北方偉業(yè)計量集團有限公司
培養(yǎng)基 | 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃) |
傳代方法 | 1、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl無菌水溶解質(zhì)粒,室溫放置1min; 2、從-80°C冰箱中取出相應的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標記; 3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min; 4、42°C熱激90s,再冰浴2min; 5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min; 6、6000rpm離心5min,僅留100μl上清混勻菌體沉淀; 7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體; 8、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h; 9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒。 注意:如果第二天轉(zhuǎn)化平板長的過多,請將質(zhì)粒按比例稀釋后再轉(zhuǎn)化。 |
生長條件 | 37℃;18-24h;好氧 |
存儲條件 | 2-8℃ |
安全等級 | 0 |
應用領(lǐng)域 | 科研 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說明書文件 |
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