1引言

農(nóng)藥的發(fā)明和使用無(wú)疑大大提高了農(nóng)作物的產(chǎn)量,但隨著農(nóng)藥的大量和不合理地使用,食 晶中的農(nóng)藥殘留對(duì)人類(lèi)健康造成的負(fù)面影響也日益顯露出來(lái)1-31。發(fā)展快速、可掌、靈敏和實(shí) 用的農(nóng)藥殘留分析技術(shù)無(wú)疑是控制衣藥殘留、保證食用者安全和避免國(guó)際間有關(guān)貿(mào)易爭(zhēng)端的基礎(chǔ)。

農(nóng)藥殘留分析是復(fù)雜混合物中痕量組份的分析技術(shù),農(nóng)殘分析既需要精細(xì)的微量操作手 段,又需要高靈敏度的痕量檢測(cè)技術(shù)。60年代后氣相色譜技術(shù)得到飛速發(fā)展，許多高靈敏的檢測(cè)器開(kāi)始應(yīng)用,解決了過(guò)去許多難以檢測(cè)的農(nóng)藥殘留問(wèn)題。70年代末，特別是80年代，高效液相色譜的發(fā)展拓寬了農(nóng)藥殘留的分析范圍?，F(xiàn)階段,毛細(xì)管氣相色譜和高效液相色譜及其聯(lián)用技術(shù)仍然是農(nóng)藥殘留分析的主要手段。農(nóng)藥殘留分析的基本要求應(yīng)包括以下4點(diǎn):多殘留分析(MRMs)、高回收率( > 70% )和高重現(xiàn)性.低檢出限、操作簡(jiǎn)單易行。國(guó)際官方分析化學(xué)家協(xié)會(huì)(AOAC)的方法是經(jīng)典的、國(guó)際公認(rèn)的MRMs方法.該方法可以分析蔬菜和水果中的 多種農(nóng)藥殘留。但隨著人們對(duì)農(nóng)藥殘留問(wèn)題的重視，一方面促使各國(guó)政府及其職能部門(mén)不斷 加強(qiáng)對(duì)食品的農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)工作。制定的標(biāo)準(zhǔn)也越來(lái)越嚴(yán)格；另-方面也促使人們不斷研制毒性低、殘留時(shí)間短的新型農(nóng)藥。工作強(qiáng)度和難度的不斷增加和新型農(nóng)藥的不斷出現(xiàn),也使農(nóng)藥 殘留分析面臨挑戰(zhàn)。AOAC推薦的方法可測(cè)定300多種農(nóng)藥。而且經(jīng)過(guò)了多個(gè)實(shí)驗(yàn)室的嚴(yán)格驗(yàn)證,是國(guó)際上最具權(quán)威的方法。但AOAC推薦的方法也有缺點(diǎn)：(1)方法復(fù)雜,操作煩瑣,不適合現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)利；(2)試劑消耗量大，這在大規(guī)模的例行監(jiān)利中更加明顯；(3)近年來(lái)新研制開(kāi)發(fā)的農(nóng)藥大都是- -些極性和熱不穩(wěn)定的農(nóng)藥，而AOAC推薦的方法不能分析這些新農(nóng)藥。

本文按分析過(guò)程,闡述食品的農(nóng)藥殘留分析中分離和測(cè)定技術(shù)的現(xiàn)狀和發(fā)展方向。包括固相萃取、超臨界流體萃取、基質(zhì)固相分散、氣相色譜.高效液相色譜、超臨界流體色譜及近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的免疫分析技術(shù)。

2樣品前處理

現(xiàn)代農(nóng)藥殘留分析方法通常包括樣品前處理和測(cè)定兩部分，樣品前處理是核心。經(jīng)典的農(nóng)殘分析步驟通常是：水溶性溶劑提取→非水溶性溶劑再分配→圈相吸附柱凈化→氣相色譜或液相色譜測(cè)定。提取指使用適當(dāng)溶劑將待測(cè)物連同樣品基質(zhì)從固態(tài)樣品中轉(zhuǎn)移至易于凈化和分析的液態(tài)，凈化指將待測(cè)物與提取液中的干擾物質(zhì)分離?，F(xiàn)代農(nóng)殘分析中，有些方法提取,凈化一步莞成，提取凈化的界限已十分模糊。

