用姜黃提取物。精確稱取0.4～0.59姜黃素樣品(精確至0.000lg)于10mL試管中，用5mL丙酮溶液渦旋提取2min后，用1mL移液槍將上清液轉(zhuǎn)移至100mL圓底燒瓶中，再用5mL丙酮渦旋提取1min，用1mL移液槍將上清液轉(zhuǎn)移至100mL圓底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至盡干，氮氣吹干，3mL正己烷和0.5mL丙酮溶解，樣品液待凈化。依次用5mL二氯甲烷、5mL正己烷活化SPE小柱；將待凈化液加入SPE小柱，再用2mL正己烷蕩洗圓底燒瓶后繼續(xù)加入；用3mL正己烷淋洗，待淋洗液流完之后繼續(xù)加人3mL正己烷淋洗；用10mL二氯甲烷洗脫。收集洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至近干，氮氣吹干，用2mL 88％乙腈水溶液準確定容，超聲溶解，樣品液使用一次性注射器過0.22μm濾膜，裝小瓶進樣檢測。樣品液裝小瓶后進行色譜檢測，計算加標回收率，結(jié)果見表4。在3個添加水平下，萬壽菊提取物在加標回收率在62.15％～100.12％之間I番茄菊提取物在加標回收率在62.50％～80.12％之間；葡萄籽提取物在加標回收率在99.27％～106.87％之間l綠咖啡豆提取物在加標回收率在65.88％～80.49％之間；姜黃提取物在加標回收率在75.54％～88.15％之間。

5、精密度驗證

取萬壽菊提取物、番茄提取物、葡萄籽提取物、綠咖啡豆提取物和姜黃提取物樣品各1批，收集液使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至近干，氮氣吹干，用2mL 88％乙腈水溶液準確定容，超聲溶解，樣品液使用一次性注射器過0.22μm濾膜，裝小瓶進樣檢測。收集液使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至盡干，氮氣吹干，用2mL 88％乙腈水溶液準確定容，超聲溶解，樣品液使用一次性注射器過0.22μm濾膜，裝小瓶進樣檢測。綠咖啡豆提取物用移液槍將上層正己烷轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，葡萄籽提取物用60℃～80℃水浴加熱溶液，使正己烷層溶解，再用移液槍將上層正己烷轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，用正己烷重復(fù)萃取1次，合并正己烷溶液。氮氣將正己烷吹干，用2mL88％乙腈水溶液準確定容，超聲溶解，樣品液使用一次性注射器過0.22μm濾膜，裝小瓶進樣檢測。依次用5mL二氯甲烷、5mL正己烷活化SPE小柱；將待凈化液加入SPE小柱，再用2mL正己烷蕩洗圓底燒瓶后繼續(xù)加入；用3mL正己烷淋洗，待淋洗液流完之后繼續(xù)加人3mL正己烷淋洗；用10mL二氯甲烷洗脫。收集洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至近干，氮氣吹干，用2mL 88％乙腈水溶液準確定容，超聲溶解，樣品液使用一次性注射器過0.22μm濾膜，裝小瓶進樣檢測。在1.3條件下進行色譜分析，每批樣品一天之內(nèi)連續(xù)測定5次并連續(xù)測定5 d，計算方法的日內(nèi)、日間精密度，結(jié)果見表5。方法檢測萬壽菊提取物樣品日內(nèi)相對標準偏差在11.23％～14.26％之間，日間相對標準偏差在16.83％～18+26％之間；檢測番茄提取物樣品日內(nèi)相對標準偏差在11.73％～17.03％之間，日間相對標準偏差在17.05％～19.56％之間；檢測葡萄籽提取物樣品日內(nèi)相對標準偏差在1.21％～3.80％之間，日間相對標準偏差在3.83％～7.55％之間；檢測綠咖啡豆提取物樣品日內(nèi)相對標準偏差在1.59％～5.41％之間，日間相對標準偏差在6.36％～11.29％之間；檢測姜黃提取物樣品日內(nèi)相對標準偏差在4+51％～16.83％之間，日間相對標準偏差在10.40％～19.48％之間。
 

三、結(jié)論

通過對實驗中所用試劑、器具及玻璃器具清洗方式進行系統(tǒng)排查與驗證，排除了污染空白試樣的因素，確定了試驗用試劑、器具及玻璃器具的清洗方式。同時根據(jù)5種天然植物提取物的不同性質(zhì)，優(yōu)化和驗證不同的凈化方法，針對5種天然植物提取物分別建立了不同的前處理方法。并按照確定的色譜條件和前處理方法，研究方法的線性范圍、檢出限、定量限、準確度和精密度等技術(shù)指標。實驗結(jié)果表明：4種多環(huán)芳烴在0.0l～8.0pg／l(g范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)R2為1.0000，儀器檢出限為0.01μg／kg，定量限為0.04μg／kg，相對標準偏在20％以內(nèi)，加標回收率在60％～110％之間。該方法適用性強，檢測準確度高，實現(xiàn)了5種天然植物提取物中4種多環(huán)芳烴的檢測。

聲明：本文所用圖片、文字來源于《中國食品添加劑》，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請與本網(wǎng)聯(lián)系。

相關(guān)鏈接：姜黃素，丙酮，葡萄籽，多環(huán)芳烴