2前處理技術(shù)

食品基體中分析痕量OPEs時，脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、色素、糖類、脂肪酸等共提取基質(zhì)成分會引起干擾。因此選擇合適的前處理技術(shù)，有效去除食品基質(zhì)中的雜質(zhì)，并提取多組分OPEs十分重要。

OPEs樣品前處理通常由提取和凈化兩個部分組成，常見的提取、凈化方法包括加速溶劑萃取(ASE)、基質(zhì)固相分散萃取(MSPD)、MAE、超聲輔助萃取(UAE)、QuEChERS、SPE、凝膠固相萃取(GPC)、分散固相萃取(d-SPE)等方法均有應(yīng)用。表2中總結(jié)了食品基質(zhì)中OPEs的前處理方法。

2.1食品樣品中OPEs的提取技術(shù)

2.1.1加速溶劑萃取

ASE(也被稱為加壓液相萃取PLE)是通過在高溫高壓條件下提高樣品溶解能力，使分析物高效率擴散達到提取目的，從而節(jié)約提取時間、減少溶劑損耗。ASE技術(shù)在提取食品、生物樣品中OPEs時，脂質(zhì)也作為共提取物被提取，因此對提取液的凈化提出更高要求。Gao等采用ASE技術(shù)，使用10%乙腈水溶液作為提取劑，在150℃下，對1g魚肉樣品提取5min，提取液經(jīng)酸化硅膠吸附脂質(zhì)后，采用固相微萃取(SPME)進一步凈化。在優(yōu)化條件下，7種OPEs在0.900~5000ng/g范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)達到0.9900~0.9992(RSD<9.0%)，檢出限為0.010~0.208ng/g，回收率為80%~107%。Brandsma等在70℃、1500Pa條件下，以二氯甲烷-丙酮(1∶1，v/v)作提取劑，ASE方法循環(huán)提取3次，結(jié)合氨基固相萃取小柱凈化，利用HPLC-MS/MS分析測定水生生物中10種OPEs，檢出限為0.200~29.000ng/g，回收率為74%~128%。

2.1.2微波輔助萃取

MAE技術(shù)是利用微波加熱以及可控的壓力和溫度條件來加速溶劑對固體樣品中目標(biāo)物的萃取過程。微波對介電性質(zhì)不同的物料呈現(xiàn)出選擇性加熱特點，溶質(zhì)和溶劑的極性越大，對微波能的吸收越大，升溫越快，萃取越迅速。作為一種高效、簡便和快速的提取技術(shù)，MAE已廣泛用于蔬菜、谷物、肉類等多種食品基質(zhì)中。借鑒García-López等從灰塵和淤泥中提取OPEs的方法，Ma等選用MAE提取結(jié)合GC-MS方法對魚類和家禽類生物樣品中14種OPEs進行提取和測定。比較了丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸乙酯-二氯甲烷(1∶1，v/v)、乙酸乙酯-丙酮(1∶1，v/v)以及正己烷-丙酮(1∶1，v/v)6種提取溶劑，并對提取溶劑體積、提取溫度和時間進行了考察，結(jié)果表明10mL正己烷-丙酮(1∶1，v/v)在130℃下提取20min效果最佳。Zhang等同樣選用正己烷-丙酮(1∶1，v/v)作提取溶劑，在130℃下對大米中OPEs提取20min，方法的回收率為84%~110%。

MAE和ASE均是通過控制壓力以及溫度條件，減少溶劑消耗并加快提取速率，主要區(qū)別是加熱方式不同，但兩種提取方式回收率基本相似。此外，MAE常使用極性溶劑為提取溶劑，最大限度吸收微波能，達到萃取目的，有時為了提取非極性目標(biāo)物，也可加入非極性溶劑。

2.1.3基質(zhì)固相分散萃取

MSPD集提取和凈化于一體，樣品與吸附材料研磨，通過剪切力分散樣品，增大萃取樣品的表面積，OPEs會根據(jù)各自的極性分布在有機物的表面。Campone等采用MSPD方法，對鱈魚和三文魚中13種OPEs進行測定。通過條件優(yōu)化，將0.5g樣品與2g弗羅里硅土(Florisil)和1g無水硫酸鈉在研缽中分散，然后轉(zhuǎn)入1g氧化鋁的固相萃取柱中。使用5mL正己烷-二氯甲烷(1∶1，v/v)除去脂質(zhì)，并用10mL正己烷-丙酮(6∶4，v/v)洗脫分析物，方法回收率為70%~110%，RSD<9%。Castro等基于MSPD結(jié)合LC-MS/MS同時分析測定貽貝樣品中18種OPEs。通過條件優(yōu)化，最終選取Florisil和乙腈分別作為吸附劑和洗脫溶劑，有效降低了脂質(zhì)干擾。該方法回收率為69%~122%，檢出限為0.060~5.000ng/g，定量限為0.190~17.000ng/g，RSD<24%。

由于MSPD提取條件比較溫和，因此共提取物干擾少;通過選擇合適的分散劑、吸附劑以及洗脫溶劑，可極大提高OPEs的萃取效率。此外，與傳統(tǒng)的提取方法相比，MSPD減少了溶劑消耗，并且成本較低。

