著色劑主要分為食用著色劑和工業(yè)染料，由于工業(yè)染料等非食用著色劑價(jià)格低廉，著色力強(qiáng)，被越來(lái)越多的生產(chǎn)商用于食品生產(chǎn)中。為了更好的發(fā)現(xiàn)食品安全問(wèn)題，研究合理有效的著色劑的檢測(cè)方法至關(guān)重要，文中列出現(xiàn)有的著色劑的檢測(cè)方法之間不同的特點(diǎn)，并對(duì)著色劑檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展進(jìn)行了展望。

著色劑主要分為食用著色劑和工業(yè)染料，其中食用著色劑分為天然色素和人工合成著色劑。近年來(lái)，不法商販為了降低成本，增加收入，但又考慮到顏色對(duì)于人類(lèi)視覺(jué)的沖擊效應(yīng)，違法使用工業(yè)染料等非食品添加劑添加到食品生產(chǎn)中，來(lái)增加食品的色澤，著色劑導(dǎo)致的食品安全事件頻發(fā)，造成了消費(fèi)者的恐慌。例如：染色五香花生米，染色鄉(xiāng)巴佬等鹵蛋制品，蘇丹紅的紅心鴨蛋等事件。為了更好更快的發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，對(duì)于食用色素的檢驗(yàn)方法的研究也越來(lái)越多。

１色素的檢驗(yàn)方法

目前，用于食品添加劑色素的檢驗(yàn)方法有：高效液相色譜法、分光光度法、示波極譜法、薄層色譜法、色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法、毛細(xì)管電泳法等。

1.1高效液相色譜法

高效液相色譜法是GB5009.35-2016中規(guī)定使用的食品中合成著色劑的檢驗(yàn)方法，該方法適用于飲料、硬糖、配制酒、蜜餞中合成著色劑的測(cè)定，是目前使用最廣、研究最多的方法。該方法的主要原理是：待測(cè)定的樣品通過(guò)液－液萃取法或聚酰胺吸附法提取分離出其中的著色劑，采用高效液相色譜法，經(jīng)過(guò)反相色譜分離，根據(jù)色素的保留時(shí)間與峰面積大小來(lái)進(jìn)行定性和定量。該方法的靈敏度高，操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確度高，被一直沿用下來(lái)，成為GB5009.35-2016中唯一指定的食品中合成著色劑的檢測(cè)方法。

蔣榮華等人采用乙醇－氨溶液提取，乙腈－乙酸銨為流動(dòng)相，高效液相色譜分離，二極管陣列檢測(cè)器可變波長(zhǎng)程序，快速測(cè)定肉制品中檸檬黃、日落黃等６種人工合成色素。試驗(yàn)結(jié)果：該方法檢測(cè)６種色素相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于5%，方法操作簡(jiǎn)單，靈敏度高。

孫鵬等人通過(guò)液－液萃取法提取分離，高效液相色譜法測(cè)定液態(tài)奶中胭脂紅、日落黃２種著色劑。文中對(duì)萃取劑的種類(lèi)、體積、ｐＨ值等條件的影響進(jìn)行了研究，確定了最優(yōu)的萃取條件。結(jié)果表明，該方法的線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)在0.999左右，且方法簡(jiǎn)單、高效，達(dá)到了試驗(yàn)預(yù)期的效果。

Waleskade等人采用梯度洗脫技術(shù)分離樣品，高效液相色譜法檢測(cè)酸奶和奶味飲品中合成染料的含量。該方法的線(xiàn)性范圍在0.5~25mg/L，線(xiàn)性關(guān)系良好，回收率為８2%~115%。檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)大多數(shù)樣品中含有偶氮玉紅，其次是莧菜紅。

Karanikolopoulos等人采用RP-HPLC/DAD測(cè)定水產(chǎn)品中人工色素的含量，該方法簡(jiǎn)單便捷，回收率大于81%，在低濃度下，精確度較高，為復(fù)雜基質(zhì)食品中合成水溶性色素提供了技術(shù)支持。

Chai等人采用固相萃取法提取，高效液相色譜法檢測(cè)飲料中胭脂紅、莧菜紅、日落黃和誘惑紅四種色素含量，對(duì)試樣溶液ｐＨ值、吸附劑用量、萃取時(shí)間等前處理?xiàng)l件進(jìn)行了優(yōu)化；檢驗(yàn)結(jié)果：四種色素檢出限為0.20~0.25μg/L，莧菜紅和胭脂紅線(xiàn)性范圍為1~500μg/L，日落黃和誘惑紅線(xiàn)性范圍為0.80~500μg/L，結(jié)果表明，該方法簡(jiǎn)單靈敏，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。

