天然植物提取物是指采用一定的溶劑和方法，以植物(植物全部或者某一部分)為原料，經(jīng)過(guò)提取、分離、純化過(guò)程，得到的活性成分(如酚酸、黃酮、精油、生物堿、多糖等)…，具有含量穩(wěn)定、無(wú)污染、無(wú)殘留、易吸收等優(yōu)點(diǎn)。天然植物提取物種類繁多，來(lái)源廣泛，具有抗氧化、抗腫瘤、抗癌等作用。如：天然葉黃素目前主要來(lái)源于萬(wàn)壽菊，不僅使用效果較好，且能有效對(duì)人們慢性疾病予以防治，尤其是在保護(hù)視力以及增強(qiáng)免疫力方面，具有非常顯著的應(yīng)用效果；天然番茄紅素目前主要來(lái)源于茄科植物西紅柿，是一種很強(qiáng)的抗氧化劑，具有較強(qiáng)的消除自由基的能力，還具有防癌、抗癌、預(yù)防心腦血管等疾病，美容祛皺等功效，有“植物黃金”之稱；葡萄籽中富含原花青素及抗癌物白藜蘆醇，其中多酚含量在95％以上；咖啡豆中除含有揮發(fā)性物質(zhì)外，還含有多酚類化合物…，綠原酸作為其中主要的活性成分，具有抗病毒…、抗氧化活性，還可以降低患有自發(fā)性高血壓鼠和人的血壓；姜黃提取物姜黃素類物質(zhì)具有降血脂、抗凝、抗氧化、利膽、抗癌等作用。因此，隨著人民生活水平的提高和健康意識(shí)的增強(qiáng)，天然植物提取物的使用范圍日益廣泛，市場(chǎng)需求量日益增加，目前，天然植物提取物已被廣泛應(yīng)用于食品添加劑、食品保鮮、養(yǎng)殖業(yè)、農(nóng)藥殺蟲(chóng)劑、醫(yī)藥等領(lǐng)域。

多環(huán)芳烴(PAHs)是廣泛存在于環(huán)境中的一種持久性有機(jī)污染物，具有很強(qiáng)的致畸、致突變、致癌性，由于性質(zhì)穩(wěn)定、難于降解，PAHs在空氣、水體、土壤中呈不斷積累的趨勢(shì)，并主要通過(guò)根部吸收和植物葉片吸收，進(jìn)入植物體內(nèi)。在植物提取加工過(guò)程中，植物體內(nèi)多環(huán)芳烴隨有機(jī)溶劑遷移至天然植物提取物中，嚴(yán)重影響天然植物提取物行業(yè)的健康發(fā)展。我國(guó)強(qiáng)制性食品安全標(biāo)準(zhǔn)GB 2762—2017《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量》中單純以苯并［α］芘含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，而歐盟委員會(huì)835／2011號(hào)文件規(guī)定了食品中PAHs污染的另一個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)為PAH4苯并［α］蒽(BaA)，苯并［α］熒蒽(BbF)，苯并［α］芘(BαP)的總含量，相較于歐盟以PAH4的總含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)而言，我國(guó)單純以BαP的含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)得出的結(jié)果較為片面。因此，研究能夠快速同時(shí)測(cè)定PAH4總含量的方法具有重要意義。

目前，關(guān)于多環(huán)芳烴的檢測(cè)方法主要包括氣相色譜法、氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法、氣相色譜一三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法和高效液相色譜法等，檢測(cè)對(duì)象主要是環(huán)境、空氣、土壤、水體、植物油等，尚未見(jiàn)關(guān)于天然植物提取物中多環(huán)芳烴檢測(cè)方法的文獻(xiàn)報(bào)道，由于天然植物提取物基質(zhì)復(fù)雜，有關(guān)多環(huán)芳烴檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)方法及文獻(xiàn)方法不能直接應(yīng)用，如何準(zhǔn)確測(cè)定天然植物提取物中多環(huán)芳烴，是亟需解決的問(wèn)題。本文采用高效液相色譜法檢測(cè)5種天然植物提取物中4種多環(huán)芳烴，方法對(duì)天然植物提取物適用性強(qiáng)，檢測(cè)準(zhǔn)確性高，對(duì)天然植物提取物的質(zhì)量控制具有十分重要的意義。

一、材料與方法

1、材料與試劑

丙酮(色譜純，美國(guó)SR)；甲醇(色譜純，美國(guó)SR)；正己烷(色譜純，美國(guó)SR)；二氯甲烷(色譜純，美國(guó)SR)；乙醇(色譜純，美國(guó)SR)；乙腈(色譜純，美國(guó)SR)；環(huán)己烷(分析純，天津市永大化學(xué)試劑有限公司)；乙酸乙酯(分析純，天津市永大化學(xué)試劑有限公司)；超純水(18．2MΩ，實(shí)驗(yàn)室純水機(jī)自制)；16種多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)品混標(biāo)(200μg/mL，o2si)、多環(huán)芳烴固相萃取柱(SPE)(500mg，6mL，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司)。

2、儀器與設(shè)備

Waters E2695高效液相色譜儀，配備2475熒光檢測(cè)器；濟(jì)寧天華超聲電子儀器有限公司TH一600型超聲波清洗器；島津制作所AUY220型分析天平；大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器(北京)有限公司Mx—S型漩渦混合器；天津泰斯特儀器有限公司DK一98一IIA型電熱恒溫水浴鍋；長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司H一2050R型高速冷凍離心機(jī)；北京萊伯泰科儀器有限公司GPC800一Vonex型凝膠滲透色譜儀；上海申生科技有限公司R213B型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

3、色譜條件

色譜柱：Agilent Eclipse PAH C18(4.6×250mm，5μm)；柱溫：40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：淈：激發(fā)波長(zhǎng)270nm，發(fā)射波長(zhǎng)385m；苯并(b)熒蒽、苯并(a)蒽、苯并(a)芘：激發(fā)波長(zhǎng)288nm，發(fā)射波長(zhǎng)430nm；進(jìn)樣量：100μL；流速：1.5mL／min；運(yùn)行時(shí)間：40min；流動(dòng)相A：水；流動(dòng)相B：乙腈。

4、前處理方法

（1）萬(wàn)壽菊提取物

精確稱取0.19萬(wàn)壽菊提取物樣品(精確至0.00019)于25mL容量瓶中，用玻璃移液管加入2mL色譜純丙酮促溶，渦旋使其混合均勻后，加入GPC流動(dòng)相定容，搖晃混合均勻，超聲溶解。使用玻璃注射器，用0.22um濾膜過(guò)濾至GPC進(jìn)樣管中，經(jīng)GPC凈化。

收集液使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至近干，氮?dú)獯蹈?，?mL 88％乙腈水溶液準(zhǔn)確定容，超聲溶解，樣品液使用一次性注射器過(guò)0.22μm濾膜，裝小瓶進(jìn)樣檢測(cè)。

（2）番茄提取物

精確稱取0.2～0.39番茄提取物樣品(精確至0.00019)于25mL具塞玻璃試管中，用玻璃移液管加入2mL色譜純二氯甲烷促溶，渦旋使其混合均勻后，加入GPC流動(dòng)相定容，搖晃混合均勻，在40℃以上的超聲波清洗機(jī)中超聲提取30min。在3500r／min、5℃條件下離心5min。使用玻璃注射器，用0.22μm濾膜過(guò)濾至GPC進(jìn)樣管中，經(jīng)GPC凈化。

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