2.1.4超聲輔助萃取

UAE基于一種綠色提取技術(shù)，廣泛應(yīng)用于提取基體成分復(fù)雜的食品和環(huán)境樣品，該技術(shù)提取率與傳統(tǒng)的提取技術(shù)(例如:索氏提取(SE))相當(dāng)。Santín等采用丙酮-正己烷(1∶1，v/v)作提取溶劑，考察了振蕩、ASE、UAE3種方法提取魚肉中16種OPEs。結(jié)果表明，振蕩萃取時間較長，ASE萃取脂質(zhì)含量較高。最終選取0.25g魚樣加入15mL萃取劑超聲輔助萃取15min，重復(fù)萃取兩次，結(jié)合SPE和d-SPE凈化后，進行LC-MS/MS分析測定，RSD<10%。Aznar-Alemany等將UAE與液液萃取(LLE)結(jié)合使用，分析了貽貝樣品中7種OPEs，方法的最低檢出限和定量限分別為0.190ng/g和1.030ng/g。Wang和Kannan等使用0.5%甲酸乙腈溶液作提取劑，結(jié)合d-SPE技術(shù)凈化和HPLC-MS/MS檢測，對多種復(fù)雜食品基質(zhì)中OPEs進行分析，方法檢出限為0.010~0.170ng/g，其中TnBP、TBOEP、TCIPP在食品中含量相對較高。Guo等通過奶粉中9種OPEs的分析研究表明多次循環(huán)萃取可以提高萃取效率，并且準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性較好，基質(zhì)效應(yīng)顯著降低。

為了最大限度地提高提取率，需對UAE提取條件進行優(yōu)化，例如溶劑類型、超聲處理的溫度和時間、樣品粒度、固/液比例等。雖然升高溫度會通過降低溶劑黏度來增加溶劑向基質(zhì)中的滲透，但是干擾化合物的共提取也會增加，同時OPEs可能會發(fā)生降解現(xiàn)象。

2.1.5QuEChERS方法QuEChERS方法

近年來廣泛應(yīng)用于食品中痕量有機物的檢測，該方法主要通過有機溶劑提取、分散固相萃取凈化兩部分組成，有機溶劑一般為甲醇、乙腈、正己烷等常用提取試劑或其組合，分散固相萃取常選用N-丙基乙二胺(PSA)、十八烷基(C18)、石墨化炭黑(GCB)、氧化鋁(Al2O3)、基于氧化鋯的Z-Sep和Z-Sep+等吸附劑。Guo等對奶粉中OPEs進行提取分析，選用無水MgSO4和無水醋酸鈉(CH3COONa)進行鹽析，比較了乙腈、0.5%的甲酸乙腈溶液、乙腈-甲醇(3∶1，v/v)、0.5%甲酸乙腈-甲醇(3∶1，v/v)、乙腈-甲苯(3∶1，v/v)5種提取溶液，以及PSA、GCB、C183種吸附劑的含量。結(jié)果表明，選用0.5%甲酸乙腈提取溶劑、100mgPSA吸附劑時，提取效率最佳，檢出限可達0.100~0.250ng/g，定量限為0.500~1.500ng/g，回收率為74%~102%。Poma等以乙腈作提取溶劑，MgSO4進行鹽析，Z-Sep作吸附劑，結(jié)合FlorisilSPE柱進行凈化，采用GC-EI-MS方法對瑞典市場中12類53種食品中的8種OPEs進行測定，方法檢出限為0.050~3.000ng/g，回收率為53%~71%。丁錦建等基于QuEChERS方法建立了快速分析多種食品中10種OPEs。該方法以0.1%甲酸乙腈溶液為提取劑，PSA和C18為吸附去除基質(zhì)干擾，采用同位素稀釋質(zhì)譜法進行分析定量，定量限為0.050~0.420ng/g，回收率為73%~106%。

近年來，QuEChERS與UAE結(jié)合提取食品基質(zhì)中OPEs，避免了有機溶劑的浪費，還常結(jié)合SPE方法去除食品基質(zhì)中的脂質(zhì)等干擾。Xu等將QuEChERS法與UAE結(jié)合，選用5mL乙腈-甲苯(9∶1，v/v)作提取溶劑，C18和Z-Sep混合吸附劑，提取多種食品基質(zhì)中9種OPEs，提取溶劑利用率達到90%~95%，并且可有效去除脂質(zhì)和色素等干擾物。該方法浪費因子(wastefactor，WF)約為5%~10%，同時節(jié)省大約90%的內(nèi)標(biāo)溶液，而傳統(tǒng)QuEChERS方法的WF通常在50%~90%之間，WF的降低顯著提高了OPEs檢測靈敏度。Sapozhnik-ova和Lehotay等使用QuEChERS方法提取10g魚樣品中OPEs，但10mL提取物中僅取1mL進一步凈化(WF=90%)，實際有效樣品量僅1g，導(dǎo)致靈敏度降低。Zheng等采用QuEChERS結(jié)合UAE技術(shù)，以5mL乙腈-甲苯(9∶1，v/v)作為提取溶劑，以Z-Sep為吸附劑，并使用SPE柱多次凈化提取，利用GC-MS對電子回收站附近雞蛋中10種OPEs分析測定，方法定量限為0.110~0.600ng/g，回收率為76%~172%。

聲明:本文所用圖片、文字來源《色譜》2020年12月，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請與本網(wǎng)聯(lián)系

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