1.2分光光度法

分光光度法是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在分光光度計(jì)中不同波長(zhǎng)下的不同吸光度，測(cè)定物質(zhì)的含量方法。分光光度計(jì)一般分為三個(gè)光區(qū)：紫外光區(qū)、可見(jiàn)光光區(qū)和紅外光區(qū)。該方法操作簡(jiǎn)單。

鄧平建研究了用乙醇適當(dāng)處理樣品后，用雙波長(zhǎng)法直接測(cè)定兩種顏色相近的色素共存的混合樣品，該方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便，達(dá)到了預(yù)期的試驗(yàn)效果。

廖萍堅(jiān)等人利用波長(zhǎng)的選擇優(yōu)化測(cè)定硬質(zhì)糖果中三種色素的含量。結(jié)果顯示，三種色素在特定濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)均在0.999以上。該方法操作方便、準(zhǔn)確性較高。

Capitán-Vallvey等人建立了同時(shí)測(cè)定食品中檸檬黃、日落黃和胭脂紅三種色素的分光光度法。樣品經(jīng)過(guò)前處理，在波長(zhǎng)為400~800nm條件下，線(xiàn)性范圍為50.0~650.0ng/mL，相關(guān)系數(shù)良好，將該方法與高效液相色譜法比較，檢驗(yàn)結(jié)果在誤差范圍之內(nèi)。

1.3薄層色譜法

薄層色譜，也叫薄層層析，是GB/T5009.35-2003《食品中合成著色劑的測(cè)定》中指定的食品中合成著色劑的檢測(cè)方法之一。該方法是利用物質(zhì)與物質(zhì)之間吸附力的不同，被測(cè)樣品與固定相發(fā)生反復(fù)的吸附與解吸附，從而使樣品達(dá)到分離，形成一系列的斑點(diǎn)進(jìn)而進(jìn)行定性和定量分析。薄層色譜法可以分為薄層吸附層析法、薄層凝膠層析法、薄層離子交換層析法、薄層分配層析法等。一般實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常用的是薄層吸附層析法。

張?zhí)m天等人采用高效薄層色譜技術(shù)，對(duì)簡(jiǎn)單處理后的飲料樣品快速進(jìn)行分離、定性和定量。該方法快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高，可以滿(mǎn)足大批量的飲料產(chǎn)品的２６種人工色素的定性定量分析。

劉聃等人通過(guò)對(duì)提取劑的選擇和提取時(shí)間等菠菜中色素提取分離達(dá)不到理論效果的影響因素進(jìn)行了分析，優(yōu)化了檢驗(yàn)條件，確定了對(duì)于菠菜葉中色素提取分離較好的試驗(yàn)條件。

徐剛等人通過(guò)試驗(yàn)，找到了薄層色譜快速定性篩查藥品中非法添加的６種水溶性色素和５種脂溶性色素的優(yōu)化方法，該方法對(duì)兩類(lèi)色素的分離都達(dá)到了預(yù)期的效果，得到了較低的檢出限。

1.4色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法

色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法是將兩種儀器結(jié)合，利用色譜的分離能力與質(zhì)譜的定性功能，達(dá)到對(duì)未知物質(zhì)的定性與定量分析，可以更好的確定樣品中潛在的危險(xiǎn)和影響。色譜－質(zhì)譜聯(lián)用包括氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用和液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用。氣質(zhì)聯(lián)用儀主要用于小分子、易揮發(fā)的化合物，液質(zhì)聯(lián)用儀與氣質(zhì)聯(lián)用儀互補(bǔ)，主要用于不易揮發(fā)、熱不穩(wěn)定和大分子量等的化合物。色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法具有性能高、檢測(cè)限低、方便快速等優(yōu)點(diǎn)。

Martin等人采用液－液萃取法提取，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)糖果、冰淇淋、巧克力等食品中的檸檬黃、喹啉黃、赤蘚紅等18種水溶性色素，該方法回收率在83.4%~166.0%之間，滿(mǎn)足復(fù)雜基質(zhì)的食品檢測(cè)，為今后的糖果、冰淇淋等食品中合成色素的檢測(cè)提供了技術(shù)參考。

針對(duì)食用色素容易受到熱、光等環(huán)境的影響，為了克服這些缺點(diǎn)，人們會(huì)向天然色素中添加不可用于食品生產(chǎn)的染料活性紅195這一問(wèn)題，Judith等人研究并建立了快速的篩查方法，可以明確識(shí)別目標(biāo)物及其衍生物，為食品摻假鑒別提供了新的方向。

