北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
培養(yǎng)基 | 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,瓊脂:15.0,pH:7.0±0.1(25℃) |
傳代方法 | 1.DH5α 感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化 (或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅 速插入冰中) ,加入目的 DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手撥打 EP 管底輕輕混勻,冰上靜置 25 分鐘。 2.42℃水浴熱激 45 秒,迅速放回冰上并靜置 2 分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基LB,混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。 4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上。 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少17h。 |
生長(zhǎng)條件 | 37℃;18-24h;好氧; |
存儲(chǔ)條件 | -80℃ |
安全等級(jí) | 1 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說(shuō)明書文件 |
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