2.1樣品的提取

多殘留分析中，提取液必須滿(mǎn)足在不同含水油、糖量的情況下能萃取不同極性的化合物 的要求。通常將被測(cè)樣品與萃取溶劑置于組織粉碎機(jī)中高速攪拌，以達(dá)到萃取完金的目的，超聲波振動(dòng)也成為常用的手段(常見(jiàn)的溶劑是乙腈和丙酮）。乙腈的優(yōu)點(diǎn)是很多親脂性化合物如脂肪,蠟質(zhì)物等不被萃取，但由于乙腈的價(jià)格較貴，有毒性，現(xiàn)已基本被丙酮代替，丙酮之所以被廣泛作為萃取劑，是由于芮酮既能萃取極性物質(zhì)也能萃取非極性物質(zhì)。另外，它還具有低毒容易提取和過(guò)露、價(jià)格較低等優(yōu)點(diǎn)。AOAC也不斷修改其方法,部分方法已由乙腈改為丙酮作萃取劑。美國(guó)貫品和藥品管理局也將丙酮萃取法寫(xiě)入1987年的農(nóng)藥分析手冊(cè)的修正本。

2.固相萃取(SPE)

固相萃取是常用的凈化手段，其基本原理與開(kāi)放式柱色譜相同。常用的駁附柱填料有 florisil氧化鋁和硅膠。由于植物組織中的共萃物具有一定的極性,因此一般用弱極性的淋洗液極性越低，共萃干擾物淋洗出來(lái)的越少，凈化效果越好，對(duì)此，Ambrus曾給出詳細(xì)的說(shuō)明。florisil對(duì)親脂性化合物有特別的吸附作用(25g florisil+3%比О可吸附1g脂肪),因 此florisil特別適于油性食品的凈化，用低極性溶劑洗脫 florisil柱,非極性農(nóng)藥殘留的回收率很高，因此flerisi是常用的填料l9R。但由于每批forisil的活性差異較大,因此每當(dāng)用--批新的 florisil時(shí),都必須重新摸索新的試驗(yàn)條件。氧化鋁可以代替lorisil,特別是分析某些脂肪含量高的食品,氧化鋁可分解某些有機(jī)磷酸脂,極性共萃物一般不能從中性和酸性氧化鋁中洗脫出來(lái),因此可以在某些分析中代替florisil。在氧化鋁柱上加人銀鹽可有效的消除硫化物的干 擾，當(dāng)分析某些含有機(jī)硫化物較高的食品如甘藍(lán).洋蔥等時(shí),氧化鋁-鏹鹽吸附柱凈化效果更 好l例。當(dāng)用氣相色譜-電子捕獲監(jiān)惻器(GC-ECD)測(cè)定有機(jī)氯等非極性農(nóng)藥殘留時(shí)，一般采用 氧化鋁-鼠鹽吸附柱。硅膠吸附柱的凈化分離效果不如氧化鋁柱,但可以根據(jù)殘留農(nóng)藥的極性 進(jìn)行不同的處理, Lorea.用改進(jìn)的硅膠吸附柱(1%醋酸＋3.5g硅膠)凈化分析11種有機(jī)磷農(nóng) 藥,其回收率為92%~ 101% 。

2.3超臨界流體莘取(SFE)

超臨界流體萃取(SFE)是近幾年出現(xiàn)的種特殊分離技術(shù)。SPE主要使用超臨界狀態(tài)的 CO。作淋洗劑.兼有氣體的滲透能力和液態(tài)的分配作用。流出液中的CO。在常壓下?lián)]發(fā),待測(cè) 物用溶劑榕解后進(jìn)行分析。

