2.2 不同開(kāi)花時(shí)期花粉的活力測(cè)定

研究發(fā)現(xiàn)，多花指甲蘭最佳染色時(shí)長(zhǎng)為12h。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，TTC染色液和醋酸洋紅染色效果最接近離體萌發(fā)結(jié)果，而I₂-KI染液會(huì)使整個(gè)視野變紅，不利于觀測(cè)；開(kāi)花4～6d的花粉染色效果最好，顏色最深，染色率最高（圖5），花蕾期染色較淺，呈粉紅色，且染色數(shù)目較少，開(kāi)花10d的花粉幾乎無(wú)法染色，染色極淺。整個(gè)花期花粉活力先上升到達(dá)最高值，之后下降，呈先升后降趨勢(shì)。

2.3 不同開(kāi)花時(shí)期柱頭可授性研究結(jié)果

利用聯(lián)苯胺-過(guò)氧化氫法測(cè)定多花指甲蘭柱頭可授性（表2），結(jié)果顯示3個(gè)時(shí)期的柱頭在檢測(cè)液中均冒出氣泡，其中盛花期過(guò)氧化氫酶含量最高，氣泡量最大，冒出最迅速，可授性最強(qiáng)?；ɡ倨诖沃?；衰敗期最少最緩慢，可授性最弱；但3個(gè)時(shí)期的柱頭均未變色。

3 討論

花粉為植物的生殖細(xì)胞，它能反映物種演化的一般規(guī)律，花粉的性狀相對(duì)穩(wěn)定，其微觀態(tài)結(jié)構(gòu)具有種間特異性，是植物分類(lèi)的重要依據(jù)之一。

蘭科植物花粉不同于其他植物，蘭科植物花粉由成千上萬(wàn)的花粉粒通過(guò)類(lèi)脂質(zhì)集合而成?；ǚ哿Ｓ伤姆煮w組成的，四分體是構(gòu)成花粉的基本單位。不同種屬蘭花花粉形態(tài)、表面紋飾不一。如蝴蝶蘭花粉塊為梨形，中間有大縫隙，花粉塊可分為兩半；杓蘭屬花粉表面都有圓形凹陷，外壁結(jié)構(gòu)呈光滑或褶皺狀。多花指甲蘭花粉近球形，表面具裂隙，無(wú)紋飾，類(lèi)似蜂巢，未見(jiàn)萌發(fā)孔。

由于花粉粒結(jié)合緊密，相互擠壓，花粉粒呈不規(guī)則狀。隨著開(kāi)花時(shí)間的延長(zhǎng)，花粉粒粘合得更加緊密，花粉團(tuán)體積也相應(yīng)變小?；ǚ刍钚耘c柱頭可授性是影響雜交結(jié)實(shí)率的關(guān)鍵因素，本研究發(fā)現(xiàn)，花粉染色在開(kāi)花4～6d效果最好，花蕾期次之，衰敗期幾乎無(wú)法染色?；ǚ刍钚耘c自身遺傳特性有關(guān)，羅遠(yuǎn)華等研究發(fā)現(xiàn)不同的文心蘭種質(zhì)花粉活力不同。同時(shí)還與環(huán)境溫度、花期長(zhǎng)短等多種因素有關(guān)，且蘭花花粉團(tuán)是由花粉粒依靠類(lèi)脂質(zhì)聚合而成的，分離困難，一定程度上增加了實(shí)驗(yàn)難度。結(jié)果表明，最接近真實(shí)值的花粉染色方法為T(mén)TC染色法和醋酸洋紅染色法，I₂-KI的測(cè)量值遠(yuǎn)大于其他3種方法。這是由于I₂-KI是根據(jù)花粉粒積累淀粉的量來(lái)判斷花粉活力，而三核期退化的花粉已有淀粉積累，遇碘呈藍(lán)色反應(yīng)另外，含有淀粉而被殺死的花粉粒遇I₂-KI也呈藍(lán)色，因此，此法不能準(zhǔn)確表示花粉的活力。

開(kāi)花10d以后TTC染液和醋酸洋紅染液幾乎無(wú)法將花粉染色，而花粉萌發(fā)率依然較高，這很可能是因?yàn)殚_(kāi)花后期花粉粒結(jié)合過(guò)于緊密，類(lèi)脂質(zhì)阻礙了染色液的進(jìn)入，導(dǎo)致染色困難。蘭花花粉屬于二核型花粉，有厚實(shí)的外壁，壽命很長(zhǎng)，易于保存，不會(huì)輕易失活。兜蘭、蝴蝶蘭等花粉活力均表現(xiàn)為先上升后下降的趨勢(shì)，這與我們的研究結(jié)果一致。柱頭可授性的結(jié)果顯示多花指甲蘭開(kāi)花5d可授性最好，但3個(gè)時(shí)期的柱頭在檢測(cè)液中均未變色，該現(xiàn)象在其他植物中也有出現(xiàn)，如蘇蕓蕓用同種方法研究了藿香的柱頭可授性，亦只見(jiàn)氣泡，未見(jiàn)柱頭變色。多花指甲蘭花粉活力最高時(shí)期與柱頭可授性時(shí)期一致，可選擇開(kāi)花4～6d時(shí)對(duì)多花指甲蘭進(jìn)行人工授粉。

洋蘭的野生種大都艷而無(wú)香，因而培育有香味的洋蘭品種是今后洋蘭育種的主要目標(biāo)之一。黃金小神童是花香引入的典范，為大花蕙蘭與四季蘭素心的雜交種，氣味幽香。多花指甲蘭花香清幽、花型美麗，后期可大力開(kāi)展該種與其近緣種屬之間的雜交育種研究。

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