絲體是利用蝙蝠蛾擬青霉通過(guò)人工深層發(fā)酵培養(yǎng)所得，已作為冬蟲(chóng)夏草的代用品在中成藥和保健食品中廣泛使用。目前，市場(chǎng)上的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體產(chǎn)品主要為金水寶膠囊。

2蝙蝠蛾擬青霉菌絲體培養(yǎng)方法

當(dāng)前，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的培養(yǎng)已不僅僅停留在搖瓶和小罐發(fā)酵的試驗(yàn)水平上，許多菌絲體產(chǎn)品已經(jīng)步入工業(yè)化大生產(chǎn)。蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的液體深層發(fā)酵培養(yǎng)大多以葡萄糖或淀粉類(lèi)物質(zhì)為碳源，動(dòng)植物蛋白為氮源，并且工業(yè)化生產(chǎn)菌絲體的培養(yǎng)基中含有的天然成分足以滿(mǎn)足營(yíng)養(yǎng)需求，并不需要再增加氨基酸等。已有很多學(xué)者對(duì)蝙蝠蛾擬青霉菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)進(jìn)行研究。

尚靜德等用正交試驗(yàn)法選出了最佳發(fā)酵培養(yǎng)基，配方為2%葡萄糖、0.8%乳糖、1%氨基酸復(fù)合粉、0.1%硫酸鋅、0.1%硫酸鎂、0.1%磷酸二氫鉀、15%馬鈴薯。姜文俠等[7]以20m3發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，對(duì)發(fā)酵菌絲體主要成分進(jìn)行分析檢測(cè)可得，菌絲體收率為2.5%，腺苷含量為0.24%，甘露醇含量為8.3%。馮健等采用液體深層發(fā)酵法培養(yǎng)蝙蝠蛾擬青霉菌絲體，得到了最佳發(fā)酵條件，結(jié)果表明，以玉米漿、玉米粉為主要原料，添加硫酸鎂和磷酸氫二鉀為輔助原料，在搖瓶裝量10%、搖床轉(zhuǎn)速150r/min、培養(yǎng)溫度18～20℃、培養(yǎng)周期72h條件下，菌絲收率最高可達(dá)18.1g/L。

張倩等對(duì)蝙蝠蛾擬青霉菌絲體高產(chǎn)腺苷液體培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果表明，在搖瓶裝量100mL(250mL)、接種量5%、搖床轉(zhuǎn)速140r/min、溫度25℃、發(fā)酵周期6d的條件下，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體高產(chǎn)腺苷液體發(fā)酵培養(yǎng)基的最佳配方為2%葡萄糖、2%酵母浸出粉、0.05%硫酸鋅、0.05%硫酸錳，同時(shí)該培養(yǎng)基下培養(yǎng)出蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中腺苷含量較優(yōu)化前提高了390%，達(dá)到2.85mg/g。

鞏伯梁等采用響應(yīng)面法對(duì)蝙蝠蛾擬青霉菌絲體液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果表明，在含有8.25%馬鈴薯、1%蔗糖、0.81%蠶蛹粉、1%玉米粉、0.5%蛋白胨、0.1%磷酸二氫鉀、0.1%硫酸銨、0.1%硫酸鎂等的培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中腺苷含量可達(dá)3.44mg/g。殷海松等采用單因素試驗(yàn)法研究不同培養(yǎng)基成分對(duì)胞外多糖生產(chǎn)和蝙蝠蛾擬青霉菌絲體生物量的影響，結(jié)果表明，最優(yōu)蝙蝠蛾擬青霉菌絲體液體發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)基為土豆200g/L、葡萄糖30g/L、蛋白胨15g/L、MgSO4·7H2O1.5g/L、KH2PO43.0g/L；采用最優(yōu)發(fā)酵培養(yǎng)基，在搖瓶培養(yǎng)條件下，獲得的最大胞外多糖產(chǎn)量和最大菌絲體生物量分別較優(yōu)化前提高了48.1%、34.6%，含量分別為2.80、24.99g/L。

