北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
| 培養(yǎng)基 | 500mlECM+25mlFBS+5mlECGS+5mlP/S |
| 傳代方法 | 復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代：1.將瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基棄掉，加入PBS潤(rùn)洗兩遍2.加入2.5mL胰酶（T/E溶液）輕輕搖晃燒瓶，以確保用T/E溶液完全覆蓋細(xì)胞。用顯微鏡監(jiān)測(cè)細(xì)胞形態(tài)的變化3.一旦細(xì)胞開始變圓，將 T/E 溶液從燒瓶轉(zhuǎn)移到 15 ml 離心機(jī)中管（一小部分細(xì)胞可能會(huì)分離）并繼續(xù)在 37℃ 下孵育培養(yǎng)瓶1分鐘（此時(shí)燒瓶中沒有溶液）4.在孵育結(jié)束時(shí)，輕輕拍打燒瓶的一側(cè)，將細(xì)胞從表面移出。在顯微鏡下檢查，確保所有的細(xì)胞都脫落。5.在燒瓶中加入5 ml TNS溶液，將分離的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到15 ml離心管中。再用5 ml的TNS沖洗燒瓶，收集殘留的細(xì)胞。6.在顯微鏡下觀察燒瓶是否成功收獲細(xì)胞，觀察留下的細(xì)胞數(shù)量；應(yīng)該少于5%。7.將15 ml離心管以1000 rpm離心5分鐘。在培養(yǎng)基中輕輕地重懸細(xì)胞。8.注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存。 |
| 生長(zhǎng)條件 | 37℃；5%CO2+95%空氣； |
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
| 存儲(chǔ)條件 | 液氮 |
| 安全等級(jí) | 0 |
| 形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞，梭形，單層貼壁生長(zhǎng) |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 支原體檢測(cè)報(bào)告 |
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