2）流動(dòng)相的選擇

當(dāng)溫度為25℃，流動(dòng)相流速為0.8mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm時(shí)，不同流動(dòng)相中CP的高效液相色譜如圖2所示。由圖2可見：乙腈明顯優(yōu)于甲醇作為流動(dòng)相時(shí)的分離效果；當(dāng)V（乙腈（∶V（水）=4，保留時(shí)間為4.6min時(shí)分離效果較好，可將乙醇、CP及其他雜質(zhì)的色譜峰分開且峰形規(guī)則，因此選擇V（乙腈）∶V（水）=4為最優(yōu)流動(dòng)相。由于不同物質(zhì)的理化性質(zhì)不同，因此對(duì)流動(dòng)相的選擇也不同。本文選擇的最佳流動(dòng)相可將CP與其他物質(zhì)完全分離。

（2）流速的選擇當(dāng)溫度為25℃，V（乙腈）∶V（水）=4的溶液為流動(dòng)相，流速分別為0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4mL/min時(shí)，CP標(biāo)準(zhǔn)溶液（50mg/L）的色譜如圖3所示。由圖3可見：當(dāng)流動(dòng)相流速較低（0.4，0.6mL/min）時(shí)，樣品保留時(shí)間長(zhǎng)，分離效果好，但測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)；當(dāng)流速較高（1.2，1.4mL/min）時(shí)，樣品保留時(shí)間短，但分離效果差，圖譜存在拖尾現(xiàn)象；當(dāng)流速為0.8mL/min，CP保留時(shí)間為4.55min時(shí)，峰形及分離效果較好，因此選其為最佳流速。

2、CP標(biāo)準(zhǔn)曲線

在V（乙腈）∶V（水）=4的溶液為流動(dòng)相，流速為0.8mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm條件下，測(cè)定質(zhì)量濃度分別為0，2，5，10，20，25，45，75mg/L的CP標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜，以色譜峰面積為縱坐標(biāo)Y，進(jìn)樣質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)X，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖4所示。由圖4可見，CP的質(zhì)量濃度與其對(duì)應(yīng)的峰面積呈較好的線性關(guān)系（R2=0.9998，p＜0.01）。

3、檢出限

在V（乙腈）∶V（水）=4的溶液為流動(dòng)相，流速為0.8mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm條件下，對(duì)空白土壤樣品連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定20次，根據(jù)峰面積的標(biāo)準(zhǔn)偏差，按式（1）計(jì)算得到檢出限為0.42mg/L，表明該方法可準(zhǔn)確分析土壤中較低質(zhì)量濃度的CP。

4、準(zhǔn)確度和精密度

（1）CP準(zhǔn)確度和精密度測(cè)定在V（乙腈）∶V（水）=4的溶液為流動(dòng)相，流速為0.8mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm條件下，對(duì)CP標(biāo)準(zhǔn)溶液（50mg/L）重復(fù)進(jìn)樣10次，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差和變異系數(shù)，結(jié)果列于表2。由表2可見，測(cè)定結(jié)果具有較好的重復(fù)性，標(biāo)準(zhǔn)偏差和變異系數(shù)分別為1.89和0.048，即該方法測(cè)定CP標(biāo)準(zhǔn)溶液具有較高的準(zhǔn)確度和精密度。

（2）不同土壤中CP準(zhǔn)確度和精確度測(cè)定在V（乙腈）∶V（水）=4的溶液為流動(dòng)相，流速為0.8mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm條件下，在3種土壤中測(cè)定低質(zhì)量濃度（25mg/L）和高質(zhì)量濃度（75mg/L）CP的加標(biāo)回收率，結(jié)果列于表3。由表3可見，該方法具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，可用于草甸黑土、黑鈣土和風(fēng)沙土中CP質(zhì)量比的測(cè)定。

（3）不同劑型CP在土壤中的準(zhǔn)確度和精確度測(cè)定在V（乙腈）∶V（水）=4的溶液為流動(dòng)相，流速為0.8mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm條件下，不同劑型CP在土壤中質(zhì)量比測(cè)定結(jié)果列于表4.由表4可見：CP乳油在草甸黑土、黑鈣土和風(fēng)沙土中的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.14，2.68，3.06，變異系數(shù)分別為0.03，0.03，0.04；CP微囊懸浮劑在草甸黑土、黑鈣土和風(fēng)沙土中的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為3.05，3.03，1.34，變異系數(shù)分別為0.04，0.04，0.02。表明該方法可用于不同劑型CP在不同土壤中含量的測(cè)定，具有較高的準(zhǔn)確度和精密度。

綜上所述，本文給出了超聲萃取-高效液相色譜法測(cè)定不同類型土壤中硝化抑制劑CP含量的方法。以乙腈和蒸餾水為流動(dòng)相，最佳比例為V（乙腈）∶V（水）=4，最佳檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm，最佳流速為0.8mL/min，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性顯著（R2=0.9998，p＜0.01），檢出限為0.42mg/L。在最佳條件下，用超聲萃取-高效液相色譜法可在4.5min內(nèi)分離測(cè)定草甸黑土、黑鈣土和風(fēng)沙土中CP的含量，不同質(zhì)量濃度和不同劑型CP溶液在草甸黑土、黑鈣土和風(fēng)沙土中添加24h的回收率為82.44%～91.66%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.34～5.04，變異系數(shù)為0.02～0.06。該方法快速簡(jiǎn)便、精密度和準(zhǔn)確度較高，可用于不同類型土壤中不同劑型硝化抑制劑CP含量的測(cè)定。

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