張命龍等通過(guò)液體搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)，以菌絲體生物量和腺苷含量為主要指標(biāo)，確定了搖瓶發(fā)酵高產(chǎn)菌絲體和腺苷的培養(yǎng)基配方，最佳配方為葡萄糖5g/L、玉米淀粉40g/L、玉米漿25g/L、磷酸二氫鉀1g/L、硫酸鋅1.5g/L、MgSO4·7H2O1g/L、VB125mg/L；適宜培養(yǎng)條件為搖瓶裝量150mL(500mL)、8%接種量、初始pH值6.0、轉(zhuǎn)速120r/min、溫度26℃、培養(yǎng)時(shí)間7d；在該發(fā)酵條件下，菌絲體生物量為25.2g/L，并對(duì)菌絲體中腺苷含量進(jìn)行高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)，腺苷含量達(dá)到2.76mg/g。

3蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的化學(xué)成分

蝙蝠蛾擬青霉菌絲體主要含有腺苷、蟲(chóng)草多糖、蟲(chóng)草素、甾醇類(lèi)物質(zhì)、氨基酸和多種無(wú)機(jī)元素等。許春燕等系統(tǒng)分析了蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體的主要營(yíng)養(yǎng)與活性成分，包括13種脂肪酸、18種必需氨基酸以及8種微量元素；此外，在蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體中還有較高含量的粗多糖、核苷、多酚(2.59mg/g)和三萜(4.89mg/g)等活性成分。洪志來(lái)等采用硅膠柱、凝膠柱、高效液相色譜等技術(shù)對(duì)用95%乙醇提取蝙蝠蛾擬青霉菌絲體進(jìn)行分離純化后得到了11個(gè)化合物，經(jīng)鑒定，分別為(22E,24R)-麥角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇、(22E,24R)-麥角甾-7,9,22-三烯-3β-醇、(22E,24R)-麥角甾-6β-甲氧基-7,22-二烯-3β,5α-二醇、環(huán)(亮-色)二肽、環(huán)(異亮-色)二肽、環(huán)(纈-色)二肽、胡蘿卜苷、4-(2-甲?；?5-羥甲基-1-氫-吡咯-1-基)丁酸、4-(2-甲?；?5-甲氧基甲基-1-氫-吡咯-1-基)丁酸、5-羥甲基糠酸和琥珀酸等，其中除了(22E,24R)-麥角甾-6β-甲氧基-7,22-二烯-3β,5α-二醇、環(huán)(亮-色)二肽、5-羥甲基糠酸和琥珀酸以外，其他均為首次從擬青霉屬真菌中分離得到。

樊曉飛等用梯度提取、反復(fù)重結(jié)晶分離和純化，共分離得到7個(gè)化合物，并且采用NMR等譜學(xué)方法進(jìn)行了化學(xué)成分的分析，分別檢測(cè)出麥角甾醇、β-谷甾醇、4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮-麥角甾烷、啤酒甾醇、麥角甾醇過(guò)氧化物、甘露醇和1-油?；?2-亞油酸-3-棕櫚酸甘油等化合物。采用GC-MS進(jìn)一步分析石油醚提取物中的油狀組分，經(jīng)分析鑒定主要為亞油酸和反油酸。于洪飛以腺苷和D-甘露醇為評(píng)價(jià)指標(biāo)，并優(yōu)化復(fù)合酶法提取工藝對(duì)蝙蝠蛾擬青霉菌絲體進(jìn)行提取，使甘露醇和腺苷的含量分別占提取物的12.56%和2065μg/g。仲偉鑒等比較了蝙蝠蛾擬青霉菌絲體與天然蟲(chóng)草中的無(wú)機(jī)元素含量，共檢測(cè)出28種無(wú)機(jī)元素，其中鈣、鉀、鎂、鋅、鎳、硼和鍶等7種元素在蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中的含量高于天然蟲(chóng)草，其他組分含量的分布趨勢(shì)與天然蟲(chóng)草基本一致。

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