北方偉業(yè)計量集團有限公司
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，氯化鈉：10.0，瓊脂：15.0，pH：7.0±0.2（25℃） |
| 傳代方法 | 1. 感受態(tài)細胞放置冰中融化 (或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅 速插入冰中) ，加入目的 DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手撥打 EP 管底輕輕混勻，冰上靜置 25 分鐘。 2.42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基LB，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。 4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上。 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少17h。 |
| 生長條件 | 37℃；18-24h；好氧 |
| 存儲條件 | -80℃ |
| 安全等級 | 1 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 |
pVAX1
(pVAX1)
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pCMV-HA-Ub
(pCMV-HA-Ub)
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(Escherichia coli Stbl3（LentiCRISPR V2）)
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(Escherichia coli DH5ɑ（pLVX-IRES-puro）)
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(BJ5183 Chemically Competent Cell)
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