取2.0000g弗羅里硅土放入25mL三角瓶中，在130℃溫度下活化處理過夜。取出冷卻到室溫時(shí)，加入20.0mL月桂酸溶液(內(nèi)含月桂酸400mg)。塞上塞子，振蕩15min。待吸附劑沉下后，用10.0mL移液管移出10.OmL月桂酸溶液到另一個(gè)125mL三角瓶中(注意避免吸人任何弗羅里硅土)，加入50mL中性乙醇及3滴酚酞指示劑，用O.05mol／L的氫氧化鈉溶液滴定，求出1g弗羅里硅土吸附月桂酸的量(mg)，即所謂月桂酸值(1auric acid value)，通常以LA表示。

一般應(yīng)用弗羅里硅土的活性指標(biāo)LA為110以上，而市售的弗羅里硅土的LA為75～116。弗羅里硅土的LA越低，則其中硫酸鈉含量就越高，其含量范圍應(yīng)為0.15％～2.4％。

通?？梢杂盟礈煲匀コ蛩徕c，然后再在650℃溫度下活化5 h，這樣處理后，月桂酸值就可以達(dá)到要求。

弗羅里硅土柱的淋洗體系：對(duì)于內(nèi)徑1.5 cm的10 g弗羅里硅土層析柱，用100 mL 6％乙醚-石油醚來淋洗，被淋洗出的農(nóng)藥有艾氏劑、六六六各種異構(gòu)體、p，p^’-滴滴涕、o，p-滴滴涕、p，p^’-滴滴滴、p，p^’-滴滴依、七氯、環(huán)氧七氯、三氯殺螨醇、五氯硝基苯、三硫磷等；用15％乙醚-石油醚淋洗出來的有狄氏劑、異狄氏劑、螨卵酯、馬拉松、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、苯硫磷等。

弗羅里硅土的淋洗劑還有其他多種體系(詳細(xì)見后面的有關(guān)章節(jié))，但每種體系采用前應(yīng)做回收試驗(yàn)確定。

2、氧化鋁柱

氧化鋁(alumina)不如弗羅里硅土那樣常用，但價(jià)格便宜，也是一種比較重要的吸附劑。它有酸性、中性、堿性之分，可根據(jù)農(nóng)藥的性質(zhì)選用。有機(jī)氯農(nóng)藥和有機(jī)磷農(nóng)藥在堿性中易分解，宜用中性或酸性氧化鋁。均三氮苯類除草劑則使用堿性氧化鋁。氧化鋁的最大的特點(diǎn)就是淋洗液用量較少，但其活性比弗羅里硅土要大得多，因而農(nóng)藥在柱中不易被淋洗下來，而用強(qiáng)極性溶劑時(shí)，農(nóng)藥和雜質(zhì)又會(huì)同時(shí)被淋洗下來，所以在應(yīng)用前必須將氧化鋁進(jìn)行去活處理。

市售的吸附層析活性氧化鋁(中性或酸性)，先在130℃左右溫度下活化4 h以上，然后加入相當(dāng)于5％～10％質(zhì)量的蒸餾水，在研缽中仔細(xì)混磨使其混合，倒入瓶中蓋緊，放置過夜，使活性一致。

用10％乙醚-正己烷100 mL淋洗，從含5％水的10 g氧化鋁柱中定量回收的有乙硫磷、對(duì)硫磷、馬拉硫磷、苯硫磷、二嗪磷、氯硫磷、艾氏劑、滴滴涕、滴滴依、滴滴滴、狄氏劑、異狄氏劑、林丹、七氯等，對(duì)于極性較強(qiáng)的一些有機(jī)磷農(nóng)藥也可以用2％丙酮-正己烷淋洗液。

3、硅膠柱

硅膠(silica gel)是硅酸鈉溶液中加入鹽酸而制得的溶膠沉淀物，經(jīng)部分脫水而得無定形的多孔固體硅膠。硅膠柱層析在樣品凈化中使用很普遍，它能有效地除去糖等極性雜質(zhì)，特別是它對(duì)N-甲基氨基甲酸酯農(nóng)藥比弗羅里硅土或氧化鋁柱穩(wěn)定。通常也需活化處理去除殘余水分，使用前再加入一定量的水分，以調(diào)節(jié)其吸附性能。由于硅膠的吸附能力與其表面的硅羥基數(shù)目有關(guān)，一般在活化時(shí)溫度不宜超過170 ℃，以100～110℃為宜。操作時(shí)，一般硅膠的量為5～50 g，含水量為0％～10％，初始用弱極性溶劑(如戊烷或己烷)淋洗，洗脫弱極性化合物，然后逐漸增強(qiáng)溶劑的極性，洗脫極性較強(qiáng)的化合物。糖等強(qiáng)極性化合物一般用甲醇等強(qiáng)極性溶劑也難以洗脫下來，但用硅膠卻很容易除去。

4、活性炭柱

活性炭(active carbon)柱層析一般很少單獨(dú)使用，經(jīng)常與弗羅里硅土及氧化鋁按一定比例配合使用?；钚蕴繉?duì)植物色素有很強(qiáng)的吸附作用。將活性炭與5～10倍量的弗羅里硅土和氧化鎂及助濾劑Celite 545等混合，用乙腈-苯(1：1)作淋洗劑，能有效地凈化許多有機(jī)磷農(nóng)藥。

5、其他填料層析柱

除了上述幾種常用填料柱層析外，在農(nóng)藥殘留樣品凈化中，現(xiàn)在多將提取與凈化同時(shí)在一根固相提取柱上完成，但也可以單獨(dú)用于凈化處理。如果使用C₁₈柱，則能有效除去脂肪等非極性雜質(zhì)。許多酸堿性農(nóng)藥及其代謂十轉(zhuǎn)化物常用離子交換柱(ion exchange)做凈化處理，特別是對(duì)百草枯和草甘膦分析樣品的凈化。例如百草枯樣品處理是先用2.5 mol／L硫酸提取，中和后，過強(qiáng)陽離子交換柱，用飽和氯化銨淋洗，然后用分光光度計(jì)對(duì)藍(lán)色的陽離子還原產(chǎn)物比色測(cè)定分析。Pardue(1995)以溶劑分配和陽離子交換固相提取為主建立了一套適合于三嗪類除草劑及其代謝物多殘留分析樣品的凈化方法。經(jīng)分析，6種農(nóng)產(chǎn)品中的19種除草劑和4種代謝物，其回收率分別為81％～106％和59％～87％。

值得重視的是，美國環(huán)境保護(hù)局(EPA)規(guī)定，凡是土樣(包括淤泥)提取液均要用凝膠滲透層析(gel permeation chromatography，GPC)進(jìn)行凈化處理，除去脂肪、聚合物、共聚物、天然樹脂、蛋白質(zhì)、甾類等大分子化合物，以及細(xì)胞碎片等雜質(zhì)。在多種多樣的農(nóng)藥殘留基體中存在大量這類大分子雜質(zhì)，它們?cè)谶M(jìn)行氣相色譜分析或液相色譜分析測(cè)定時(shí)一般不能通過色譜柱，雖然這類物質(zhì)不會(huì)對(duì)檢測(cè)器產(chǎn)生反應(yīng)，但由于堵塞進(jìn)樣閥和色譜柱，造成色譜柱壽命縮短和結(jié)果產(chǎn)生偏差，同時(shí)其降解物也可能影響檢測(cè)器。

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