2.3 流動相比例和梯度洗脫

實驗考查了流動相比例和梯度洗脫對五種添加劑分離效果的影響。實驗選取了四種流動相方式，分別是甲醇 - 乙酸銨溶液比例為：（1）15∶85（ 圖 6）；（2）10∶90（ 圖 7）；（3）5∶95（ 圖 9、10）；（4）梯度洗脫：0 ～ 3min：20∶80；3 ～5min ：50∶50 ；5 ～ 15min ：80∶20 ；15 ～20min：5∶95（圖 8）

實驗結(jié)果表明：在流動相甲醇 - 乙酸銨比例為 15∶85 和 10∶90時，五種添加劑組分出峰只有四個（見圖 6 ～ 7），糖精鈉和脫氫乙酸峰混在一起無法分離；選擇梯度洗脫體系時五種添加劑可以完全出峰，但是苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸的保留時間間隔太短，不能完全分離開來（圖8）；而在選擇流動相甲醇 - 乙酸銨比例為 5∶95時，五種添加劑組分可以完全完整的分開（見圖9 ～ 10）

2.4 流動相流速的選擇

流動相的流速主要影響溶質(zhì)與固定相和流動相的相互作用，從而改變待測組分的保留時間及各組分之間的分離度。流速過快，可能導(dǎo)致色譜柱壓升高，系統(tǒng)壓力過高導(dǎo)致漏液；流速過慢則會延長待測物的保留時間，引起色譜峰拖尾，所以在實驗過程中要選擇合適的流速。實驗結(jié)果表明：當(dāng)流動相流速為 1.0mL/min 時，五種添加劑雖然出峰良好，但山梨酸和糖精鈉的保留時間比較接近，可能導(dǎo)致積分誤差；而當(dāng)流速為 0.9mL/min時，五種添加劑可以完全分離，各組分出峰效果較好，出峰順序分別為：安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、脫氫乙酸（見圖 9 ～ 10）；綜上所述，實驗選擇檢測波長為 230nm，流動相體系為甲醇 - 乙酸銨，流動相比例為 5∶95，流速為 0.9mL/min，進(jìn)行下一步實驗。

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