②料液比對(duì)苦養(yǎng)蛋白和黃酮類(lèi)化合物超聲同步提取的影響

隨著液料比的增大，苦養(yǎng)蛋白和黃酮類(lèi)化合物得率也隨之增大。當(dāng)液料比達(dá)到30∶mL/g時(shí)，苦蕎蛋白得率達(dá)到最大值為8.04％，黃酮類(lèi)化合物得率為1.18％。隨著液料比的繼續(xù)增加，黃酮得率逐漸增大且趨勢(shì)平緩，而苦蕎蛋白得率逐漸減小。由于液料比過(guò)大使提取液濃度過(guò)低，在酸沉過(guò)程中溶液中的蛋白和黃酮類(lèi)化合物易流失在上清液中，甚至導(dǎo)致酸不沉析的現(xiàn)象產(chǎn)生。從耗能等綜合角度考慮，液料比以30∶mL/g為宜。

③pH對(duì)苦養(yǎng)蛋白和黃酮類(lèi)化合物超聲同步提取的影響

在堿性條件下超聲同步提取苦蕎蛋白和黃酮類(lèi)物質(zhì)，隨著pH的增大二者的得率也隨之增大，說(shuō)明堿性條件有利于苦養(yǎng)蛋白和黃酮類(lèi)物質(zhì)的溶出。當(dāng)pH為9時(shí)，蛋白得率達(dá)到最大值7.89％，黃酮得率最大值1.12％。但隨著pH的繼續(xù)增大兩者的得率均呈下降趨勢(shì)。這是因?yàn)榭嗍w蛋白在強(qiáng)堿環(huán)境下會(huì)產(chǎn)生水解、脫氨以及脫羧等反應(yīng)，影響理化性質(zhì)，破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致蛋白質(zhì)強(qiáng)烈變性。pH過(guò)高也會(huì)影響產(chǎn)品色澤以及出現(xiàn)其他副作用，在酸沉過(guò)程中也會(huì)使溶液中鹽分增加，發(fā)生鹽溶現(xiàn)象?？紤]到生產(chǎn)成本以及環(huán)保等因素，選用pH為9的溶液進(jìn)行苦蕎蛋白和黃酮類(lèi)物質(zhì)的最佳提取條件。

④時(shí)間對(duì)苦蕎蛋白和黃酮類(lèi)化合物超聲輔助同步提取的影響

隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)，苦蕎中蛋白和黃酮類(lèi)物質(zhì)的得率隨之增加。表明在一定的時(shí)間范圍內(nèi)，超聲作用可使細(xì)胞破裂進(jìn)而促進(jìn)蛋白的釋放，進(jìn)而增加蛋白得率。當(dāng)超聲時(shí)間達(dá)到40min時(shí)苦蕎蛋白的得率達(dá)到最大值，隨后呈下降趨勢(shì)，因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間的高溫及強(qiáng)堿作用會(huì)使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞，溶解度降低。黃酮類(lèi)物質(zhì)得率一直為增長(zhǎng)趨勢(shì)，時(shí)間達(dá)到60min后增長(zhǎng)趨勢(shì)緩慢，但時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致雜質(zhì)的溶出。故選擇40min為最佳提取條件。

⑤溫度對(duì)苦蕎蛋白和黃酮類(lèi)化合物超聲輔助同步提取的影響

當(dāng)超聲溫度達(dá)到65℃時(shí)，苦蕎蛋白和黃酮類(lèi)化合物得率均達(dá)到最大值，分別為7.97％和1.19％。隨著溫度繼續(xù)升高，會(huì)使蛋白結(jié)構(gòu)破壞甚至變性，雖然溫度的升高促使分子解吸，加快擴(kuò)散速度，從而提高黃酮得率，但過(guò)高的溫度容易使黃酮被氧化，也會(huì)導(dǎo)致黃酮類(lèi)化合物的某些部位位置發(fā)生變化，母核被破壞，使其得率呈下降趨勢(shì)。因此提取溫度為65℃最為適宜。

（2）響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)

以Box—Benhnken的中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理為依據(jù)，根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，選擇粒度（A）、pH（B）、溫度（C）進(jìn)行三因素三水平響應(yīng)面設(shè)計(jì)同步提取苦蕎中蕎麥蛋白和黃酮類(lèi)物質(zhì)。因素編碼水平表見(jiàn)表2，試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表3。

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