北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
培養(yǎng)基 | SV40MES13細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基:71.25%DMEM-H+23.75%F-12+5%FBS+14mM HEPES |
傳代方法 | 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速?zèng)]入 37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以 1 分鐘內(nèi)全部 溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有 9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘,棄去 上清液,用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有 5-6mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS 清洗兩遍后,加入 1-2mL 胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況, 在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù) 消化),直接吸掉胰酶,加入 5-6 毫升完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基 pH 值變化和細(xì)胞密度,定期換 液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。 |
生長(zhǎng)條件 | 培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣; |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
存儲(chǔ)條件 | 液氮 |
類(lèi)型 | 貼壁生長(zhǎng) 系膜細(xì)胞 |
安全等級(jí) | 2 |
形態(tài) | 貼壁,肌成纖維細(xì)胞樣 |
分離基物 | 腎小球系膜細(xì)胞 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | SV40 MES 13細(xì)胞的細(xì)胞骨架染色突出呈現(xiàn)肌動(dòng)蛋白,在細(xì)胞質(zhì)中有豐富的平行微絲。有報(bào)道稱(chēng),在1uM血管緊張素Ⅱ存在下,SV40 MES 13細(xì)胞會(huì)收縮。SV40 MES 13細(xì)胞在軟瓊脂中形成克??;SV40大T抗原陽(yáng)性。 |
共享方式 | 公益性共享 |
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