2.3分離菌的生化鑒定

生化鑒定結(jié)果顯示，分離菌枸櫞酸鹽，d-葡萄糖，賴氨酸脫羧酶和鳥氨酸脫羧酶試驗均為陽性。個別菌株可發(fā)酵麥芽糖、甘露醇。吲哚、尿素酶、丙二酸鹽等試驗均為陰性。ATB自動生化鑒定系統(tǒng)判定結(jié)果均為沙門氏菌，評定符合率均在99%以上。

2.4分離菌的16SrDNA鑒定

將測序結(jié)果用NCBI的BLAST分區(qū)檢索，發(fā)現(xiàn)分離菌株與沙門氏菌屬的參考菌株同源性達97%—100%。結(jié)合上述鑒定結(jié)果，綜合判定9株分離菌為沙門氏菌，命名為SDS1-9。

2.5分離菌的致病性試驗

分離菌感染小鼠后，小鼠出現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀，表現(xiàn)為站立不穩(wěn)，瞇眼，抱爪蜷縮，個別小鼠出現(xiàn)糞便稀軟，呼吸急促癥狀。感染組小鼠出現(xiàn)死亡，死亡個數(shù)1—5個，死亡率20%—100%(圖2)。對照組小鼠無發(fā)病癥狀，無死亡。分離感染組小鼠肝臟、脾臟、心臟細(xì)菌，經(jīng)鑒定分離出沙門氏菌。

2.6分離菌的藥物敏感性試驗

藥物敏感性試驗結(jié)果顯示，分離菌株分別對5—11種抗生素耐藥，對2—5種抗生素表現(xiàn)中介，對2—8種抗生素敏感(圖3)。15種抗生素中無對頭孢曲松和阿米卡星表現(xiàn)耐藥的菌株，其余13種抗生素的耐藥率11.11%—100%，其中氟苯尼考、替米考星、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶和復(fù)方新諾明的耐藥率高達100%。土霉素敏感率最高，為88.89%(8/9)(圖4)。對5種抗生素耐藥菌株1株，對6種抗生素耐藥菌株2株，對7種抗生素耐藥菌株1株，對8種抗生素耐藥菌株3株，對9種抗生素耐藥菌株1株，對11種抗生素耐藥菌株1株，分離菌株均具有多重耐藥性。

3討論

Williams等報道英國的12個養(yǎng)殖場316只病死貂中沙門氏菌患病率0.6%，Dietz等報道由于飼料污染導(dǎo)致丹麥25個水貂養(yǎng)殖場水貂出現(xiàn)流產(chǎn)死胎，上述報道均表明在水貂養(yǎng)殖中沙門氏菌是重要的細(xì)菌性致病原。我國毛皮動物養(yǎng)殖起步較晚，但發(fā)展迅速，養(yǎng)殖數(shù)量和密度較大，存在養(yǎng)殖技術(shù)相對落后，管理粗放等問題，致使動物發(fā)病率較高，尤其是細(xì)菌性疾病，給養(yǎng)殖場造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。本文對65份病死水貂病料中的沙門氏菌進行分離鑒定，分離率為13.85%，并通過小鼠致病性試驗發(fā)現(xiàn)分離菌株均具有一定的毒力。李鵬用多重PCR方法檢測268份水貂胴體及內(nèi)臟組織，沙門氏菌檢出率0.75%(2/268)；劉亭亭從2009—2017收集的水貂病料中檢測出5株沙門氏菌。在李和劉亭亭報道均有沙門氏菌檢出，但檢出率均比本文低，這可能與檢測方法和病料來源、時間等條件不同有關(guān)。

沙門氏菌有多種耐藥性產(chǎn)生機制，并可通過多種方法從環(huán)境中獲得耐藥性，給沙門氏菌病的防治造成困難。本文對9株水貂源沙門氏菌的耐藥性進行研究，發(fā)現(xiàn)多重耐藥菌株高達100%，而試驗的15種抗生素中有5種抗生素耐藥性達100%，表明分離菌株耐藥情況較為嚴(yán)重，且部分抗生素對分離菌株未表現(xiàn)出抗菌效果。據(jù)孫娜等報道，其分離的7株水貂源沙門氏菌具有多重耐藥現(xiàn)象，對頭孢曲松、左氧氟沙星、氟苯尼考和多黏菌素較敏感，對氨基糖苷類藥物、四環(huán)素和氨芐西林表現(xiàn)為耐藥。據(jù)王海龍等報道，其分離的水貂源沙門氏菌對環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星、克林霉素、頭孢曲松鈉高敏，對萬古霉素、硫酸黏菌素中敏，對丁胺卡那霉素、氨芐西林、慶大霉素低敏。在本文與孫娜等、王海龍等的報道中，水貂源沙門氏菌均存在多重耐藥現(xiàn)象，且耐藥情況不同，這可能是由于時間、飼養(yǎng)與治療方式不同造成的。在臨床治療水貂沙門氏菌病時，建議可先通過藥物敏感性試驗篩選出最佳的抗菌藥物，制定合理的給藥方案，避免長期大劑量使用抗生素，減少養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟損失。

本文對秦皇島地區(qū)水貂源沙門氏菌進行分離鑒定，分離率13.85%(9/65)；對分離菌株的致病性及耐藥性進行研究，發(fā)現(xiàn)分離菌均具可致小鼠出現(xiàn)不同程度死亡，并分別對5—11種抗生素藥物耐藥，氟苯尼考、替米考星、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶和復(fù)方新諾明的耐藥率高達100%，耐藥情況較為嚴(yán)重，為該地區(qū)水貂沙門氏菌病的預(yù)防和治療提供參考。

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