SFE可以通過(guò)調(diào)節(jié)淋跣液的極性來(lái)提高萃取的選擇性,以萃取不同物化性質(zhì)的農(nóng)藥殘留。 Khan"比較了使用和不使用甲醇作 SFE-CO極性調(diào)節(jié)劑的洋蔥和蘿卜中C農(nóng)藥殘留的回收 率,結(jié)果表明,利用甲醇作 SPE-CO。調(diào)節(jié)劑的℃農(nóng)藥殘留的回收率大大提高。利用甲醇調(diào)節(jié) CO淋洗劑的極性,從葫菜和水果中提取有機(jī)氯農(nóng)藥有機(jī)磷農(nóng)藥t11,氨基甲酸酯I),除 蟲(chóng)菊酯1等先后有報(bào)道。Lehotayf利用SFE'萃取蔬菜中五氯硝基苯,通過(guò)對(duì)CO。密度.溫 度等參數(shù)和固相的優(yōu)化選擇,使流出液中的干擾物大大減少,萃取液^清潔"到可以直接進(jìn)氣相 色譜-質(zhì)諧聯(lián)用儀(CC-MS)。

與傳統(tǒng)的溶劑提取方法相比),SFE有很多優(yōu)點(diǎn),首先可以避免使用大量的有機(jī)溶劑,提高萃取的選擇性,減少了分析時(shí)間，而且可以自動(dòng)化。其次,SFE可以采用固相吸附劑如波璃 珠氧化鋁.十八硅烷等,提取凈化-步完成，面提取被較溶劑提取方法“清潔”。SFE 是近幾年才發(fā)展起來(lái)的,很多實(shí)驗(yàn)參數(shù)和條件還有待進(jìn)一步優(yōu)化和明確。萃取液的壓力、溫度已能很好的控制,但其他一些問(wèn)題 。如細(xì)胞組織的萃取萃取液通過(guò)細(xì)胞時(shí)的速度.滯留時(shí)間、樣品物質(zhì) 的干擾等還需要進(jìn)一步的研究。

2.4基質(zhì)固相分 散(MSPD)

MSPD是1989年由美國(guó)Louisiuna州立大學(xué)的Barke2e1教授首次提出并給予理論解釋的一 種嶄新的SPE技術(shù),其基本操作是將試樣直接與適量反相填料(C18或CI4)研磨、混勻制成半 固態(tài)裝柱淋洗。MSPD濃縮了傳統(tǒng)的樣品的處理中所需的樣品勻化、組織細(xì)胞裂解、提取、凈 化等過(guò)程,避免了樣品均化、轉(zhuǎn)溶乳化.依縮等造成的待測(cè)物損失。經(jīng)MSPD柱后的淋洗液可 直接通過(guò)forsil 柱進(jìn)一步凈化 ,植物樣品中的極性有機(jī)物如：葉綠素、甘油三酯、植物維醇等被flarsil吸附。最后的流出液可直接進(jìn)色譜分析。Kandenezki(2 以活性forisil 為填料，以乙酸乙脂或三氯甲烷-丙酮(9:1, VV)為淋洗液,利用MSPS技術(shù)。測(cè)定了26種蔬菜、水果中9類(lèi)共120多種農(nóng)藥殘留,其回收率>80% ，且與蔬菜、水果的品種無(wú)關(guān)。

Schenck]利用MSPD測(cè)定牛奶中的5種有機(jī)氯和有機(jī)磷農(nóng)藥殘留將5mL牛奶與2g C18反相填料和1.5 mL乙腈混合裝人一個(gè)注射器中，用乙腈淋洗后的淋洗液通過(guò)forsil SPE 柱進(jìn)一步凈化，氣相色譜-氮磷監(jiān)測(cè)器( CC-FPD)測(cè)定有機(jī)磷，再經(jīng)- - 小forsil桂凈化,，CC-ECD測(cè)定有機(jī)氯農(nóng)藥。MSPD 自1989 年提出之后，已在蔬菜水果的農(nóng)藥殘留分析中得到廣泛應(yīng)用2-1-291 ，顯示了MSPD良好的通用性和發(fā)展?jié)摿?。MSPD 是簡(jiǎn)單高效的提取凈化方法，適用 于各種分子結(jié)構(gòu)和極性農(nóng)藥殘留的提取凈化。MSPD首先提高了分析速度,使現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)成為可能，其次陂少了試劑的用量，另外MSPD更適于自動(dòng)化分析。

聲明：本文來(lái)源于《分析化學(xué)》2000年 第7期，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)與本網(wǎng)聯(lián)系

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