北方偉業(yè)計量集團有限公司
| 培養(yǎng)基 | 90%DMEM-H/F12+10%FBS |
| 傳代方法 | 復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中，迅速沒入 37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以 1 分鐘內(nèi)全部 溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有 9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm/min 離心 3-5 分鐘，棄 去上清液，用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有 6-8mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代：①將培養(yǎng)液（含懸浮細(xì)胞）吸至離心管中，1000RPM 條件下離心 5 分鐘，收集細(xì)胞；②用 PBS 輕輕潤洗 T25 瓶兩遍后，加入 1-2mL 胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸 管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見細(xì)胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入 5-6 毫升 完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。③將上述兩步操作所得細(xì)胞混勻在一起后按 1:2 比例分到新的 T25 瓶 中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基 PH 值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達到 80%-90%時，重復(fù) 1 項操作或者凍存。 |
| 生長條件 | 培養(yǎng)溫度37℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣； |
| 生長特性 | 半貼半懸生長 |
| 存儲條件 | 液氮 |
| 類型 | 髓母細(xì)胞瘤 |
| 安全等級 | 1 |
| 形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣，短梭形，圓形 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 支原體檢測報告 |
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