黃方取等人將葡萄酒樣品稀釋高速離心后過(guò)膜進(jìn)樣，在特定的參數(shù)下淋洗、分離、離子化，定性和定量分析。建立了葡萄酒中常見(jiàn)的７種人工合成色素的簡(jiǎn)單樣品前處理、高靈敏度的定性定量分析檢驗(yàn)方法，滿(mǎn)足了市場(chǎng)對(duì)于快、準(zhǔn)、精等食品檢測(cè)要求，為食品中葡萄酒檢測(cè)技術(shù)提供了新的可行方法。

張杉在對(duì)豆制品中７種違禁色素的檢測(cè)方法研究中發(fā)現(xiàn)，采用甲醇－甲酸水為流動(dòng)相，梯度淋洗，正離子掃描模式，得到的方法線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)均在0.999以上，加標(biāo)回收率在80%以上，該方法前處理簡(jiǎn)單，滿(mǎn)足同時(shí)測(cè)定豆制品中７種違禁色素的試驗(yàn)要求。

1.5示波極譜法

示波極譜法又可稱(chēng)為單掃描極譜分析法，它是一種快速加入電解電壓的極譜法。采用滴汞電極，在電解過(guò)程中，加入鋸齒形脈沖電壓，得到在示波管組成的熒光屏上顯示的極譜圖，因此被稱(chēng)為示波極譜法。該方法靈敏度高。

宋新等人研究中，運(yùn)用示波極譜法測(cè)定食品中檸檬黃、日落黃、胭脂紅、莧菜紅和亮藍(lán)５種合成著色劑。經(jīng)過(guò)試驗(yàn)論證顯示采用示波極譜法測(cè)定食品中的合成著色劑靈敏度高、操作簡(jiǎn)單，適合在基層工作中應(yīng)用。

文君等人采用示波極譜法檢測(cè)食品中的合成著色劑赤蘚紅。赤蘚紅在特定條件下的精密度和準(zhǔn)確度符合定量分析的要求。

1.6其他檢測(cè)方法

除了上述方法之外，還有毛細(xì)管電泳法、試劑盒法等。

毛細(xì)管電泳法是依據(jù)各組分之間在電場(chǎng)驅(qū)動(dòng)力下的差異，通過(guò)毛細(xì)管通道，進(jìn)而對(duì)樣品中各組分進(jìn)行分離的技術(shù)。陳林情等人采用毛細(xì)管電泳法，優(yōu)化試驗(yàn)條件，得到了檢測(cè)飲料中３種合成著色劑的檢測(cè)方法，該方法可以快速分離目標(biāo)色素，且回收率在９７％以上，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

試劑盒法是一種快速簡(jiǎn)便，適合現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)或?qū)悠返暮?jiǎn)單初篩的檢驗(yàn)方法。龍朝陽(yáng)等人用試劑盒法和液相色譜法，對(duì)飲料等多種食品樣品進(jìn)行了常見(jiàn)的檸檬黃等４紅合成著色劑的檢測(cè)，通過(guò)檢驗(yàn)結(jié)果的比對(duì)分析發(fā)現(xiàn)，試劑盒法數(shù)據(jù)與液相色譜法數(shù)值吻合，而且較液相色譜法方便、快速。

２展望

在眾多食品安全問(wèn)題中，禁限用著色劑超范圍和超限量使用的問(wèn)題不容小覷。著色劑作為一類(lèi)食品加工生產(chǎn)中重要的食品添加劑，被廣泛的應(yīng)用于天然色素在食品加工和貯存運(yùn)輸過(guò)程中損失的食品的增色中，為該類(lèi)食品提供鮮艷、持久、穩(wěn)定的色澤。然而，一些著色劑可能危害人體健康，在過(guò)去的數(shù)年中，通過(guò)法律法規(guī)，安全標(biāo)準(zhǔn)等的建立，世界多個(gè)國(guó)家嚴(yán)格控制食品中合成著色劑的使用，嚴(yán)令禁止有毒的合成著色劑在食品生產(chǎn)中應(yīng)用。但是，現(xiàn)階段，著色劑檢測(cè)技術(shù)相對(duì)成熟，但存在檢測(cè)范圍小，對(duì)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中沒(méi)有規(guī)定的藥物無(wú)法進(jìn)行篩查；實(shí)驗(yàn)過(guò)程較復(fù)雜，對(duì)于不同種樣品的不同種藥物的檢測(cè)需要反復(fù)進(jìn)行前處理和進(jìn)樣檢測(cè)；不能進(jìn)行快速檢測(cè)，時(shí)效性差等缺點(diǎn)。因此，為保證食品安全，需要繼續(xù)研究建立準(zhǔn)確可靠的著色劑的測(cè)定方法。

聲明：本文所用圖片、文字來(lái)源《河北省科學(xué)院學(xué)報(bào)》2019年3月，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)與本網(wǎng)聯(lián)系

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