刺梧桐膠（Karayagum，Sterculiagum）是來源于梧桐科（Sterculiaceae）、蘋婆屬（Sterculia）高大的刺蘋婆樹以及其他蘋婆屬樹種的樹干分泌物，同時(shí)在胭脂樹科（bixacene）的cochlospermumgessypiuma.PDe及其他cochlospemum屬的樹干中也可以提取到刺梧桐膠。刺梧桐膠主要分布于非洲的蘇丹、印度、巴基斯坦，在緬甸和我國(guó)云南也有大量采膠樹種分布。刺梧桐膠屬于部分乙?；娜醵嗵?，具有復(fù)雜的多支鏈結(jié)構(gòu)，相對(duì)分子質(zhì)量高達(dá)900萬以上，經(jīng)水解產(chǎn)生半乳糖，鼠李糖和半乳糖醛酸以及少量的葡萄糖醛酸。全世界超過90%的刺梧桐膠都應(yīng)用于制藥工業(yè)，利用其吸水溶脹性和黏性以及一定的腹瀉治療作用，主要用作緩釋控釋胃腸道給藥載體。刺梧桐膠也用作食品增稠劑。研究發(fā)現(xiàn)增稠劑的適量應(yīng)用可以顯著提高熱風(fēng)干燥方便面的吸水率、蒸煮損失、硬度、膠著性、咀嚼性等綜合品質(zhì)。也有研究表明，使用刺梧桐膠粉包扎傷口，增加了正常肉芽組織，也使表皮生長(zhǎng)良好。

本研究以緬甸刺梧桐膠樣品為試材（市面上以商品名“雪燕”進(jìn)行銷售），通過探討超聲堿提法優(yōu)化刺梧桐膠多糖的提取工藝，為刺梧桐膠多糖的進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

一、材料與方法

1、材料與儀器

實(shí)驗(yàn)所用刺梧桐膠購(gòu)自緬甸曼德勒，經(jīng)云南中醫(yī)藥大學(xué)趙榮華教授鑒定為梧桐科蘋婆屬植物刺蘋婆樹干分泌物。

葡萄糖（分析純）購(gòu)于北京索萊寶科技有限公司；三氯甲烷、正丁醇、濃硫酸、苯酚、氫氧化鈉均為國(guó)產(chǎn)分析純；乙醇（95%）購(gòu)于昆明灌澈試劑有限公司；實(shí)驗(yàn)用水為純凈水和超純水。

SK7210HP超聲清洗器：上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司；bioMate3S紫外分光光度儀：美國(guó)thermoFisher公司；Dl-5-b離心機(jī)：深圳安科高技術(shù)股份有限公司：SaGa-10tF超純水機(jī)：南京易普易達(dá)科技發(fā)展有限公司。

2、方法

（1）單因素試驗(yàn)

①naoH濃度對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響

刺梧桐膠粉末中分別加入液料比為100:1（ml:g）的0.02moll、0.04mol/l、0.06mol/l、0.08mol/l、0.1moll的naoH溶液，超聲提取1.5h，考察naoH濃度對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響。

②超聲時(shí)間對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響

刺梧桐膠粉末中分別加入液料比為100:1（ml:g）的0.06mol/l的naoH溶液，分別超聲提取0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h，考察提取時(shí)間對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響。

③料液比對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響

刺梧桐膠粉末中加入40:1（ml:g）、60:1（ml:g）、80:1（ml:g）、100:1（ml:g）、120:1（ml:g）的0.06mol/lnaoH溶液,超聲提取1.5h，考察液料比對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響。

（2）響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，以刺梧桐膠多糖得率為響應(yīng)值,選響應(yīng)面box一benhnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)超聲提取刺梧桐膠中多糖的工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。

（3）刺梧桐膠多糖的制備

對(duì)超聲提取的刺梧桐膠多糖進(jìn)行中和，濃縮處理,然后加入95%乙醇醇沉過夜，離心分離干燥后得刺梧桐膠多糖（即刺梧桐膠多糖a）。

將刺梧桐膠多糖a采用Sevag法脫蛋白。最后得到的多糖液加入乙醇進(jìn)行醇沉，重復(fù)3次以除去Sevag試劑,最后得到脫脂脫蛋白的刺梧桐膠多糖（即刺梧桐膠多糖b）。

（4）多糖得率的測(cè)定

①標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

將無水葡萄糖置于105℃烘箱中恒重，精密稱定無水葡萄糖對(duì)照品10mg，置100ml容量瓶中，用超純水溶解并加至刻度，搖勻，即得。采用苯酚–硫酸顯色法，精密量取對(duì)照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分別置15ml具塞刻度試管中，各加水至2.0ml，搖勻，加入5%苯酚溶液1ml（臨用配制），搖勻。再加人濃硫酸5ml，混勻，冷卻，放入40℃水浴中加熱15min，取出，冷卻。以超純水為空白，使用酶標(biāo)儀在488nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，得到方程y=2.1858x+0.1294，r2=0.999。

②樣品測(cè)定

精密稱取響應(yīng)面法所得的干燥刺梧桐膠多糖b粉末各10mg，加超純水溶解并定容至100ml容量瓶中，搖勻。各量取3份1.0ml供試品溶液分別置15ml具塞干燥試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制項(xiàng)下的方法，自“加水至2.0ml”起，依法測(cè)定吸光度。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程計(jì)算刺梧桐膠多糖的得率。

3、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

響應(yīng)面box-benhnken試驗(yàn)采用Design一expertV8.0.6.1軟件進(jìn)行設(shè)計(jì)與分析。

二、結(jié)果與分析

1、單因素考察

（1）naoH濃度對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響

naoH濃度對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響見圖1。隨著naoH濃度的增加，多糖的得率先升高后降低，當(dāng)naoH濃度達(dá)到0.06mol/l時(shí)，多糖得率達(dá)到最大。這可能是由于適宜的naoH濃度可以增加刺梧桐膠多糖的溶出率，而當(dāng)naoH濃度過大時(shí)，可能會(huì)破壞多糖結(jié)構(gòu)。因此，naoH濃度選擇0.06mol/l。

（2）超聲時(shí)間對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響

超聲時(shí)間對(duì)刺梧桐膠多糖得率的影響見圖2。隨著超聲時(shí)間的增加，多糖的得率先升高后降低，當(dāng)超聲時(shí)間達(dá)1.5h時(shí)，多糖得率達(dá)到最大。這可能是由于超聲能加快多糖溶出，但長(zhǎng)時(shí)間的超聲可能會(huì)破壞多糖結(jié)構(gòu)。因此,超聲時(shí)間選擇1.5h。

聲明：本文所用圖片、文字來源《中國(guó)食品添加劑》，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)與本網(wǎng)聯(lián)系

相關(guān)鏈接：葡萄糖，三氯甲烷，濃硫酸，氫氧化鈉