2.5標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性檢測結(jié)果

2.5.1運(yùn)輸穩(wěn)定性結(jié)果

將所制備的EAEC菌體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分別存放于25℃和37℃條件下，于1、3、5、7天各抽取3個(gè)樣品，通過螺旋涂布進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)結(jié)果如表5所示，EAEC菌體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在25°C條件下保存7天穩(wěn)定性良好，在37℃環(huán)境下5天內(nèi)穩(wěn)定情況良好，第7天活菌數(shù)量下降出現(xiàn)不穩(wěn)定現(xiàn)象，但菌含量仍能維持在103CFU/樣品水平條件，即滿足定性樣品的要求。

對分別在25℃和37℃條件下存放14天的3個(gè)EAECgDNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品進(jìn)行特征性基因檢測，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖3所示，astA、aggR、pic基因均能擴(kuò)增出清晰的條帶。說明EAECgDNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在25°C和37℃條件下保存14天穩(wěn)定性良好。

上述數(shù)據(jù)表明，EAEC菌體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和gDNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在非高溫季節(jié)，可以常溫運(yùn)輸，而在高溫季節(jié)可以采用泡沫箱加冰袋的方式進(jìn)行低溫運(yùn)輸。

2.5.2儲藏穩(wěn)定性結(jié)果

將制備的EAEC菌體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)于-20℃和4℃保存。選擇4℃保存7、14和28天，-20℃保存28和60天，分別對EAEC菌含量進(jìn)行檢驗(yàn)。通過與0天時(shí)的數(shù)據(jù)比較計(jì)算復(fù)蘇率，從而評價(jià)儲藏穩(wěn)定性。由表6數(shù)據(jù)可以看出，-20℃保存60天復(fù)蘇率為100%，表明-20℃作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的儲藏條件可以滿足穩(wěn)定性要求。4℃條件下，保存14天復(fù)蘇率為95.6%，28天復(fù)蘇率為78.2%，樣品中菌含量仍保持在103CFU/樣品水平，樣品仍然穩(wěn)定，說明4℃可以作為短期儲存條件。

對分別在-20℃和4℃條件下存放60天的3個(gè)EAECgDNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品進(jìn)行特征性基因檢測，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖4所示，EAECgDNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在-20°C和4℃條件下保存60天均能對astA、aggR、pic基因擴(kuò)增出特異性條帶。說明-20℃和4℃滿足gDNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的儲藏條件。

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